ANLISIS TOXICOLGICO

Aguayo Palafox Jos Emanuel

Definicin
Es el conjunto de tcnicas y procesos analticos encaminados a poner de
manifiesto la presencia de una sustancia considerada txica en una
muestra.
Conjunto de procesos analticos que tienen por objeto de el aislamiento,
identificacin y determinacin cuantitativa de los txicos, tanto en el
vivo como en el cadver, con el fin de permitir el diagnostico de
intoxicacin y el esclarecimiento de los hechos.

Importancia del anlisis

toxicolgico
En el rea clnica:

Diagnstico y pronstico de una intoxicacin.

Evolucin del tratamiento.

Informacin expedida

Antecedentes sumariales
Datos anatomopatolgicos resultantes de autopsia
Sintomatologa de la intoxicacin
Diagnostico clnico
Tratamiento insaturado
Hallazgos en el lugar en que se hallo a la victima
Declaraciones de familiares, compaeros o vecinos
Algn diagnostico provisional del toxico responsable

La peticin debe ser lo ms especifica posible.

FASES DE UN ANLISIS QUMICO

TOXICOLGICO GENERAL:
Son las siguientes:
Separacin o extraccin del txico de la muestra problema.
Fraccionamiento del extracto.
Purificacin de los extractos obtenidos.
Deteccin de la sustancia xenobitica.
Identificacin del txico.
Determinacin o valoracin cuantitativa.

Metodologa del toxiclogo

Test generales:

Sensibles
No necesariamente especficos
Detectan gran nmero de sustancias
Los resultados negativos son de gran valor ya que permiten
centrar la atencin en unos cuantos y descartar la presencia de
determinado grupo de sustancias.

Mtodos cuantitativos fiables:

Una vez que se sospecha la presencia de una sustancia por
los test anteriores, su presencia debe confirmarse y
cuantificarse por lo menos mediante 2 tcnicas analticas
independientes; se debe evitar interferencias y conocer la
precisin y exactitud del mtodo.

Tiempo de anlisis
Intervalo entre la llegada la muestra al laboratorio y
el momento en que se puede ofrecer el resultado
analtico.

Toxicologa Forense:
rara vez resultado
inmediato

Toxicologa Clnica: debe

realizarse en el menor
tiempo posible.

Proceso ADME
Contribuye a la toxicidad del compuesto, por lo tanto puede
tener consecuencias analticas importantes.
Importante la biotransformacin ya que la mayora de los
txicos sufren profundos cambios metablicos en el
organismo y en consecuencia parecen en orina o en diversos
fluidos biolgicos.
Por lo tanto el conocimiento de la metabolizacin de y de los
factores que la afectan es de gran inters para su deteccin
en los fluidos biolgicos y desarrollo de un mtodo especifico.

Finalidad analtica del metabolismo

Qu buscar?
Metabolito libre
o conjugado
Dnde buscar?
Orina, sangre,
bilis, etc.

Cmo buscar?
Condiciones optimas
para su extraccin.
Medio acido o bsico,
disolvente, tcnica de
extraccin.

Muestras
Deben recogerse teniendo en cuenta las condiciones particulares
de cada caso y las referentes a la distribucin y metabolismo.

Contenido gstrico

Aspirado gstrico, liquido del lavado gstrico (primeros

500ml) y el vomito.
En este tipo de muestras se encuentra al txico sin
metabolizar.

Sangre
Muestra especialmente para el anlisis cuantitativo.
Los txicos orgnicos bsicos se [ ]
Los txicos cidos y neutros [ ]
Gases y sustancias voltiles, siempre que se conserve en
recipientes cerrados hermticamente.

Sangre
Obtener la muestra de sangre que fluya libremente, sin
presionar ningn tejido.
No se recomienda en la autopsia de cavidades abiertas.
La sangre total y el plasma son las muestras
representativas.
El envi de la sangre total debe tener adicionado un
anticoagulante adecuado.
En las muestras de sangre post mortem estn a menudo
hemolizadas y putrefactas.

