ELISA Enzyme Linked

ImmunoSorbent Assay

ELISA si EIA

Metode imunologice
Replici a imunodeterminarilor realizate cu
izotopi radioactivi (IRMA, RIA)

ELISA/EIA

Incepand din 1980, a fost dezvoltata utilizarea

enzimelor si fluoroforilor ca substante de marcaj
in imunodeterminari, in timp ce cea a izotopilor
a scazut la 25%.
In prezent, enzimele se utilizeaza in proportie de
35%, iar substantele de marcaj fluorescente in
proportie de 15%.
Dintre enzime, peroxidaza din hrean (HRP) si
fosfataza alcalina sunt cele mai utilizate.

ELISA

Metoda predominanta in determinarile din

domeniul medicinei, biotehnologiei si
stiintelor agricole
Metoda care masoara cantitatea de
antigen dintr-o proba

Cautari ELISA in ScienceDirect

database

Utilizarea ELISA in diferite

domenii de activitate

Utilizarea ELISA in analiza

alimentelor

OMG
Micotoxine
Substante alergene
Antibiotice
Originea carnii/laptelui/pestelui
Alimente iradiate

ELISA competitiva cu antigene

marcate

Competitie
intre antigene
marcate si
antigene
nemarcate
pentru legare
la anticorp

ELISA competitiva cu anticorpi

marcati

Competitie
intre
antigene
imobilizate
si
antigene
libere
pentru
legare la
anticorp

ELISA tip sandwich

ELISA sandwich in care marcarea

anticorpului se realizeaza cu
biotina-streptavidina -HRP

ELISA

ELISA

ELISA necompetitiva
cu anti-anticorp marcat

High Sensitivity ELISA

ELISA sandwich conventionala, care utilizeaza pentru detectie marcajul

Biotina-Streptavidina-HRP

High Sensitivity ELISA

Reactivul de amplificare I contine biotinil-tiramide. HRP converteste

moleculele de biotinil-tiramida in derivati inalt reactivi (radicali
liberi), care se leaga covalent de orice proteina din godeu (ex.
Proteine de blocare).

High Sensitivity ELISA

Cantitatea de biotiniltiramida care a
reactionat este direct
proportionala cu
cantitatea de HRP din
godeu. Dupa
incubare, biotiniltiramida care nu s-a
legat de proteinele
din godeu este
indepartata prin
spalare. Se adauga
reactivul II, care
contine StreptavidinHRP, care se leaga
biotina. Astfel, se
obtine o amplificare a
activitatii enzimatice.

ELISA

ELISA folii de protectie a placilor

Cititoare ELISA

ELISA - carti

http://sciencebookss.blogspot.com/2009/05/elisa-guidebook.html

ELISA avantaje fata de alte metode

utilizate in detectia melaminei in
laptele praf

ELISA avantaje fata de alte metode

utilizate in analiza alimentelor
Simpla
Reproductibila
Permite cuantificarea
Permite determinarea simultana a mai multor
probe
Mai ieftina decat alte metode