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Diseo de Bio-reactores

Introduccin
Fermentacin e Ingeniera Metablica

Cultivo Continuo Perfectamente


Agitado

Cultivo Continuo
Los bio-reactores operan en forma continua
en algunas industrias son:
Produccin de levaduras para panaderas
Tratamiento de RILes
Conversiones con enzimas (cuando la enzima
es barata).
Produccin de catabolitos y metabolitos

Cultivo Continuo
Existen diferentes modos de operar fermentadores
continuo:
Quimostato (Perfectamente agitado, CSTR, RPA)
Si el biorreactor est bien mezclado, la corriente de
producto que sale del bio-reactor posee la misma
composicin que el lquido presente en el interior del
reactor.

Flujo Pistn
Hay un frente de reaccin que avanza a lo largo del
reactor.

Caractersticas del Quimostato

Se le llam Quimostato dado que la composicin qumica y


biolgica del medio se mantiene constante, para ello se debe
controlar:
El volumen del lquido en el reactor se mantiene constante,
ajustando los flujos de entrada y salida al mismo valor.
El pH del medio mediante la adicin de cido o base.
Generalmente se adiciona cido.
El suministro continuo de O2 ( o aire), en el caso de sistemas
aerbicos.
Un nivel de agitacin adecuado que garantice la homogeneidad
del sistema.

Caractersticas del Quimostato (cont..)

La temperatura, para que se produzca el


crecimiento ptimo de los m.o. deseados ( y la
produccin de producto deseado).
El nivel de espuma.
Un cultivo continuo puede durar das hasta
meses.
El primer experimento se llev a cabo en 1949
por Monod.

Los principales componentes de un


cultivo continuo son:
Reactor de volumen constante
Sistema de alimentacin de medio y salida de
producto.
Tanque estril de medio (entrada y salida)
Control de pH, T, OD (Oxgeno disuelto)
Sistema de aireacin y agitacin.

Alimentacin

Fig. 1 Tpico Fermentador

Salida

Ventajas del cultivo continuo


Se pueden producir grandes cantidades de producto.
Incremento de la productividad
Dependiendo del producto se pueden llegar a cientos de
metros cbicos, sobretodo si el proceso es anaerbico.
Hay una constante salida de productos que se pueden
recuperar desde el sistema.
Se puede minimizar lo que es represin catablica por
medio de crecimiento bajo condiciones de carbono
limitantes.

Desventajas del cultivo continuo

Hay peligro de contaminacin


Hay peligro de prdida de estabilidad de la cepa,
sobretodo en recombinantes.

Cuando se utiliza:
1. Catabolitos directos producidos desde la fuente de
carbono
Muchos productos industriales son de este tipo.
Productos terminales de oxidacin
Etanol*

cido Lctico*

cido Actico
Acido Ctrico
Metano cido
Glutmica
Acetona
Butanol

2. Enzimas y otros productos

Cuando se utiliza (cont..):


3.- Metabolitos secundarios
En cultivos batch hay productos tales como antibiticos y toxinas, que no
se encuentran relacionadas con el crecimiento, y que frecuentemente no se
producen hasta despus que el crecimiento ha cesado o ha sido restringido.
En cultivo continuo muchos metabolitos secundarios son producidos en
forma paralela con el crecimiento y con velocidades mayores o iguales a las
observadas en cultivo batch.
Cuando el crecimiento ha sido restringido las clulas son capaces de iniciar
las sntesis de produccin de este tipo de metabolitos. A su vez, el estudio
de estos metabolitos sirve para evaluar que sucede bajo condiciones de
medioambiente controlado.

