Anda di halaman 1dari 32

Hitung Jumlah Lekosit

OLEH:
TIM PRAKTIKUM HEMATOLOGI JURUSAN ANALIS
KESEHATAN POLTEKKES DEPKES BANDUNG

Sel Darah Putih


Jumlah lekosit di dalam darah bervariasi sama

halnya seperti hemoglobin, hanya jumlah sel leukosit


ini tidak tergantung pada jenis kelamin tetapi
tergantung pada usia seseorang.
Darah dalam sirkulasi mengandung sekitar 4.000
11.000 sel darah putih per mikroliter atau per
milimeter kubik darah (/mm3).

Hitung Jumlah Lekosit


Hitung jumlah sel lekosit ini sangat berguna dalam

membantu diagnosa dokter yaitu adanya infeksi dan


perkembangan penyakit. Jumlah sel lekosit
meningkat pada keadaan:
- infeksi oleh bakteri
- lekemia

- appendicitis
- uremia

- kehamilan

Hitung Jumlah Lekosit


Jumlah sel lekosit ini menurun di bawah normal

yaitu pada penyakit yang disebabkan oleh:


- virus seperti measles
- brucellosis
- thypoid fever
- infeksi hepatitis
- rhemathoid arthritis
- cirrosis hati
- lupus eryhematosus.

Hitung Jumlah Lekosit


Jumlah sel lekosit seseorang sedikit meningkat jika

di periksa pada sore hari dibandingkan dengan pagi


hari, juga pada strenous exercise, emotional stress
dan anxiety

Hitung Jumlah Lekosit


Prinsip

:
Dengan penambahan larutan Turk maka darah
akan menjadi encer dan sel lain selain lekosit akan
lisis.
Alat-alat :
- Haemocytometer lengkap (Bilik Hitung, Dek
glass, pipet Thoma untuk lekosit, pipet
Thoma untuk eritrosit )
- Satu set alat untuk pengambilan darah
- Mikroskop

Hitung Jumlah Lekosit


Bahan

- Darah
- Alkohol 70%
- Kapas
- Larutan Turk :

- Asam Asetat Glacial


0,5 mL
Fungsi: untuk melisiskan sel selain lekosit
- Methyl violet 1% 1 mL
Fungsi: memberi warna pada lekosit
- Aquadest 100 mL
Fungsi: sebagai pengencer

Hitung Jumlah Lekosit


Prosedur

:
1. Pengenceran dengan pipet thoma lekosit
- Siapkan bilik hitung dengan deck glass
- Bersihkan jari pasien dengan alkohol 70%.
- Tunggu sampai kering, kemudian tusuk
dengan Vaccinostyle
- Darah yang keluar isap dengan pipet Thoma
lekosit sampai angka 1 (pengenceran 10
kali) atau sampai tanda 0,5 (pengenceran 20
kali).
.

Hitung Jumlah Lekosit


Isap larutan Turk sampai angka 11
Kocok perlahan selama 3 menit.
Buang tiga tetes pertama lalu masukkan ke dalam

bilik hitung.
Tunggu beberapa saat (3 menit).
Hitung dalam 4 kotak besar (64 kotak sedang
berukuran mm x mm).

Hitung Jumlah Lekosit


2. Pengenceran dalam tabung menggunakan mikropipet
- Siapkan bilik hitung dengan deck glass
- Larutan Turk sebanyak 400 uL dipipet
menggunakan mikropipet, kemudian dimasukkan ke
dalam tabung reaksi.
- Dari larutan tersebut diambil sebanyak 20 uL
kemudian dibuang.
- Selanjutnya darah (vena/ kapiler) dipipet sebanyak 20
uL menggunakan mikropipet. (Pengenceran 20 kali).

