UROCULTIVO

INTRODUCCION
La infeccin de tracto urinario (ITU) es una de
las infecciones ms frecuentes, que puede
afectar tanto a pacientes internados, como
ambulatorios. Esta patologa se presenta en
nios y adultos, alcanzando su mayor
prevalencia en las mujeres.

Etiologa

La ITU generalmente es monobacteriana. El

grmen ms frecuente es Escherichia coli (85%),
seguido por Klebsiella pneumoniae, Proteus
mirabilis, Candida sp., Enterobacter sp .Con
menos frecuencia es causada por otras
enterobacterias, Pseudomonas aeruginosa,
Enterococcus spp. Staphyloccocus saprophyticus
es un agente relativamente frecuente de ITU
baja.
Hasta en 15% de personas con sntomas de ITU
no se asla germen en el urocultivo

Prevalencia de Grmenes en urocultivos de mujeres

Prevalencia de Grmenes en urocultivos de Varones

mayores de 45 aos

Recoleccion de muestra
La muestra de eleccin es el chorro medio miccional. El
tiempo de retencin deseado es de, por lo menos, 3 horas.
Mujeres: se debe higienizar la zona genital con agua y
jabn, de adelante hacia atrs, secar con toalla limpia.Se
elimina el primer chorro (10 ml) y se recolecta en frasco
estril la fraccin siguiente (10-20 ml). Se recomienda
orinar separando los labios mayores.
Hombres: se debe retraer el prepucio e higienizar el glande
y surco balanoprepucial con agua y jabn, y secar con toalla
limpia. Se elimina el primer chorro (10 ml) y se recolecta en
frasco estril la fraccin siguiente (10-20 ml). Se
desaconseja el uso de antispticos, ya que pueden afectar
el resultado del urocultivo, provocando un descenso en el
recuento de colonias.

Transporte de la muestra
La orina es un buen medio de cultivo que permite la
multiplicacin de los microorganismos incrementando el
recuento bacteriano, por lo que las muestras deben
procesarse antes de 2 horas de obtenidas. Si ello no es
factible, las muestras deben refrigerarse a 4C. Una muestra
puede mantenerse refrigerada, sin que se altere el recuento
bacteriano, durante 24 horas.
Los preservantes que inhiben la multiplicacin bacteriana no
han resultado mejores que la refrigeracin, son de alto costo y
tienen el inconveniente de interferir con algunas
determinaciones de la tira reactiva de orina.

Sedimento urinario
El sedimento de orina, realizado con una muestra
correctamente recolectada, es una herramienta
fundamental para la interpretacin del urocultivo.
Sin embargo, su sensibilidad y especificidad
depende de ciertos factores, como el tipo de
muestra, el tiempo de retencin, el sexo y la edad
del paciente y la presencia de otras patologas. Se
considera que un sedimento de orina no es
normal cuando una gota del centrifugado de 10
ml (10 min. a 2.000 rpm) contiene ms de 5
leucocitos por campo de 400X.

MATERIALES
MEDIOS

Las bacterias para su desarrollo requieren de sustancias nutritivas cuyos

componentes bsicos deben satisfacer las mnimas exigencias nutricionales y
condiciones de atmsfera (aerobiosis, anaerobiosis, microaeroflia), pH y
temperatura ptima para su crecimiento in vitro.
La eleccin de los medios de cultivo se realiza en funcin a la localizacin de las
infecciones y las bacterias a investigar. Los errores cometidos durante este paso
del ciclo de procedimientos pueden invalidar la lectura e interpretacin de los
cultivos.
Los medios usados son:
Placas con agar sangre de carnero (AS)
Placas con agar Mc Conkey (McC)
Otros medios: para hongos si es necesario Agar Sabouraud
Asa calibrada: asas de de platino o descartable , se pueden usar las siguientes
medidas:
0.001 ml ( 1ul) para detectar colonias mayores de 1000 UFC/ml
0.01 ml (10ul) para detectar colonias entre 100 1000 UFC/ml