Orina

Es la muestra idnea para realizar una gran variedad de ensayos

preliminares en el anlisis de txicos.
El toxico en este fluido puede llegar a ser 100 veces mayor que en
la sangre, adems, de estar exenta de protenas, por lo que las
interferencias son mnimas.

Orina

Desventaja es que el toxico se elimina en su totalidad como

metabolitos, por lo que se requiere el anlisis de otro
fluido o tejido.
En drogas de abuso, puede obtenerse fcilmente y en
cantidad
suficiente,
y
generalmente
contiene
concentraciones detectables de txicos.

Orina

Si la muerte se produce rpidamente, como en el caso de la

inyeccin de un analgsico narctico o por inhalacin de acido
cianhdrico, la deteccin del toxico o sus metabolitos en orina
ser imposible.

Humor vtreo

Es de fcil accesibilidad
Volumen suficiente (casi 2 ml en c/ojo)
No contiene demasiadas protenas
Esta protegido de la circulacin general
Posee pocas enzimas
Es mas resistentes a la contaminacin bacteriana.
Utilizado en el anlisis de alcohol.

Hgado

Los niveles de toxico son en general superiores a los de la sangre.

nico tejido donde se encuentra la sustancia toxica en
concentracin adecuada para su identificacin y cuantificacin.

Hgado

til en cuerpos exhumados o en un avanzado estado de

descomposicin.
Extraer antes la vescula biliar para evitar la contaminacin.
Debe mantenerse a temperaturas bajas.

Cerebro

til cuando se trata de muerte por inhalacin de disolventes

(tolueno, cloroformo, etc.)debido a las altas concentraciones que
alcanzan en el tejido cerebral, y adems, son retenidas tras la
muerte.
Resistente a la putrefaccin

Rin

Es el tejido de eleccin en intoxicaciones por metales y otros

txicos que se acumulan especficamente en l.

Bilis

Utilizado para sustancias que se eliminan por va biliar.

til en la sobredosis de opiceos, ya que contiene altas
concentraciones de los glucurnidos de dichos compuestos.

Pelo

De gran utilidad para el anlisis de txicos minerales.

Deteccin de drogas de abuso, especialmente en consumidores
crnicos.
Puede demostrar el consumo de drogas varios meses despus de
iniciarlo.

Ser vivo
Sangre
Orina
Contenido estomacal

Cadver
Estomago y su contenido
Sangre
Orina
Cerebro
Hgado
Vescula biliar
Pulmn
Cabello, Uas y hueso

Envasado y conservacin

Las muestras liquidas deben recogerse en tubos o envases de vidrio o plstico,

con tapn o cierre de polietra-fluoroetileno (PTFE).

Las muestras solidas disponerse en recipientes de plstico provistos de boca

ancha.

Envasado y conservacin
Los recipientes deben de estar correctamente etiquetados.
En caso de alguna circunstancia especial (SIDA, hepatitis),
debe de indicarse en el etiquetado, el cual debe de tenerse
en cuenta para la manipulacin de la muestra.

Envasado y conservacin

Las muestras no deben de contener conservantes.

En caso de ser necesario, utilizar los conservantes ideales como
la azida sdica (0.1%) o el fluoruro sdico (1%); si se requiere
anticoagulante el mas recomendado es el oxalato potsico
(0.5%).

Almacenamiento
Durante el almacenamiento de las muestras de sangre o
hgado, son muchos los txicos que pueden descomponerse
a 4 C.
Entre ellos benzodiazepinas (clonazepam, nitrazepam,
triazolam), cocaina, isoniacida, lisergida, metadona,
metilfenidato, morfina, paracetamol, procaina.

Factores que afectan descomposicin qumica

LUZ
Sustancias toxicas fotolbiles como los alcaloides del cornezuelo
del centeno y las Fenotiazinas.

Factores que afectan descomposicin qumica

LUZ
Las muestras de orina y las soluciones acuosas de txicos
fotolbiles son muy sensibles a la luz, siendo recomendable
recubrir con papel aluminio los envases e incluso los recipientes
utilizados durante el anlisis.