Hitung Jumlah Lekosit


Perhitungan

=
P(pengenceran) x V(volume) x N (jumlah sel).
1. P = Pengenceran
= 10 kali atau 20 kali
2. Koreksi Volume = volume = p x l x t x jumlah kotak
= mm x mm x 1/10 mm x 64 kotak
= 64 / 160 = 1/2,5 mm3 = 2,5/mm3
3. N = Jumlah sel dalam 64 kotak.

Nilai Normal

: 4.000 10.000 sel / mm3

Hitung Jumlah Lekosit


Contoh perhitungan:
Darah EDTA dipipet dengan pipet Thoma untuk

lekosit sampai tanda 0,5, kemudian diisap larutan


Turk sampai tanda 11 (pengenceran 20 kali).
Koreksi volume: 64 kotak
= 64 kotak x mm x mm x 1/10 mm
= 64 / 160 = 1/2,5 mm3
Jumlah sel dihitung dalam 1 mm3 darah, sehingga
koreksi volume menjadi: 1 dibagi 1/2,5
= 2,5/mm3

Hitung Jumlah Lekosit


Jumlah lekosit yang ditemukan pada 64 kotak dalam

bilik hitung: 80 sel.


Jadi jumlah lekosit/ mm3 adalah:
P x KV x N = 20 x 2,5 x N
= 50 x N
= 50 x 80
= 4.000 sel lekosit/ mm3
Normal :
4.000 10.000 sel / mm3

Hitung Jumlah Lekosit


Hal-hal yang harus diperhatikan untuk melakukan hitung

jumlah sel darah:


1. Memastikan sampel darah homogen
2. Memastikan pengenceran darah sudah dilakukan dengan
tepat atau sesuai sehingga setiap sel bisa dihitung satu
persatu dengan jelas.
Contoh :
- Pengenceran darah untuk eritrosit: 100 kali sampai 200
kali
- Pengenceran darah untuk Trombosit: 100 kali
- Pengenceran darah untuk Lekosit atau eosinofil: 10 kali
sampai 20 kali

Hitung Jumlah Lekosit


3. Memilih larutan pengencer yang tepat/ sesuai
sehingga dapat memperjelas sel yang dihitung.
Contoh:
Untuk menghitung sel eritrosit: Larutan Hayem
Untuk menghitung sel lekosit : LarutanTurk
Untuk menghitung sel trombosit: LarutanAmonium
oksalat 1%
Untuk menghitung sel Eosinofil: LarutanVon
Dungern.

Hitung Jumlah Lekosit


4. Memilih bilik hitung serta penutup kaca (dek glas)

yang bersih dan kering untuk memastikan


penyebaran sel merata pada saat memasukkan ke
bilik hitung.
5. Mengisi bilik hitung dalam satu aliran yang
berkesinambungan untuk memastikan tidak ada
gelembung udara atau tumpah.

Hitung Jumlah Lekosit


6. Menghitung sel dengan cara yang sistematis untuk
meminimalkan kesalahan menghitung sel dengan cara
menentukan patokan menghitung sel.
Ada empat pilihan dalam menentukan patokan hitung
sel:
1. Kiri - atas
2. Kanan - atas
3. Kiri- bawah
4. Kanan- bawah
Yang paling umum dipilih adalah patokan KIRI - ATAS

Hitung Jumlah Lekosit


7. Menghitung jumlah sel dalam sampel yang asli

dalam per mm3 darah.


8. Meyakinkan perhitungan yang dilakukan
konsisten.
Misalnya: untuk hitung jumlah lekosit perbedaan
jumlah sel dalam setiap kotak ukuran besar 1 mm x 1
mm ( 16 kotak ukuran mm x mm) jumlahnya
tidak boleh lebih dari 10 sel lekosit.

Hitung Jumlah Lekosit


Sumber-sumber kesalahan:
1. Bilik hitung dan pipet kotor.
2. Pipet tidak akurat.
3. Sampel tidak homogen.
4. Teknik pengenceran salah.
5. Pengisian cairan ke dalam bilik hitung yang berlebih
atau kurang.
6. Menghitung sel terlalu cepat sehingga sel belum
terdistribusi sempurna.
7. Tidak konsisten dalam menggunakan patokan hitung
sel.