Dimensionamiento del bio-reactor

El dimensionamiento de un biorreactor no slo


implica el volumen del bioreactor, sino que la potencia
que se le debe entregar a los agitadores y sopladores.
Para determinar el volumen del bioreactor es necesario
plantear los balances de masa:
1. Balance de masa total o global
2. Balance de Biomasa, x
3. Balance de sustrato, s
4. Balance de producto de inters, p

Balance de masa global


Masa de Entrada Masa de Salida = Acumulacin de Masa

Fe

Fs

so

donde e y s: Densidad de entrada y salida

xo

Supuestos

po

d ( s V )
Fe e Fs s
dt

Las densidades se mantienen constantes:

(1)

e = s

El sistema opera en estado estacionario, entonces


No hay acumulacin.
d s V
0
dt
Con esto

Fe = Fs = F

Fe y Fs: Flujos Volumtricos de


entrada y salida
so,xo y po: Concentracin de
sustrato, biomasa y producto a la
entrada.

(2)

s,x y p: Concentracin de
sustrato, biomasa y producto a la
salida y al
interior del
fermentador o bioreactor.

BBalance de Biomasa
CClulas entran Clulas salen + Crecimiento celular Muerte celular = Acumulacin (3)

F xo F x x V x V
Velocidad de Crecimiento de los m.o [hr-1]

dV
0
dt

Volumen constante, V = cte, entonces

Estado estacionario, no hay acumulacin.


Con esto

F xo F x x V x V

dt

dV
dx
x
V
dt
dt

: Velocidad de muerte de los m.o [hr-1]

Supuestos:
Alimentacin estril, xo =0
-

d ( x V )

dx
0
dt

d ( x V )
dt

dV
dx
V
x 0 V 0 0
dt
dt

F x x V x V 0
Supuestos adicionales

Tasa de muerte inferior a la de crecimiento,

F x x V 0
Reordenando

F x = x V

Luego
F= V
Dividiendo por V
F/V=

Se define:
Velocidad de Dilucin, Volmenes de reactor que pasan por hora [t -1]

D = F/V
Donde D es el inverso al tiempo de residencia, luego

F/V=D=
Entonces
D=
La velocidad de crecimiento se puede controlar segn el
flujo de alimentacin.

Balance de Nutriente limitante


Sustrato entran Sustrato salen - Sustrato consumido crecimiento Sustrato
utilizado mantencin Formacin de producto = Acumulacin

q p xs V
xs V
d (s V )
F so F s s
m xs V

Yx / s
Yp / s
dt
ms[g/g hr-1]: Coeficiente de mantencin
yx/s [gr clula/gr sustrato] : Conversin (yield) de clulas referidas a nutriente consumido.
Yyp/s [gr producto /gr sustrato] : Conversin de producto producido referidos a nutriente
consumido.
qp [gr producto/gr clula hr-1] : Velocidad especfica de formacin de producto.

q p Yp / x m p

q p xs V
xs V
d (s V )
F so F s s
m xs V

Yx / s
Yp / s
dt
Supuestos:
Requerimientos para mantencin es relativamente menor que los requerimientos en
crecimiento, m x << x/ Yx/s

La formacin de productos es bastante baja y se puede despreciar q P/Yp/s x << x/ Yx/s


Estado estacionario,

d ( s V )
dV
ds
s
V
0
dt
dt
dt

xs V
F so F ss
0
Yx / s

xs V
F so F ss
0
Yx / s

Dividiendo por V

F
F
xs
so s s
0
V
V
Yx / s

Reagrupando
xs
F
( so s s )
V
Yx / s

Reemplazando
D * ( so s s )

xs
Yx / s

Aplicando que D =

x Yx / s ( so s )

Modelo de crecimiento
Modelo de Monod

s
max

Ks s

Donde
Ks es la constate de saturacin.
max: Velocidad Mxima de crecimiento de los m.o [hr-1]
Anlogamente se puede plantear para sistemas continuos,

velocidad de Crecimiento, u [hr-1]

Cintico Tipo Monod

0.6

0.4

0.2

0
0

si D, entonces

10

15

20

25

30

35

40

Concentracin de Sustrato, S [g/l]

Dc * s
Ks s

Dc : Velocidad de dilucin crtica. Es la velocidad mxima a la cual se puede operar, siempre se debe
trabajar bajo este valor. DC = max
En cultivo continuo la concentracin de sustrato a la salida del fermentador es:

D Ks
s
DC D

!! Ecuacin muy importante


que siempre se olvida !!

