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ENZIMAS

Estgio em Docncia:
Janaina Duarte Baumer
Siannah Maria Mas Diego
Prof. Agenor Furigo Jr.
Setembro/2008

INTRODUO

Os sistemas vivos so formados por uma


enorme variedade de reaes bioqumicas,
e quase todas elas so mediadas por uma
srie de extraordinrios catalisadores
biolgicos
ENZIMAS

HISTRICO
A atividade cataltica de enzimas tem sido utilizada pelo
homem h milhares de anos

Fermentao do suco de uva para obteno do vinho;


Fabricao de queijo;
Fabricao de po.

No entanto, estas eram apenas aplicaes prticas, uma


vez que o conhecimento do modo de ao dos
catalisadores biolgicos s recentemente foi elucidado.

HISTRICO
1833 - A primeira hidrlise enzimtica do amido

Os franceses Payen e Persoz isolaram um complexo


enzimtico do malte que catalisava a transformao do
amido em glicose, denominando-o "diastase" (do grego
"separar").

O sufixo ase de diastase passou a ser usado.


1835 - o qumico sueco Berzelius descreveu a hidrlise
enzimtica do amido.

Demonstrou que o amido pode ser mais eficientemente


decomposto
usando-se
extrato
de
malte
preferencialmente ao c. sulfrico e cunhou o termo
catlise.

HISTRICO
1836 - Schwann descobre a enzima digestiva Pepsina
1860 - Debate: Qual o papel da levedura no processo de
fermentao? Pauster X Lienberg

Pasteur, defendia que a fermentao alcolica s ocorria


em presena de clulas vivas de levedura.

Lienberg defendia que os processos fermentativos eram


reaes qumicas.
1897 - A polmica foi resolvida. Os irmos Buchner
demonstraram que um extrato de levedura livre de clulas era
capaz de fermentar o acar.

O extrato continha catalisadores da fermentao alcolica.

HISTRICO
1878 - William Kuhne props que o nome enzima (na levedura)
1894 - Primeira produo comercial de alimentos com enzimas

O japons Dr. Jokichi Takamine comeou a produo


comercial de koji a partir do fungo Aspergillus oryzae.
1894 - Cientistas definem a teoria Fechadura e Chave
1913 - Michaelis e Lyn descreveu cintica enzimtica
matematicamente.
1914 - lanado o primeiro detergente compacto

HISTRICO
1926 - Cientistas descobrem que as enzimas so protenas
- James Summers isolou e cristalizou a primeira enzima,
a urase.
A partir 1960 - A evoluo no estudo das enzimas,
acompanhado por avanos tecnolgicos, possibilitou o
isolamento e a identificao de propriedades das enzimas.

Caracterizao e o estudo cintico de milhares de


enzimas de diferentes fontes: animais, vegetais e de
microrganismos.
1986 - A primeira enzima a
geneticamente modificado (OGM)

partir

de

organismo

PROPRIEDADES GERAIS
Enzimas

Protenas
RNA

PROPRIEDADES GERAIS
RNA

1989 - Canadense Sidney Altman e o norte-americano


Thomas Cech:
RNA
Prmio Nobel de Qumica
Atividade Cataltica
o Como seria possvel o incio da vida, uma vez que
as molculas de DNA s podem ser reproduzidas e
decifradas com a ajuda de protenas?

A vida comeou com uma molcula de RNA

PROPRIEDADES GERAIS
RNA
Esquema Geral da Sntese de Protenas

DNA (Ncleo)

RNA traduzido em uma


sequncia de
polipeptdeos (protenas)

Transcrito em RNA

Enviado p/ o citoplasma

PROTENAS
A vida est intimamente ligada s protenas. Estas
molculas realizam as mais variadas funes no nosso
organismo:
Reserva alimentar: albumina
Transporte: hemoglobina (transporte O2)
Contrcteis: miosina
Protetoras: anticorpos
Toxinas: venenos de cobras ou insetos
Estruturais: glicoprotenas (parede celular), queratina
(pele, unha)
Funo hormonal: insulina
Enzimas: catalase, hidrolases, isomerases, etc.

ESTRUTURA PROTEICA
Apesar da complexidade de suas funes, as protenas
so relativamente simples: Repeties de 20 unidades
bsicas, os aminocidos (aminocidos-padro)
-aa: pois possuem um grupo amino 1rio e um grupo
carboxlico como substituintes no mesmo tomo de
carbono (exceo: prolina grupo amino 2rio).

Estrutura geral de um -aminocidos.

ESTRUTURA PROTEICA
Apesar da complexidade de suas funes, as protenas
so relativamente simples: Repeties de 20 unidades
bsicas, os aminocidos (aminocidos-padro)
-aa: pois possuem um grupo amino 1rio e um grupo
carboxlico como substituintes no mesmo tomo de
carbono (exceo: prolina grupo amino 2rio).

Estrutura geral de um -aminocidos.

