Dra. Ela Alvarado A.

TEMAS A DESARROLLAR
Introduccin a la Gentica. Importancia.
Terminologa mas usada.
Mtodos clnicos y mtodos de laboratorio.
rbol Genealgico Familiar.
Obtencin de cromosomas in vitro.
Cultivos celulares.
Mencin de Ciclo celular y divisin celular.
Cromosomas humanos: morfologa clasificacin,
identificacin.
Tcnicas de bandeo: G, C, Q, NOR, ICH, FISH.
Cromatina sexual - Hiptesis de Lyon.
Cromosomopatas Sexuales: Sndromes de Turner
y Klinefelter y similares.
RAMAS O CAPTULOS DE LA GENTICA
CITOGENTICA
GENTICA MOLECULAR
GENTICA BIOQUMICA
GENTICA POBLACIONAL
INMUNOGENTICA
FARMACOGENTICA
INGENIERA GENTICA
GENTICA DEL COMPORTAMIENTO
LA GENTICA, LA LEY Y LA BIOTICA
TERMINOLOGA
ALELOS, HOMOCIGOTOS, HETEROCIGOTOS,
HEMICIGOTO
DOMINANCIA Y RECESIVIDAD
GENOTIPO Y FENOTIPO
CONGNITO Y HEREDITARIO
HERENCIA Y AMBIENTE
MOSAICISMO
I. MTODOS CLNICOS DE LA GENTICA
1. AMNIOCENTESIS
2. RADIOGRAFAS
3. ULTRASONOGRAFA
4. FETOSCOPA
5. MANIPULACIN DE CLULAS GERMINALES
6. EMBRIONES IN VITRO
7. INGENIERA GENTICA
8. PREDICCIN DEL SEXO
9. PRODUCCIN DE CLONES
10. PROCREACIN SELECTIVA
RBOL GENEALGICO FAMILIAR
DEFINICIN: o heredograma, o pedigr. Es un mtodo
abreviado en las que se representa esquemticamente
mediante smbolos conocidos la historia de una familia
indicando las personas afectadas y el parentesco que guarda
con el propsitus, probando o caso ndice
RBOL GENEALGICO FAMILIAR
SMBOLOS MAS USADOS
RBOL GENEALGICO FAMILIAR
SMBOLOS MAS USADOS
A. G. BRAQUIDACTILIA
II. MTODOS DE LABORATORIO
CICLO CELULAR
Telomero
Centrmero
TECNICAS DE COLORACION
I. COLORACION CONVENSIONAL
1. Bandas Q
2. Bandas C
3. Bandas G
4. Bandas R
5. Bandas NOR
6. Bandas G-11
7. ICH
8. FISH
II. DIFERENTES TCNICAS DE BANDEO
CROMOSMICO
TECNICAS DE BANDEO CROMOSOMICO
BANDAS Q: Casperson, 1971.
Se colorean con mostaza de quinacrina o dihidroclorato de
quinacrina.
Se visualiza en microscopio de fluorescencia.
Fluorece en presencia de ADN rico en A-T (Ellison y Barr,
1972).
Las bases G-C rompen la fluorescencia (Commings, 1975-1978).
Las proetnas NO HISTONAS limitan el acceso a la zona G-C
(Pachman & Riegler, 1972).
TECNICAS DE BANDEO CROMOSOMICO
BANDAS G: Summer, 1971.
GIEMSA: Colorante derivado de las TIAZINAS, que son molculas
planas con carga (+) que interactan con los grupos fosfatos del
ADN por fuerza inicas.
Las bandas G (+) corresponden a CROMATNA LIBRE para
unirse al colorante.
Las bandas G (-) son DNA cubierto o no disponible y en
parte extrado.
Las bandas G (-) son ricas en G-C de replicacin temprana, se
relacionan con genes estructurales. Dan lugar a bandas G
claras.
TECNICAS DE BANDEO CROMOSOMICO
BANDAS G (continuacin)
Las bandas G (+) son ricas en A-T que replican tardiamente
con genes de tejido especficos (ej. gen de la -globina), sin
embargo replican temprano en el tejido que expresa el gen. Dan
lugas a bandas G oscuras (+).
Utiliza la tripsina (desnaturaliza las protenas).
TECNICAS DE BANDEO CROMOSOMICO
BANDAS C: Pardue & Gall, 1970.
Para marcar la heterocrmatina constitutiva.
Extraccin del DNA no pericentromrica (heterocromatina de
la regin centromrica). 20% del genoma humano.
Se trata con solucin de hipoclorito de sodio a temperatura
ambiente y se lava con solucin salina.
Resultado: Se observa la marcacin de la heterocromatina
constitutiva de distribucin pericntrica en todos los
cromosomas a excepcin del Y que se encuentra en el brazo
largo. Tie las constricciones secundarias de los cromosomas 1,
9 y 16.
TECNICAS DE BANDEO CROMOSOMICO
BANDAS R: Dutrillaux & Lejuene, 1971.
Llamadas tambin bandas REVERSA, por ser el reverso de las
Bandas G.
Se obtienen con tratamiento de temperatura y colorante Giemsa.
Tambin bandas R fluorescentes con ACRIDIA ORANGE.
Detecta DNA rico en G-C.
Denatura DNA rico en A-T.
Especialmente til en rearreglos terminales y polimorfismos.
Se usa cuando se sospecha que los telomeros participan en
alguna anormalidad.
TECNICAS DE BANDEO CROMOSOMICO
BANDAS NOR: Ferguson-Smith, 1961.
FUNDAMENTO: Emplea plata amoniacal para teir regiones de los
organizadores nucleolares, que contienen ARNr localizados.
Para ver polimorfismo de los satlites.
Las regiones NOR se ubican e el tallo del satlite de los
cromosomas acrocntricos, correspondiendo a protenas NO
HISTONAS que aparecen con la sntesis del ARNr.
RESULTADOS: Las constriciones secundarias de los
cromosomas acrocntricos con satlite se tien en los tallos con
plata amoniacal.
TECNICAS DE BANDEO CROMOSOMICO
BANDAS G-11:
FUNDAMENTO: Modificacin de la banda G con pH elevado
para demostrar variantes normales comunes (polimorfismos).
RESULTADOS: Se tien:
las constricciones secundarias del cromosoma 9,
el segmento distal largo del cromosoma Y,
el rea pericntrica del cromosoma 20.
TECNICAS DE BANDEO CROMOSOMICO
ICH (INTERCAMBIO DE CROMATIDES HERMANAS)
Mediante la autoradiografa usando sustancias como
Bromo-desoxiuridina que sustituye a la timidina.
Se observa el intercambio entre los segmentos de las
cromatides hermanas. Se realizan normalmente de 6-9
intercambios por metafase, y aumentan cuando se
exponen a mutgenos o en algunas enfermedades
donde se observan los GAPS sitios frgiles como
brechas que no se tien bien.
TECNICAS DE BANDEO CROMOSOMICO.
FISH (HIBRIDACION FLUORECENTE I N SI TU)
Se emplean sondas (PROBES) especficas para la coloracin de
determinados cromosomas, y disgnostican anomalas
cromosmicas.
FUNDAMENTO: A partir del ADNc o ADN genmico. La
sonda se marca y se aade por hibridacin, y la seal se
identifica por autoradiografa o fluorescencia. Se observan
grnulos en la zona que hubo hibridacin
Gen glicogeno fosforilasa 1 del msculo en el cromosoma 11
Baja resolucin
Alta resolucin
R
e
g
i