ETAPA ANALITICA
I.- MICROSCOPIA Y OTROS METODOS DIRECTOS

Tincin de Gram y Examen directo de la muestra

Es un mtodo rpido, econmico, sensible y especfico para detectar bacteriuria.
Para determinar el tipo y conteo de bacterias y clulas en la orina. Se recomienda
realizarlo como respaldo frente a discordancias o hallazgos especiales ms que
como screening. Para pacientes hospitalizados es muy til en ayuda al diagnstico
como causa de sepsis antes que un cultivo hemocultivo positivo.
Debe aplicarse a la muestra recin agitada sin centrifugar, con el mismo asa de
1l (o de 10 l) empleado en la siembra del urocultivo, depositando este volumen
en un portaobjetos; pueden colocarse hasta 10 muestras por lmina. Estas se
tien y pueden ser observadas cuando existen discordancias entre el urocultivo y
el examen directo.
La presencia de una bacteria/campo de inmersin tiene buena correlacin con >
100.000 UFC/ml en ~ 85% de los casos.
La presencia de muchas clulas epiteliales y morfotipos microbianos diferentes
sugieren contaminacin.

II.- Cultivo microbiolgico

La metodologa de la inoculacin de la muestra en medios de cultivo o
siembra microbiolgica depende de la forma de obtencin de la muestra:
Para orinas de segunda miccin, recolector y catter a permanencia, las
muestras deben sembrarse con asa de 1 l en placas de un medio
enriquecido como Agar Sangre y algn medio selectivo-diferencial: Agar
Mac Conkey. El desarrollo de una colonia en el cultivo debe multiplicarse
por 1000.
Para orinas obtenidas por cateterizacin vesical, las muestras pueden
sembrarse con asa de 10 (1 colonia = 100 ufc/ml) y 1 l (1 colonia = 1000
ufc/ml).
Para orinas obtenidas por puncin vesical, se recomienda la siembra en
agar sangre ms un medio selectivo-diferencial para bacilos Gram
negativos o siembra directa de 100 l (1 colonia = 10 ufc/ml).

Inoculacin
Usar el asa calibrada, flamear,
dejar enfriar, mantener en
posicin vertical introducir lsolo
el aro debajo del nivel de la
orina previa mezcla de la orina
sin centrifugar.
Estriar en la placas de cultivo de
la siguiente manera:
Divividir la placa de agar sangre
y Mac Conkey en 4 cuadrantes.
Con el asa de 1 ul inocular un
cuadrante de cada medio,
realizando una estria lineal y
despues realizar una
diseminacion.

Sin flamear el asa estriar atravesndola lnea del inoculo en el sentido de

las flechas.

Incubacin
Una vez sembradas las placas deben incubarse durante 24 horas a 35 - 37
C. Incube 48 horas aquellos urocultivos negativos con sedimento urinario
alterado.
Si es conveniente incubar en atmsfera de CO2 5% las placas de Agar
Sangre si se requiere para el crecimiento de gram positivos.

Examinacin del medio de cultivo

Al momento de informar los urocultivos, se recomienda
revisar el resultado del sedimento para que ambos informes
sean concordantes.
Es necesario definir qu se entiende por sedimento sugerente
de ITU para poder evaluar las discordancias entre el
sedimento y el urocultivo:
Piocitos: > 10 /ul > de 5-6 por campo de 40x
Leucocitos: > 10 /ul > de 5-6 por campo de 40x
Bacterias: Regular o abundante cantidad
La presencia de clulas descamativas y/o mucus en una
paciente mujer, sugiere que la muestra est contaminada con
secrecin vaginal.

