Medios de cultivo

Son preparaciones a partir de compuestos

naturales modificados, diseadas para cultivar
microorganismos en el laboratorio.

Componentes bsicos:
Agua
Fuente de C (H de C glucosa, sacarosa, lactosa,
almidn, etc.)
Fuente de N (protenas, peptonas, aminocidos)
Fuente de S, P, Ca, Na, Fe, (sales)
Vitaminas y otros factores de crecimiento (extracto de
Pu
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levadura, extractode
carne,
etc.)
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TIPOS DE MEDIOS DE CULTIVO SEGN

SUS COMPONENTES
Naturales: aquellos que existen como tal en la naturaleza ( leche,
suero, sangre, agua, etc.).
Son siempre complejos.
Artificiales: se preparan a partir de diversos componentes; pueden
ser:
Sintticos o qumicamente definidos: Se preparan con
sustancias puras y en cantidades conocidas.
Complejos o qumicamente indefinidos: Se preparan
con ingredientes cuya composicin se conoce slo de
forma aproximada, por ser sustancias complejas (suero,
sangre, extracto de levadura, extracto de carne,
peptonas, etc.)

TIPOS DE MEDIOS DE CULTIVO SEGN SU FINALIDAD

Comunes o generales: aquellos que se utilizan para el cultivo de un

amplio rango de bacterias (u hongos) Pueden ser slidos o lquidos, para
aislamiento no selectivo o mantenimiento, etc.

Especiales:
Enriquecidos: Son medios comunes adicionados de sangre, suero,
yema de huevo, etc. para el
cultivo de m.o.
nutricionalmente exigentes.
Selectivos
Para enriquecimiento: medios lquidos que permiten el crecimiento
de varios m.o. de una muestra, pero favorecen a alguno que est
en muy baja proporcin
Para aislamiento: medios slidos que contienen algn
componente que favorece el desarrollo de un grupo, inhibiendo a
otro.
Diferenciales: contienen algn componente que permite distinguir
entre 2 o ms tipos de m.o. por carcter{isticas diferenciales de
crecimiento (ej. Color de la colonia)

CRECIMIENTO MICROBIANO
Aumento del tamao (y
biomasa)
celular
Aumento
del n
de clulas y/o aumento de biomasa

de una poblacin celular

Es imposible medirlo en una sola clula
Es limitado, no nos da ninguna
Las bacterias se dividen por fsin binaria, y el
crecimiento de la poblacin es exponencial

Divisin por fsin binaria en bacterias

CURVA DE CRECIMIENTO
CURVA DE CRECIMIENTO

FASES DE CRECIMIENTO:
Latencia : La fase de latencia dura aproximadamente 4 hrs. No hay crecimiento
visible y de hecho puede haber una reduccin en el nmero de bacterias. Es un
perodo de adaptacin, en que las bacterias tienen una gran actividad metablica,
pero no se dividen.
Logartmica : Despus de 6 hrs, aproximadamente, de haber sembrado las
bacterias en un
medio ptimo, las bacterias comienzan a dividirse en forma constante y
mxima. El nmero de bacterias aumenta en progresin geomtrica y la
resultante es una lnea recta ascendente. Este perodo termina ms o menos a las
12 hrs, debido a la disminucin de los nutrientes disponibles.
Estacionaria : Debido a la acumulacin de desechos metablicos y disminucin de
los
nutrientes, la actividad metablica decae. Las bacterias se dividen con menor
frecuencia y el nmero total de bacterias vivas permanece constante, puesto que
el nmero de muertes se equilibra con el de multiplicacin. En la mayora de las
bacterias esta fase se produce entre las 18 a 24 hrs.
Regresin : En esta fase, conocida tambin como fase de muerte, las bacterias
dejan de
multiplicarse y mueren con el tiempo, debido al trmino de nutrientes,
acumulacin de material de desecho y disminucin del espacio fsico. No todas las
bacterias del cultivo se encuentran en esta fase al mismo tiempo, por lo tanto se
representa como una pendiente, que no llega a 0.

Tiempo de Generacin : g
Es el tiempo requerido para que una clula se
divida o una poblacin se duplique

g = t/n
n = Numero de generaciones
trascurridas
t = Tiempo
x = Nmero de clulas inciales
x = Numero de clulas a tiempo t
x=2nx
lg x = n log 2 + log x
n=
3,3 log x/x
0

E. coli a 37 C en condiciones ptimas

se duplica cada 20 min.
Al inicio -------------------- 10.000 clulas
A los 20 min. ------------ 20.000 clulas
A los 40 min. ------------

40.000 clulas

A 18 hs. -------------------- ????

Organismo

Temp.
(C)

Tiempo de
duplicacin (hs)

BACTERIAS

Escherichia coli

37

0,28

Bacillus subtilis

40

0,43

Pseudomonas putida

30

0,75

Mycobacterium tuberculosis

37

Treponema pallidum

37

34

25

LEVADURAS

Saccahromyces cerevisiae

Tipos de Cultivos:

Estacionario (Batch)

Semicontinuo

Continuo

Determinacin de Crecimiento
Microbiano
Mtodos Directos
- Recuento del nmero de clula en cmara de
Nebauer
- Peso seco celular
- Determinacin de Nitrgeno o Protenas totales
- Determinacin del DNA

Mtodos Indirectos
- Recuento de Colonas en Placas
-

Recuento sobre fltro de membranas

Consumo de Oxigeno
Liberacin de CO2
Medida de Turbidez
Tubos Convinatorios