Factores que afectan descomposicin qumica

OXIDACION
Para compuestos fcilmente oxidables (catecolaminas,
tiobarbituricos), los envases deben de estar llenos y
perfectamente cerrados para excluir el oxigeno atmosfrico.

Factores que afectan descomposicin qumica

Se puede adicionar antioxidantes como acido ascrbico o

metabisulfito sdico (1%) para eliminar el oxigeno de la
solucin.
Los compuestos fenlicos (paracetamol, morfina) se oxidan
fcilmente a 4 C y aquellos que contienen azufre tambin
son oxidados in vitro en medio alcalino.

Factores que afectan descomposicin

qumica

El tiopental puede oxidarse rpidamente a temperatura

ambiente, tanto en soluciones acuosas como en orgnicas.
La presencia de iones metlicos en los procesos oxidativos
actan como catalizadores.
Efecto que puede disminuirse adicionando una protena,
como la seroalbmina bovina.

Factores que afectan descomposicin qumica

HIDRLISIS
En los txicos como steres (anestsicos locales, diacetilmorfina o herona)
durante su almacenamiento a temperatura ambiente e incluso a bajas
temperaturas pueden ser fcilmente hidrolizados por las esterasas presentes
en la sangre y tejidos.

Factores que afectan descomposicin qumica

El pH alcalino durante la extraccin puede promover la
hidrlisis de algunos compuestos.
La actividad esterica se puede contrarrestar con la
adicin de fluoruro sdico (1%).
La hidrlisis de los esteres se pueden reducir llevando el
pH de la muestra por debajo de 4.

Factores que afectan descomposicin qumica

TEMPERATURA
En general se recomienda almacenar las muestras a 4 C,
siempre que vayan a ser analizadas en pocos das.
Si se van almacenar por mas tiempo, deben congelarse a
-20 C, pero teniendo la precaucin de descongelarlas una
sola vez antes de ser analizadas.

Factores que afectan

descomposicin qumica
Durante la congelacin-descongelacin puede producirse la
reduccin de ciertos metabolitos (sulfxidos, N-xidos
formados durante el metabolismo de las fenotiacinas), por
lo tanto hay grandes diferencias de concentracin del
toxico.
La liofilizacin es recomendable si las muestras van a
guardarse mucho tiempo.

Descomposicin biolgica
La putrefaccin causada por microorganismos puede
ejercer efectos muy importantes en la conservacin de
muestras.

Contaminacin

Interferencias causadas por la putrefaccin

Contaminacin procedentes de los envases
Puede ser procedente de las impurezas en los disolventes
utilizados en la extraccin.

Cadena de custodia

La cadena de Custodia es el mecanismo que garantiza la autenticidad de los

elementos probatorios recolectados y examinados. Esto significa que las
pruebas correspondan al caso investigado sin que se d lugar a confusin,
adulteracin, ni sustraccin alguna.

La Cadena de Custodia debe velar por la seguridad, integridad y

preservacin de dichos elementos.
Est conformada por los funcionarios y personas bajo cuya responsabilidad
se encuentren los elementos de prueba respectivos durante las diferentes
etapas del proceso penal

 Todo funcionario que reciba, traslade, genere, o analice muestras

o elementos de prueba y documentos, forma parte de la Cadena
de Custodia

 Deben aplicarse a todo elemento probatorio, sea ste un cadver,

un documento o cualquier otra evidencia fsica.

 Toda evidencia fsica, (muestra o elemento probatorio) debe tener el

Registro de Cadena de Custodia.
Por consiguiente, toda transferencia de custodia debe quedar
consignada en las hojas del registro de Cadena de Custodia,
indicando: fecha, hora, nombre y firma de quin recibe y de quin
entrega.
Toda muestra (evidencia fsica) debe recibirse sellada y rotulada, en
caso de existir no conformidad con este requerimiento, quin la recibe,
debe dejar constancia escrita, en el oficio petitorio, e informar dicha
anomala, inmediatamente al solicitante

ANLISIS GENERAL

Examen fsico de las muestras

Orina
Color

Posible Causa

Incoloro

Ingesta hdrica elevada

Marrn Negro

Nitrobenceno, fenoles

Amarillo Anaranjado

Fluorescena, fenolftalena,
Nitrofurantona

Rojo vino

Fenotiazinas, fenitona, fenolftalena,

quinina, warfarina, anilinas.