Urocultivo negativo con sedimento

alterado
Examinar los cultivos que han sido incubados toda la noche para una
lectura final de mnimo 18 horas al menos que la muestra requiera otras
recomendaciones.
Reincubar el cultivo por 48 horas ,de ser posible, solicitar nueva muestra
si sigue alguno de estos criterios:
La muestra ha sido obtenida por una tcnica invasiva, como PSP o por
Cateterizacin.
Pequeas o pocas colonias que hacen una lectura discernible.
Los resultados no correlacionan con la tincin gram o la sintomatologa
clnica ( Ej.: piuria o con sintomatologa y cultivo negativo)
Paciente inmunosuprimido incluye pacientes que han sido
transplantados.
Se requiere cultivo para hongos o levaduras ( ejm: cultivos de UCI
neonatal)
Comunicarse con el mdico tratante ya que existen otras causas de
sedimento urinario alterado que no corresponden a ITU o para saber si
el paciente est recibiendo antibiticos.

Urocultivo positivo
Recuento de colonias de acuerdo al asa calibrada usada,
multiplicar segn la dilucin.
0.001 mL
1 colonia = 1000 UFC/ml
0.01 mL
1 colonia = 100 UFC/ml
Cuando las colonias son tan numerosas para el recuento,
tener en cuenta que el mximo de una asa de 0.001 es
> 10 UFC/ml y el mximo para el asa de 0.01 es >10
UFC/ml.
Mantener la cepa de Streptococcus grupo B por 7 das a
temperatura ambiente por si la susceptibilidad sea requerida
ms adelante.
Mantener los cultivos de levaduras por 7 das a temperatura
ambiente por si sea requerida ms adelante.
Trabajar los criterios de acuerdo a las tablas 1 , solo sirven de
gua.

ETAPA POST-ANALITICA
REPORTE DE RESULTADOS
a) Reporte de la Tincin Gram: resultados de bacterias y clulas.
b) Cultivos Negativos,
Reportar: de acuerdo al asa calibrada utilizada.
Negativo dil 1/100UFC/ml o
Negativo dil 1/1000 UFC/ml. por 24 o 48 horas.
c) Cultivos positivos, reportar:
Si solo se observa flora microbiota de piel o urogenital: 10000 UFC/ml microbiota urogenital
normal.
Segn TABLA 1 sobre cultivos mixtos reportar: Rcto. UFC/ml seguido
Multiples morfotipos presentes, posible contaminacin y nueva muestra en condiciones
adecuadas.
Reportar el recuento de colonias de cada patgeno separadamente seguido por la identificacin
presuntiva o definitiva con la susceptibilidad
Cuando se observa inhibicin por antimicrobianos, reportar: Se detect inhibidor antimicrobiano
con su recuento respectivo.
Si no hay crecimiento en la zona primaria pero si en inculo diludo , no reportar recuento pero si
Rcto. disminudo debido a inhibicin antimicrobiana.
Notificar al clnico posibles hallazgos inusuales (Ejm: Salmonella tiphy o Burkholderia
pseudomallei).

Tabla 1. Interpretacin microbiolgica del urocultivo y conducta

recomendada
Recuento de
colonias
(UFC/ml)

Condicin
clnica
o mtodo de
recoleccin

Sedimento
urinario

Microorganismo
aislado

Interpretacin/
Conducta
recomendable

Independiente
del resultado

Urocultivo negativo

Cualquier
recuento

Puncin
suprapbica

Independiente
del resultado

Cualquier
microorganismo

Identificacin y
estudio de
susceptibilidad

1.000

Cateterizacin
transitoria

Independiente
del resultado

< 2 especies
uropatgenas

Idem

> 10.000

Segunda
miccin en
paciente
especial*

Independiente
del resultado

< 2 especies
uropatgenas

Idem

> 10.000

Orina por
catter
permanente

Patolgico

< 2 especies
uropatgenas

Idem

> 10.000

Segunda
miccin

Patolgico

< 2 especies
uropatgenas

Idem

Recuento de
colonias
(UFC/ml)