LEUKOCYTE

ERYTHROCYTE

1. THOMAS PIPET
2. COUNTING CHAMBER
3. DILUTING FLUID

..
TURK

- HAYEM
- FORMAL CITRATE

4. HEMOLANCET
COTTON + 70% ETHANOL

COUNTING CHAMBER =

IMPROVED ..NEUBAUER
BURKER , ETC.

COLOUR BAND
&
NEWTONS RING

CHAMBER DEPTH = 0.1 mm

IMPROVED NEUBAUER

LEUKOCYTES COUNT :
4 CORNER SQUARES ( L ) = 1 X 1 X 0.1 mm3
ERYTHROCYTES COUNT :
1 X
1 X 0.1
5 SQUARES ( E )
mm3
80 SQUARES :

5
1 X
20

1
20

5
X

1
10

mm3

LEUKOCYTE COUNT

..
TURK
SOLUTION

COUNT BY MICROSCOPE
CONDENSOR : DOWN WARD
OBJECTIVE : 10 X

CALCULATION :
IMPROVED NEUBAUER
COUNTING CHAMBER
LARGE CORNER SQUARES
1 mm3 = N. CELLS
4
1X1X
10
4 mm3 = N. CELLS
101 mm3 = N X
X 420
10200
=NX
CELLS
4

NORMAL :
Dewasa
Bayi baru lahir
1-6 bulan
4-7 tahun
8-12 tahun

: 4.000 - 10.000 mm3


: 10.000 - 12.000 mm3
: 4.000 - 15.000 mm3
: 4.000 - 11.000 mm3
: 4.000 - 10.000 mm3

concentration

6.000.000
5.000.000
4.000.000
3.000.000
2.000.000
1.000.000
0
Erythrocytes Leukocytes Thrombocytes
Concentration / l 5.000.000

6.000

250.000

CBC.

RBC, WBC, and PLT counts are each expressed as

concentrations - cells per unit volume.


International Committee for Standardization in Hematology
(ICSH) recommends that the unit of volume be the liter.
The preferred mode of expressing blood counts:

RBC: 5.00 x 1012/L or 5.00 x 106/uL


WBC: 7.00 x 109/L or 7.00 x 103/uL
PLT: 300 x 109/L or 300 x 103/L

Manual method
Cover slip
Hemocytometer

Thoma pipett

Methods in performing CBC


Manual method - utilizes a hemacytom
1.

2.

W - WBC
R - RBC
PPlatelets

3.

4. R

R
R

5.

Automated method

Electrical Impedance

Cells that pass through an aperture through which a current is flowing


causes changes in electrical resistance that are counted as voltage pulses.
The size of the pulse generated by the cell is proportional to its volume.

resistance

direct current
(approx. 100 V)
external electrode

vacuum

external
electrod
e

internal
electrode

internal electrode

vacuum

orifice
blood cells

orifice

sample
sample beaker

Automated method

Light Scattering

Cells are detected and counted as they pass through a focused beam of
light instead of through an electrical field.
Cells suspended in diluent pass through a conical chamber called a flow
cell, then the cells are irradiated with a beam of light from a light source
(i.e. laser beam) generating a scattered light.
Different cells have different light scattering intensities that could be
proportional to their cell size and intracellular density

Diluent

RBC

Isotonic solution

preserves the shape


of the cells

WBC

Recommended

lack of accuracy
and reliability

Done when there Recommended

is a low WBC count

1%ammonium oxalate

lyses red cells

Automated
Not done due

2% acetic acid

lyses the red cells


and platelets

PLT

Manual

Done when there

is a low PLT count

Recommended

Sekian dan terima kasih


Atas perhatiannya

Anda mungkin juga menyukai