Azul o Verde

Indometacina, fenol, amitriptilina

Negro

Metronidazol o levodopa

Contenido estomacal y residuos de la escena.

Olor

Causa posible

Almendras amargas

Cianuro

Licores de frutas

Etanol, esteres

Ajo

Arsnico, fsforo

Naftalina

Alcanfor

Peras

Cloral

Petrleo

Destilados de gasolina (o
vehculo en formulaciones de
plaguicidas)

Fenoles

Desinfectantes, fenoles

Tabaco rancio

Nicotina

Lustre de Zapatos

Nitrobenceno

Dulce

Hidrocarburos, halogenados,
cloroformo

Mtodos de Screening
Algunas drogas y txicos si se encuentran en
concentraciones elevadas y en ausencia de compuestos que
interfieren dan colores con reactivos apropiados.
Otros compuestos al presentar grupos funcionales
similares pueden reaccionar y dar interferencia con los
txicos y/o metabolitos

 La descripcin del color suele ser muy subjetiva.

Se realizan satisfactoriamente en tubos de vidrio limpios,
capsulas de porcelana o placas de toque y tiras reactivas.

Deteccin cualitativa de cido saliclico

Extraccin sangunea o de orina, el acido saliclico da una

coloracin azul-violeta con el ion frrico.
El reactivo de Trinder [HgCl2 y Fe(NO3 ) 3] produce un color
purpura, aconsejable para su determinacin cuantitativa

Test de Phenistix
Es una tira reactiva impregnada del reactivo de
Phenistix se basa en la reaccin del FeCl3. Matriz
biolgica Orina.

Sustancia

Color

Acido fenilpirvico

Gris-verde

Salicilatos

Purpura intenso

Fenotiazinas

Purpura intenso

P-Aminosalicilato (PAS)

Purpura tirando a castao

cido p-hidroxifenilpirvico

Verde, decolora en segundos

 La bilirrubina en concentraciones altas puede dar color verde.

Las orinas amoniacales aejas dan en ocasiones resultados falsos
negativos.

Prueba colorimtrica para cocana

Muestra: Orina, contenido estomacal, restos de la escena
Reactivo: p-Dimetilaminobenzaldehdo, Tiocianato de Cobalto.
Procedimiento: agregar 0,5 mL de reactivo a la muestra, calentar en
B.M. durante 3 y observar
Resultados:
p-Dimetilaminobenzaldehdo: rojo
Tiocianato de cobalto: azul

Prueba de Zwikker

Reactivo: Solucin A (2g de acetato de cobalto en 100mL de

metanol). Solucin B (Preparar una solucin de isopropilamina
al 5% en metanol).
Procedimiento: Mezclar un microtubo de vidrio de 0.5mL de
Zwikker A y 0.5mL de Zwikker B junto con la muestra a
analizar.

Detecta molculas con grupos lactamas como

barbitricos y algunas benzodizepinas.
Sustancias

Resultado

Fenobarbital, Barbital

Violeta intenso

Nitrazepam

Anaranjado

Bromazepam

Rojo anaranjado

Oxazepam

Rosa violceo vino

Reaccin Dille-Koppanyi

Prueba para indicar la presencia de barbitricos.

Reactivo:
Reactivo A: 0.1g de acetato de cobalto tetrahidratado en 100mL de metanol absoluto
+ 2mL de cido actico glacial.
Reactivo B: 5.0mL de isopropilamina con 25mL de metanol absoluto.
Procedimiento: colocar 3 gotas de la fraccin correspondiente previamente
solubilizada en metanol + 3 gotas del reactivo A y 3 gotas del reactivo B ( DilleKoppanyi).

Resultado: una coloracin prpura- rojiza indica una prueba positiva.