n

B
a
n
d
a

HETEROMORFISMOS CROMOSOMICOS
Las diferencias interindividuales en el contenido de ADN de
los cromosomas se han precisado mediante la CITOMETRIA
DE FLUJO O MICRODENSITOMETRIA.
Existen cuatro grupos principales:
1. TAMAO DEL BRAZO q DEL CROMOSOMA Y:
FRECUENCIA: 10% de los hombres tienen el
cromosoma Y mas largo y mas corto que lo usual.
COLORACION: BANDAS Q Y BANCAS C.
HETEROMORFISMOS CROMOSOMICOS
2. TAMAO DE LA HETEROCROMATINA
CONSTITUTIVA:
VARIACIONES EN LOS CROMOSOMAS 1, 9, 16.
TINCION: BANDAS C.
3. POLIMORFISMOS DE LOS SATELITES:
VARIACIONES EN LOS CROMOSOMAS 13, 14, 15, 21, 22.
TINCION: BANDAS Q Y NOR.
4. SITIOS FRAGILES:
Rasgos estructurales de los cromosomas que se hacen visibles en
cieras condiciones en el cultivo de tejidos. Se heredan en forma
codominante, por lo menos existen 20 sitios frgiles comunes y 18
sitios raros.
CARIOGRAMA
NORMAL
SISTEMA INTERNACIONAL DE NOMENCLATURA
PARA CITOGENTICA HUMANA
- DEFINICIONES MAS USADAS EN CITOGENTICA HUMANA:
CARIOTIPO, CARIOGRAMA E HIDIOGRAMA.