Balance de Producto

Producto entran Producto salen + Producto producido =


Acumulacin
F po F p q p x V

d ( p V )
dt

Supuesto que no hay consumo de producto


.
qp [gr producto/gr clula hora] : Velocidad especfica de formacin de producto.

mp [hr-1]: : Velocidad especfica o Coeficiente de formacin de producto debido a la


mantencin.
Yp/x [gr producto /gr sustrato] : Rendimiento o Conversin de producto producido
referidos a biomasa.

Productividad
Tanto la productividad como el yield son parmetros clsicos para evaluar fermentaciones.

La productividad refleja la cantidad de biomasa que se produce por unidad de tiempo.

Productividad = D* x [ gr/lt hr]

El mximo de productividad se obtiene cuando

D = Dptimo

x Yx / s ( so s )

D Ks
DC D

Ejemplo 1
Se tiene un fermentador para producir biomasa. El volumen del reactor es de 0.5m 3. El sistema
est siendo operado de tal modo que el fermentador slo se produce el crecimiento de
biomasa.
La concentracin de sustrato en la alimentacin es de 10 kg/m 3.
Los parmetros cinticos y de recuperacin son:
Yx/s
= 0.5 kg/kg
Ks
= 1.0 kg/m3
max
= 0.12 hr-1
ms
= 0.025 kg/kg hr

Asumiendo que la sntesis de producto es despreciable. Determine:


1.
2.

Concentracin de biomasa a la salida del fermentador, si se sabe que la conversin de sustrato


en este fermentador es del 40%.
Es significativo el trmino de mantencin y por qu?

Determinacin de las condiciones de


mxima productividad

PRODUCTIVIDAD DE UN QUIMOSTATO
12

25
20

15

6
10

Sustrato

Biomasa/Productividad

10

2
0

0.5

Tasa de Dilucin
Biomasa

Productividad

Sustrato

X,S, Productividad (P) en funcin de D

P=D * x

PRODUCTIVIDAD DE UN QUIMOSTATO (cont..)

X,S, Productividad (P) en funcin de D

P= D* x
Las lneas rectas tienen que
tienen igual pendiente tienen
igual Productividad

X,S, Productividad en funcin del Tiempo


de Retencin, 1/D

P=x /

Punto A y Punto B
tienen igual
productividad

A B
Si el Volumen es constante

V
V

FA FB

FA > FB, pero xA < xB


En B se tiene mayor concentracin pero bajo flujo.
A es un punto Inestable dado que se encuentra muy cerca
de critico, pequeas variaciones en el tiempo pueden
producir variaciones en la concentracin

sc

Se tiene un punto ptimo en el


cual la productividad es
mxima, luego dicho punto
tiene la mxima pendiente
posible es tangencial al la
curva de Biomasa, x y se puede
calcular despejando D, desde la
ecuacin:

d (Productividad )
0
dD
d D x
0
dD

Resolviendo se tiene:

Si se define:

K S so
Ks

Las coordenadas del punto


C
sc

Concentraciones en las
condiciones ptimas:

optima

max ( 1)

Dptima

Ks
DC 1

Ks S o

xoptima

s o Yx / s

( 1)

s optima

so

( 1)

Ejemplo 2
Se tiene un microorganismo que sigue una
cintica del tipo Monod, donde la velocidad
de crecimiento se describe como:
Con los siguientes parmetros
max = 0,7 hr-1

Ks = 5 g/l

Y x/s = 0,65

El flujo de alimentacin es de 500 l/hr con 85 g/l de sustrato.


Si se utilizan un fermentador que opera en forma continua y perfectamente
agitada,
1. Qu tamao debe se este reactor si opera en forma ptima?
2.
Cul es la conversin de sustrato?
3. Cul es la concentracin de biomasa a la salida?