Reaccin de Bratton Marshall

Mtodo colorimtrico utilizado para la cuantificacin de sulfonamidas
mediante el acoplamiento de diazonio con N- (1-naftil) etilendiamina
para formar una solucin colorida.
Nitrito de sodio 0,1% + sulfamato de amonio 0,5% + clorhidrato de
naftiletilendiamina 0,1% (mL)
Reaccin positiva: aparicin coloracin rosa violeta.

Pruebas para alcaloides

Reactivo de Mayer (tetraiodo mercuriato de potasio) da lugar a la
formacin de un precipitado amarillento amorfo o cristalino
Reactivo de Draggendorf (yodo bismutato de potasio) forma
precipitados de color rojo anaranjado y en general amorfos.
Reactivo de Bouchardt (triioduro) genera precipitados de color rojo
pardo
Evaporacin de 2 - 3 gotas del extracto etanlico en vidrio de reloj. Se
agrega luego 2 - 3 gotas de HCl 5% hasta solubilizar los residuos. A
esta solucin se agrega una gota del reactivo correspondiente.

Prueba para las Xantinas

Se caracterizan a travs de la reaccin de murexida
Se evapora hasta la sequedad total una solucin de acido ntrico con la
muestra, el residuo se trata con amoniaco.
Resultado: Coloracin rojo purpura, por la formacin de una sal de
amonio del cido purprico, la murexida.

ANLISIS
QUMICO TOXICOLGICO

Fases

Separacin o extraccin del txico de la muestra.

Deteccin e identificacin del txico.
Cuantificacin del txico.

Mtodos de extraccin

Dependiendo de sus propiedades fisicoqumicas:

Txicos gaseosos
Txicos voltiles
Txicos inorgnicos
Txicos orgnicos

Eleccin de un mtodo de extraccin

Tener en cuenta los siguientes factores:
1. Determinacin analtica que se precisa: puede que interese
discriminar entre dosis letales, toxicas o teraputicas; detectar solo el
toxico sin transformar o tambin sus metabolitos.
2. Tipo de muestra: en cuanto cantidad y calidad.
3. Posibilidades del laboratorio: de instrumental y de personal.
4. Naturaleza del txico: conocido o desconocido; uno solo o una mezcla
compleja; un producto bien conocido en cuanto a su analtica, o un
producto nuevo que necesite poner a punto un mtodo adecuado para su
extraccin.

Cantidad de la muestra

Como norma general estar en funcion de las concentraciones esperadas del txico:

1. Txicos cuya concentracin txica esperada sea aprox., de 1 mg/ml:

50 ml de orina o sangre, o 50 g de tejido.

analizar

2. Txicos cuya dosis txica esperada sea aprox., de 10 mg/ml: analizar 5 ml

orina o sangre, o 5 g de tejido.

de

3. Txicos cuya dosis txica esperada sea mayor de 10 mg/ml: analizar 1 ml

orina o sangre, o 1 g de tejido.

de

Extraccin de txicos gaseosos

Este anlisis recae sobre la sangre que debe contener el gas y de la cual
hay que extraerlo.
Se realiza recurriendo a las leyes fsicas, segn las cuales la solubilidad
disminuye y aun se anula, elevando la temperatura o disminuyendo la
presin.
Se utilizan dispositivos especiales para este tipo de operaciones, como
la trompa de mercurio.

Extraccin de txicos voltiles

Se incluyen los txicos que se volatilizan por debajo de los 100 C, por lo cual
son arrastrados por el vapor de agua cuando esta destilada.

1. Destilacin
a) Destilacin acida: txicos minerales
( Cl, Br, I, H2S, sulfuro de carbono, P) y
txicos orgnicos (HCN, alcoholes, aldehidos, cetonas, cidos orgnicos,
hidrocarburos aromticos).
b) Destilacin bsica: anfetaminas, anilinas, alcaloides lquidos voltiles, algunos
gases solubles en agua.

2. Microdifusin
El dispositivo mas utilizado es la clula de Conway, que consiste en 2 placas de
Petri concntricas, con una base comn.