- NOMENCLATURA CROMOSMICA IS C N ( INTERNATIONAL
SYSTEM CYTOGENEITC NOMENCLATURE ) 1,995

- En cromosomas normales : Varn normal : 46,XY
Mujer normal : 46,XX
- En anomalas numricas : S. de Down : 47,XY,+21
S. de Klinefelter : 47,XXY

- En anomalas estructurales : S. Cri-duchat : 46,XY,del(5)(p15)
S. de Down : 46,XX, der ( 14;21) (q10;q10),+21
Anomala en cromosoma sexual X : 46,X, r (X) (p13 q26)

SMBOLOS MAS USADOS EN LA NOMENCLATURA
CROMOSMICA

A G Grupos cromosmicos pat Origen paterno
1 22 Numeracin de autosomas mar Marcador
X, Y Cromosomas sexuales dic Dicntrico
/ Indica mosaicismo fra Sitio Frgil
del Delecin h Heterocromatina
dup Duplicacin p Brazo corto
i Isocromosama q Brazo largo.
ins Insercin
inv Inversin
mat Origen materno


SMBOLOS MAS USADOS EN LA NOMENCLATURA
CROMOSMICA

r Cromosoma en anillo
s Satlite
t Translocacin
t rep Translocacin robersoniana
t rob Translocacin tandem
ter o qter Terminal
desde hasta
+ (delante del N de cromosoma indica adicin)
Ej +21
- (indica prdida) Ej 5p
-
CROMOSOMAS EN INTERFASE
(CROMATINA SEXUAL)
LYONOZACIN O INACTIVACIN DEL CROMOSMA X
HIPTESIS DE LYON

Lyonizacin: ( Mary Lyon en 1,961) Proceso por el cual uno de los crom.X
en la mujer se inactiva al azar en c/u de las clulas somticas
Proceso de desarrollo q afecta al cro. X en etapas sucesivas
an incompletamente conocidas.

GEN XIST : Responsable de la inactivacin caracterstica de 1 de los 2
crom. X de la mujer y se manifiesta citolgicamente como
corp. de Barr. Un EH de 14 da es mosaico para el Xm Xp .

Aspectos moleculares de la H.L. :
El gen XIST est ubicado en el Xp13, estrechamente ligado
al gen RP4X y al PHKA1, se extiende por cerca de 80 kb.
Consta de 8 exones y su producto de transcripcin es >15 kb

Algnos genes q se encuentran en el X inactivo son resisten
a la lionizacin y mantienen su actividad transcripcional.




ASPECTO MOLECULAR DE LA CROMATINA SEXUAL

La cromatina sexual es un complejo de ADN mas histonas
(Arg Lis).

Estas proteinas son de dos grupos :
- Histonas proteinas pequeas con alto contenido de aa
bsicos, se distribuyen en paquetes de 8 moleculas: H
2
A,
H
2
B, H
3
y

H
4.

H
1
, se encuentra en el ADN espaciador y en la parte
externa de los nucleosomas.
- No histonas grupo heterogneo, forma la estructura de los
cromosomas, otros se relacionan con la transcripcin y la
replicacin.
ASPECTO MOLECULAR DEL CORPSCULO DE BARR
La cromatina en el nucleo se puede encontrar en dos formas:

- Heterocromatina: forma inactiva condensada, localizada en la
periferia del nucleo. Se tie fuertemente,
replicacin tardia.

a.- H. Constitutiva: Carece de informacion
gentica.

b.- H. Facultativa: Contiene informacin de los
genes que no se expresan.

-Eucromatina: forma activa condensada. Se tie debilmente,
contiene la mayoria de los genes estructurales.
CROMOSOMOPATAS SEXUALES FRECUENTES
FENOTIPO FEMENINO:
SINDROME DE TURNER 45,X0
TRISOMIA X 47,XXX
SINDROME PENTA X 49,XXXXX
FEMINIZACION TESTICULAR 46,XY

FENOTIPO MASCULINO:
SINDROME DE KLINEFELTER 47,XXY
SINDROME XXXXY 49,XXXXY
HOMBRES XYY 47,XYY
VARONES XX 46,XX
SINDROME DE NOONAN 46,XY
SINDROME
DE
TURNER
FRECUENCIA:
1/2500 recien nacidos
vivos de sexo femenino
90% de embriones con
cariotipo 45,X0 son
abortados en el primer
trimestre.
En Mxico la talla
promedio de mujeres 45,X0
es 1.376 +/- 0.58 cm.
SIGNO POR
CIENTO
Talla baja
Cubitus valgus
Implantacin baja del cabello
Epicanto
Linfedema
Malformacin renal
Pterygium coli
Cardiopata congnita
Nevos pigmentados
Metacarpo, metatarso o falanges cortas
100
95
78
76
67
60
59
53
44
33
HALLAZOS CLINICOS MAS FRECUENTES EN EL
SINDROME DE TURNER CON 45,X0
SINDROME DE
TURNER
SINDROME DE TURNER
SINDROME DE
TURNER
CARIOTIPO
SINDROME DE
TURNER
TRISOMIA X
CARIOTIPO : 47, XXX

INCIDENCIA: 1/1,000 1/2,000 R.N. vivas.