ESTRUTURA PROTEICA
Apesar da complexidade de suas funes, as protenas
so relativamente simples: Repeties de 20 unidades
bsicas, os aminocidos (aminocidos-padro)
-aa: pois possuem um grupo amino 1rio e um grupo
carboxlico como substituintes no mesmo tomo de
carbono (exceo: prolina grupo amino 2rio).

Estrutura geral de um -aminocidos.

ESTRUTURA PROTEICA
Apesar da complexidade de suas funes, as protenas
so relativamente simples: Repeties de 20 unidades
bsicas, os aminocidos (aminocidos-padro)
-aa: pois possuem um grupo amino 1rio e um grupo
carboxlico como substituintes no mesmo tomo de
carbono (exceo: prolina grupo amino 2rio).

Estrutura geral de um -aminocidos.

ESTRUTURA PROTEICA
Apesar da complexidade de suas funes, as protenas
so relativamente simples: Repeties de 20 unidades
bsicas, os aminocidos (aminocidos-padro)
-aa: pois possuem um grupo amino 1rio e um grupo
carboxlico como substituintes no mesmo tomo de
carbono (exceo: prolina grupo amino 2rio).

Estrutura geral de um -aminocidos.

AMINOCIDOS
Os aa podem ser polimerizados para formar cadeias
Reao de condensao

grupo carboxil de uma molcula


reage com o grupo amina de
outra, liberando uma molcula
de H2O.
Ligao peptdica.

ESTRUTURA PROTEICA

ESTRUTURA PROTEICA
Outro tipo de ligao importante: Ligaes Dissulfeto
entre Cistenas

AMINOCIDOS
Comportamento qumico anftero
cidos
(doadores de prtons)

bases
(receptores de prtons)

adquirindo carga eltrica efetiva dependendo da [H+]


(pH).
PI: pH cujo determinado aa encontra-se eletricamente
neutro.

AMINOCIDOS
pH > pI
pH do meio esta alcalino;
concentrao reduzida de
ons H+ no meio;
os aa liberam H+, ficando
eletricamente negativo.

pH < pI
pH do meio esta cido;
excesso de ons H+ no meio;
os aa recebem H+, ficando
eletricamente positivo.

AMINOCIDOS
Polmeros compostos de
- 2 aa= dipeptideo
- 3 aa = triptideo
- 3-10 aa = oligopeptideo
- Muitos aa = polipeptideo

Peptdeos

Classificao: polaridade de suas cadeias laterais.

apolares,
polares no carregados e
polares carregados.

AMINOCIDOS
Cadeias laterais apolares

Glisina

Alanina

Fenilalanina

Valina

Triptofano

Leucina

Metionina

Isoleucina

Prolina

AMINOCIDOS
Cadeias laterais apolares

Glisina

Alanina

Valina

Leucina

Isoleucina

Menor

Fenilalanina

Triptofano

Metionina

Prolina

AMINOCIDOS
Cadeias laterais apolares

Glisina

Alanina

Valina

Leucina

Isoleucina

Alifticos

Fenilalanina

Triptofano

Metionina

Prolina

AMINOCIDOS
Cadeias laterais apolares

Glisina

Alanina

Valina

Leucina

Isoleucina

Aromticos

Fenilalanina

Triptofano

Metionina

Prolina

AMINOCIDOS
Cadeias laterais apolares

Glisina

Alanina

Valina

Leucina

Isoleucina

tiol ter

Fenilalanina

Triptofano

Metionina

Prolina

AMINOCIDOS
Cadeias laterais apolares

Glisina

Alanina

Valina

Leucina

Isoleucina

Grupo pirrolidina cclico

Fenilalanina

Triptofano

Metionina

Prolina

AMINOCIDOS
Cadeias laterais polares no carregadas

Serina

Tirosina

Treonina

Asparagina

Cistena

Glutamina

AMINOCIDOS
Cadeias laterais polares no carregadas

Serina

Treonina

Asparagina

Grupos carboxlicos

Tirosina

Cistena

Glutamina

AMINOCIDOS
Cadeias laterais polares no carregadas

Serina

Treonina

Asparagina

Grupos amino

Tirosina

Cistena

Glutamina

AMINOCIDOS
Cadeias laterais polares no carregadas

Serina

Treonina

Asparagina

Cistena

Glutamina

Grupos fenlico

Tirosina

AMINOCIDOS
Cadeias laterais polares no carregadas

Serina

Treonina

Asparagina

Grupo tiol q pode formar ponte


dissulfeto com outra cisteina

Tirosina

Cistena

Glutamina

AMINOCIDOS
Cadeias laterais carregadas

Histidina

Lisina

Ac. asprtico

Arginina

Ac. glutmico

AMINOCIDOS
Cadeias laterais carregadas

BSICOS:
Histidina

Lisina

Ac. asprtico

Arginina

Ac. glutmico

carregadas + em
valores de pH
fisiologicos

AMINOCIDOS
Cadeias laterais carregadas

CIDOS:
Histidina

Lisina

Ac. asprtico

Arginina

Ac. glutmico

Carregado
acima de pH 3

AMINOCIDOS
Tabela de aa.