Extraccin de txicos voltiles

La muestra se sita en el compartimento exterior y el absorbente o disolvente, segn

los casos en el interior. Despus se cierra hermticamente con una tapadera de vidrio,
sobre cuyo borde esmerilado se aplica una fina pelcula de silicona o grasa similar,
para asegurar su perfecto cierre.

Extraccin de txicos voltiles

3. Tcnica de espacio de cabeza.

La muestra se deposita en un vial cerrado con tapn perforable, en el que se deja en
una cmara de aire. Se calienta a 60 C durante 30 min y se extrae con una jeringa
para gases una muestra de la parte superior del frasco para inyectarla en un
cromatgrafo de gases.

Extraccin de txicos minerales o inorgnicos

Los txicos se encuentran en el organismo firmemente unidos a
albumina, lpidos o glcidos.
La destruccin de la materia orgnica y la consiguiente liberacin del
toxico se consiguen mediante el proceso de mineralizacin el cual
existe en 2 modalidades.

Extraccin de txicos minerales o inorgnicos

1.
2.

Va seca: calcinacin

Va hmeda: tratamiento con oxidantes enrgicos (mezcla sulfo-nitroperclrica).

* Digestin por va hmeda en sistema cerrado bajo presin que utiliza la
energa de las microondas.

Extraccin de txicos minerales o inorgnicos

Algunos metales como (As, Pb, Cu) se extraen formando
un complejo el cual posteriormente se separan con un
disolvente orgnico.
Aniones txicos, como permanganato, bromuro, yoduro,
clorato, fosfato entre otros pueden analizarse directamente
en filtrados de contenido gstrico o las distintas muestras
mediante dilisis.

Extraccin de txicos orgnicos

Sustancias toxicas que pueden separarse mediante
extraccin con disolventes apropiados, en funcion de sus
coeficientes de reparto entre dos lquidos no miscibles.
1. Txicos de origen vegetal: glucsidos, aceites esenciales y
alcaloides.
2.

Medicamentos.

Extraccin de txicos orgnicos

Como norma general se extraen con disolventes orgnicos
1.

Con disolvente polar (etanol): utilizado en clsica tcnica de StasOtto.

2.

Con disolvente apolar que puede ser:

a) Extraccin directa: solo es aplicable a muestras biolgicas limpias, como la
orina, y tambin en el caso de vsceras para la extraccin de txicos orgnicos
de tipo cido.

Extraccin de txicos orgnicos

b) Extraccin con disolventes orgnicos, previa purificacin de la muestra:

Las muestras a analizar contienen gran numero de sustancias (protenas,

lpidos).

Se hace por tratamiento con distintos agentes precipitantes de las protenas

como:

Sulfato amnico (bsicos)

Acido tngstico (cidos y neutros)
Acido tricloroactico
Acido clorhdrico diluido (digestin acida)
Digestin enzimtica.

Extraccin de txicos orgnicos

Llevado a cabo la purificacin, se procede a realizar la extraccin con

disolventes orgnicos como el ter etlico, cloroformo y diclorometano.

Fraccionamiento del extracto

1.
2.

3.

cidos: dbiles (barbitricos) o fuertes (salicilatos), unos y otros extrables

con disolventes orgnicos en medio acido.
Bsicos: extrables con disolventes
orgnicos en medio bsico (alcaloides,
antidepresivos tricclicos).
Neutros: extrables con disolventes orgnicos indistintamente en medio
acido o bsico (carbamatos).

. Obtenidas cada una de las fracciones se someten al anlisis correspondiente.

Extraccin de txicos orgnicos

En muestras complejas (vsceras) primero se realizara la precipitacin
de protenas y enseguida el fraccionamiento del extracto.
Los txicos que se encuentren conjugados con acido glucurnico u
otros componentes, puede ser necesario que despus de la extraccin,
las muestras deban someterse a hidrlisis.
La hidrlisis puede ser qumica (tratamiento con acido clorhdrico en
caliente), o enzimtica (-glucuronidasa), aumentando as la
recuperacin de txicos como la morfina, Cannabis, fenotiazinas, etc.