FENOTIPO: Amenorrea secundaria, hipoplasia de labios menores.
Mas alta que el resto de las nias en su familia.
El 75% son frtiles. R.M. en 25% de ellas.
Prinera infancia con alteraciones de carcter y
posterior esquizofrenia y psicosis.
Problemas mentales de aprendizaje y comportamiento.
Trastornos neuroepilepticos similar a XXY.
Efecto de edad materna avanzada.
SNDROME PENTA X
CARITIPO : 49,XXXXX

FENOTIPO :
Hendidura parpebral mongoloide.

Hpertelorismo, coloboma del iris.

Conducto artereoso permeable.

Odos de asentamiento bajo.

Cuello corto, surco simiescos, equinovaro.

Manos pequeas con clinodactilia en
los meiques.
FEMINIZACIN TESTICULAR (PSEUDOHERMAFRODITISMO
MASCULINO)
CARIOTIPO : 46, XY

FENOTIPO : Fenotipo externo es
como el de una mujer nomal.

Vagina termina en fondo de saco, no
existe tero ni trompas de Falopio.

Testculos de ubicacin abdominal o
inguinal.

Causada por receptores de andrgenos
SINDROME DE KLINEFELTER
HALLAZGOS CLINICOS:
Hipoplsia testicular con azoorpermia u oligospermia.
Caracteres sexuales deficinetes por niveles disminuidos de
testosterona.
Ginecomastia uni o bilateral en 40%.
Escaso vello pbico. Hbito eunucoide.
Retardo metal moderado nunca profundo (CI = 10-15 ptos
menor a los normales).
15% de casos son mosaicos y algunos son frtiles. Otros
mosaicos con 3 o ms lneas celulares se observan
ocasionalmente.
SINDROME DE
KLINEFELTER
FRECUENCIA:
1/1000 nacidos vivos de sexo
masculino.
100/1000 en varones infestados.
10/1000 en varones en
instituciones para retardados
mentales.
CARIOTIPO
SINDROME
KLINEFELTER
SINDROME XXXXY
CARIOTIPO: 49,XXXXY

- Cuello corto, esternon grueso.

- Hipogenitalismo, pronacin limitada de los codos.

- Recuento bajo de crestas drmicas en los pulpejos digitales.

- Deficiencia mental, C.I. medio 34

- Peso y estatura baja al nacimiento.

- Hipertelorismo, estrabismo, epicantos internos.

- Prognatismo mandibular.
VARONES XYY
CARIOTIPO : 47, XYY

- Frecuencia: 1/1,000 R.N. vivos. En varones internados en
instituciones para subnormales mentales es de 20/1,000.
Entre hombres adultos deficientes mentales 3/1,000.

- Fenotipo: Presentan untamao mayor de los diente, mas
alto que sus hermanos. Testculos de tamao normal.

- Algnos tienen problemas de comportamineto social.

- Funcin endocrina conservada. Se reproducen
normalmente
VARONES XX
CARIOTIPO: 46,XX

- Frecuencia: 1/20,000 R.N. vivos.

- Etiologa: En el 80% de los casos el cariotipo demuestra
transferencia de material gentico: Yp11.2 al Xp.

- El 20% de los casos se identifica por analisis de ADN o por
hibridacin in situ y en Xp.

- Fenotipo: son infrtiles con manifestaciones exocrinas semejantes al
Sndrome de Klinefelter. Testculos pequeos. Inteligencia normal.
Desproporcin esqueltica entre el segmento superior e inferior.
SINDROME DE NOONAN
- CARIOTIPO: 46,XY

-FENOTIPO : Similar al Sndrome de Turner:
- Pabellones auriculatres de asentamiento
bajo y/o anormales.Implantacin baja de
cabello. Pterigion coli.

- Estatura baja.Torax en escudo, pectus
escavatum.

- Cardiopata congnita: estenosis de la
pulmonar, defectos septales.

- Pene y testculos pequeos. Criptoqudea.