Condicin
clnica
o mtodo de
recoleccin

Sedimento
urinario

Microorganismo
aislado

Interpretacin/
Conducta
recomendable

> 100.000

Segunda miccin

Patolgico

2 uropatgenos +
otra bacteria con
recuento 10 veces
menos

Identificacin y
susceptibilidad
slo de los
uropatgenos

> 100.000

Segunda miccin

Sin antecedente del

sedimento

< 2 especies
uropatgenas

Identificacin y
estudio de
susceptibilidad

> 100.000

---

---

>3
microorganismos,
sin predominio de
alguno

Polimicrobismo.
Solicite nueva
muestra

Tener en cuenta los siguientes criterios para la interpretacin de

resultados:

a) En pacientes sin sonda vesical, la cuenta significativa de bacterias en orina es la presencia

de mas de 10 UFC / ml de un solo germen, se confirma en 92% de casos si el germen
aislado es gram negativo y en 70%, si es gram positivo.
Recuentos entre 10 y 10 UFC/ml, si el paciente es sintomtico o si el germen es
S. saprophyticus o Enterococcus spp. hacen diagnstico de ITU.

b) Los recuentos intermedio de 10- 10 UFC / ml indican infeccin si el procedimiento de

recoleccin de orina fue realizado correctamente. Grmenes normalmente encontrados en la
piel o genitales externos e internos. Pero en ciertas circunstancias recuentos de 10 UCF/ml
o ms especialmente por Salmonella o Shigella pueden ser considerados significativos

c) Generalmente, el aislamiento de tres o ms especies bacterianas indican que la muestra

se ha contaminado por recoleccin inadecuada o demora en la siembra.

d) En pacientes con sonda vesical, cuentas bacterianas menores de 10 UFC / ml pueden

tener significado, as tambin se pueden encontrar bacteriurias polimicrobianas hasta en casi
15% de enfermos.

e) En pacientes sin catter se puede comprobar si el procedimiento de obtencin de muestra

fue realizado correctamente observando la frecuencia con la cual se informan recuentos de
colonias intermedias entre 103 - 104 UFC / ml. En pacientes sin infecciones del tracto
urinario, el recuento es nulo o se reduce a pocas colonias.

f) En muestras obtenidas por puncin suprapbica, el desarrollo de una sola

colonia en el medio de cultivo indica infeccin del tracto urinario.

g) Si en el urocultivo desarrolla flora polimicrobiana, sospechar contaminacin y

repetir el estudio. Sin embargo hay situaciones en que la flora puede ser
polimicrobiana: portador de sonda vesical, vejiga neurgena , fstula vsicointestinal o vsico-vaginal

h) Cuando el urocultivo es positivo y el paciente est asintomtico, es necesario

repetir el estudio.

i) Proceso del antibiograma de la orina directa no se recomienda.

NOTA 1: Se usar asas de siembra 0.001 mL para todas las muestras de orina a

excepcin de aquellas procedentes de aspirados suprapbicos, de infantes, de

nios y de pacientes con tratamiento antimicrobiano, las cuales se inocularn con
asas de 0.01 mL debido a que en dichos pacientes pueden haber infecciones del
tracto urinario asociados a recuentos menores de 10 UFC/ mL.

Limitaciones
Para ITU no complicadas, los cultivos generalmente no estn indicados, el
curso de 3 das de terapia es suficiente para la cura. Los cultivos y
susceptibilidad son tiles en infecciones recurrentes.
En casos de piuria steril , La tincin Gram es importante. Si el organismos
es visto y no creci en cultivo, cultivo anaerbico debe ser indicado.
Falsos negativos se deben a interferencia de sustancias, orina diluda.orina
con pH bajo y la interpretacin subjetiva de los criterios.
La presentacin de ITU puede ser similares a las infecciones vaginales. El
cultivo vaginal N. gonorrhoea e, Chlamydia y otros agentes de transmisin
sexual deben ser considerados. Agentes de vaginitis o vaginosis pueden
ser includos, como son Gardnerella vaginalis, Micoplasmas, Candida
albicans, otras levaduras y Trichomonas.