Tcnicas
Instrumentales

Espectrofluoromtricas
Presenta 2 ventajas especificidad y sensibilidad.
Se puede determinar fenotiacinas, benzodiacepinas,
salicilatos,
imipramina
y
derivados,
opiceos,
alucingenos, etc.

Espectrofotometra infrarroja
Ventaja: Se puede obtener en menos de 2 min y la muestra no es alterada ni
destruida.
Desventaja: la muestra requiere gran pureza y se necesita cantidad de
muestra algo elevada; no por la falta de sensibilidad, sino por la dificultad en
la manipulacin de dicha muestra.

Espectrofotometra de absorcin atmica

Mtodo analtico para determinar a concentracin de
elementos metlicos en una matriz determinada.
Ventajas: sensibilidad y el requerimiento de una mnima
cantidad de muestra.

Espectrofotometra de absorcin atmica

La absorcin especifica a una longitud de onda, mediante
la utilizacin de una determinada lmpara, para la
identificacin de un elemento desconocido y la intensidad
de la absorcin para la determinacin cuantitativa.

Espectrofotometra de masas
La informacin mas valiosa que constituye el espectro de masas es la
determinacin del peso molecular.
La espectrofotometra de masas, sola o en combinacin con la
cromatografa de gases (o la cromatografa liquida de alta resolucin),
es con toda probabilidad el mtodo mas efectivo para la identificacin
de txicos y sus metabolitos.
La especificidad y sensibilidad de esta tcnica permiten obtener un
espectro completo, y en muchos casos, una identificacin precisa, con
menos de 50 ng de material.

TCNICAS
CROMATOGRFICAS

Cromatografa en columna

Su utilizacin en el anlisis toxicolgico se reduce a la extraccin y

purificacin de los extractos.

Cromatografa en papel

Tcnica de separacin de una mezcla de solutos, basada en la diferente

velocidad con que se mueve cada uno de los componentes a traves de un medio
poroso, arrastrados por un disolvente en movimiento.

No es muy aplicable.

Cromatografa en capa fina

Gran capacidad para separar sustancias procedentes de
artefactos biolgicos que son extrados conjuntamente por los
procedimientos de extraccin.
Permite la determinacin
simultanea de varias muestras.

 Barato, sencillo y requiere infraestructura mnima.

Se aplica como pre-tratamiento de la muestra; extraccin
del analito.
Interpretacin difcil en presencia de varios txicos o
metabolitos
Sin embargo es la base para el aislamiento e identificacin
de mltiples sustancias luego de su extraccin

Cromatografa de gases

La gran cantidad de fases estacionarias disponibles y la posibilidad de trabajar

a distintas temperaturas permiten su aplicacin a la casi totalidad de las
sustancias con que se puede encontrar el toxiclogo.

Su limitacin principal es exclusiva para las sustancias volatilizables.

CG- Masas
Eficacia de separacin elevada
Buena sensibilidad, especificidad y selectividad
Necesita baja cantidad de muestra
Solo es aplicable para compuestos voltiles a altas temperaturas, no inicos,
baja polaridad y bajo peso molecular.

Cromatografa de alta resolucin

Ventajas mayor precisin, mejor resolucin y menor tiempo de anlisis.

No destruye la muestra, lo que permite la deteccin por distintos sistemas.
Requiere mnima preparacin de la muestra y utiliza pequeas cantidades de
stas.

Bibliografa

Manual de procedimientos analticos toxicolgicos para laboratorios de baja

complejidad., Gabriela Fiorenza, Biancucci, Diana Gonzlez, Adriana Prez, Adriana
Ridolfi y Anala Strobl., Argentina, 2007.
Gisbert Calabuig medicina legal y toxicologa., Enrique Villanueva Caadas., 6
edicin, 2004., Ed. MASSON., Pgs. 778-811
Manual de toxicologa Bsica., E. Mencas Rodrguez y L. M. Mayero Franco.,
Espaa, 2000., Diaz de Santos