Las actuales columnas rellenas se fabrican con un tubo
de vidrio, metal (acero inoxidable, cobre aluminio), o
de tefln con una longitud caracterstica de 2 a 3 m y un dimetro de 2 a 4mm. Estos tubos se rellenan densamente con un material de relleno, o soporte solido, finamente dividido y homogneo, que se recubre con una delgada capa de (0.05 a 1 m) de fase estacionaria liquida. Con objeto de poder introducirlas en un horno termostatizado, los tubos se configuran en forma helicoidal con un dimetro aproximado de unos 15 cm.
El soporte solido en una columna rellena sirve para retener y
ubicar la fase estacionaria liquida, de tal forma que exista la mayor superficie de contacto posible con la fase mvil. El soporte ideal consiste en partculas esfricas, pequeas y uniformes con una buena resistencia mecnica y una superficie especifica de al menos 1 m2/g. Adems el material debera ser inerte a elevadas temperaturas, y poder humectarse homogneamente con la fase liquida. Todava no se dispone de ninguna sustancia que rena perfectamente todas esas caractersticas. En la actualidad el material de soporte utilizado con ms frecuencia se prepara a partir de tierras de diatomeas de procedencia natural, que estn constituidas por esqueletos de miles de especies de plantas unicelulares que habitaban antiguos mares y lagos.
Imagen de una diatomea aumento=x5 potencia de aceleracion
10 kV
Estas plantas tomaban sus nutrientes y eliminaban sus
residuos por difusin molecular a travs de sus poros. Como consecuencia, sus restos resultan muy adecuados como materiales de soporte, debido a que la cromatografa de gases tambin se fundamenta en este tipo de difusin molecular.
La eficiencia de la columna en cromatografa de gases, como se
indica en la imagen, la eficiencia de una columna de cromatografa de gases aumenta rpidamente cuando disminuye el dimetro de partcula del relleno. Sin embargo la diferencia de presin que se requiere para mantener un determinado caudal de gas portador, varia inversamente con el cuadrado del dimetro de la partcula; este hecho ha condicionado el limite inferior del tamao de las partculas que se utilizan en cromatografa de gases, dado que no es conveniente trabajar con diferencias de presin superiores a los 50 psi. Como resultado, las partculas del soporte son por lo general de 60 a 80 mesh (260 a 170m) o de 80 a 100 mesh (170 a 149m).
Efecto del tamao de la partcula en la altura de plato.
Los nmeros de la derecha son los dimetros de partcula.
Uno de los problemas que ha afectado a la cromatografa
de gases desde sus comienzos, ha sido la adsorcin de los analitos polares o polarizables tales como alcoholes o hidrocarburos aromticos sobre las superficies de silicato de los materiales soporte de las columnas o las paredes del capilar. La adsorcin da como resultado picos distorsionados, los cuales se ensanchan y a menudo presentan una cola. Se ha demostrado que la absorcin se produce como consecuencia de los grupos silicatos debido a la humedad. As, una superficie de silicato totalmente hidrolizada tiene la estructura
Los grupos SiOH presentes en la superficie del soporte
tienen una gran afinidad por las molculas orgnicas polares y tienden a retenerlas por adsorcin. Los materiales soporte pueden desactivarse por sililacin con dimetilclorosilano (DMCS). La reaccin es:
Mediante una lavado con metanol, el segundo cloruro se
sustituye por un grupo metoxilo, esto es:
Las superficies sililadas de las columnas rellenas todava
pueden mostrar una adsorcin residual, que al parecer se produce debido a las impurezas de xidos metlicos presentes en la tierra de diatomeas. Un lavado acido previo a la sililacin elimina estas impurezas. La slice fundida que se utiliza para la fabricacin de columnas abiertas esta en gran parte libre de este tipo de impurezas; en consecuencia, con las columnas de slice fundida se tiene menos problemas de adsorcin.