ESTRUTURA PROTEICA
As protenas podem ter 4 tipos de estrutura dependendo
do tipo de aa que possui, do tamanho da cadeia e da
configurao espacial da cadeia polipeptdica.

Primria
Estruturas

Secundria
Terciria
Quaternria

ESTRUTURA PROTEICA
Estrutura Primria

Sequncia dos aa, sem se preocupar com a


orientao espacial da molcula.
Determina a forma e a funo da protena.

ESTRUTURA PROTEICA
Estrutura Primria

Sequncia dos aa, sem se preocupar com a


orientao espacial da molcula.
Determina a forma e a funo da protena.

As interaes intermoleculares
fazem com que a cadeia
protica assuma uma estrutura
2ria e, algumas vezes, uma 3ria

ESTRUTURA PROTEICA
Estrutura Secundria

Dada pelo arranjo espacial de aa prximos entre si na


seqncia primria da protena.
o ltimo nvel de organizao das protenas
fibrosas mais simples estruturalmente.
Ocorre graas possibilidade de rotao das
ligaes entre os carbonos a dos aminocidos e seus
grupamentos amina e carboxila.

ESTRUTURA PROTEICA
Estrutura Secundria

Alfa-hlice:
Forma mais comum de estrutura 2ria;
Caracteriza-se por uma hlice em
espiral; as cadeias laterais dos aa se
distribuem para fora da hlice;
Principal fora de estabilizao a
ponte H.

ESTRUTURA PROTEICA
Estrutura Secundria

Folha - beta: ou folha pregueada.


Ao contrrio da alfa-hlice, a folha
- beta envolve 2 ou mais
segmentos
polipeptdicos
da
mesma molcula ou de molculas
diferentes, arranjados em paralelo
ou no sentido anti-paralelo.
As pontes H so a principal fora
de estabilizao.

ESTRUTURA PROTEICA
Estrutura Terciria
Conformao tridimensional,
Resulta
do enovelamento (protena globosa) ou
dobramento (protena filamentosa) da estrutura 2ria.

ESTRUTURA PROTEICA
Estrutura Terciria

Esta estrutura confere a atividade biolgica s


protenas.

Enquanto a estrutura 2ria determinada pelo


relacionamento estrutural de curta distncia, a 3ria
caracterizada pelas interaes de longa distncia
entre aa.

ESTRUTURA PROTEICA
Estrutura Terciria

Estas
dobras
so
mantidas em posio por
ligaes
entre
os
diversos radicais -R dos
aa.
Foras fracas, podem
ser facilmente quebradas
desnaturao

ESTRUTURA PROTEICA
Estrutura Quaternria

Associao de vrias subunidades, iguais ou


diferentes, atravs de ligaes no covalentes.
Nvel superior de complexidade que se pode
encontrar na estrutura proteica tanto em protenas
globulares
(hemoglobina)
com
em
fibrosas
(colgeno).
So guiadas e estabilizadas pela mesmas interaes
da 3ria
O tamanho da protena reflete sua funo. A funo
da enzima requer uma estrutura muito grande.

ESTRUTURA PROTEICA
Estrutura Quaternria

Um dos principais exemplos de estrutura quaternria


a hemoglobina.

PROTENAS
Se uma enzima quebrada em seus aa
constituintes, a sua atividade cataltica sempre
destruda.
Assim, a estrutura protica primria, secundria,
terciria e quaternria das enzimas so essenciais para
sua atividade cataltica.

PROTENAS
Simples

Constituida somente
por aa

PROTENAS
Simples

Constituida somente
por aa

Conjugadas

Contm grupos
prostticos,
(grupos no aa, tais
como carbohidratos,
ons, pigmentos)

Hemoglobina

Grupo Heme: tomo de Fe e porfirina

PROTENAS
Fibrosas:
Forma alongada
Insolveis
Funo estrutural: queratinas, colgeno
Globulares:

Formadas por cadeias polipeptdicas que se


dobram adqirindo a forma esfrica ou
globular

Funes: enzimtica, transporte, defesa e


hormonal

Nomenclatura e classificao
das enzimas
Sculo XIX - poucas enzimas identificadas

Adio do sufixo ASE ao nome do substrato:


* gorduras (lipo - grego) LIPASE
* amido (amylon - grego) AMILASE

Nomes arbitrrios:
* Tripsina e pepsina proteases

Nomenclatura e classificao
das enzimas
Sculo XX - quantidade de enzimas descritas

Nomenclatura existente se tornou ineficaz

1955 - IUB - Unio Internacional de Bioqumica adotou


um novo sistema de nomenclatura e classificao

mais complexo
sem ambigidades
baseado no mecanismo de reao

Nomenclatura e classificao
das enzimas
Cada enzima cdigo com 4 dgitos que caracteriza o
tipo de reao catalisada:

(E.C.- Enzime Comission)


1 dgito classe
2 dgito subclasse
3 dgito - sub-subclasse
4 dgito - indica o substrato

Classificao das Enzimas


1. Oxido-redutases (Reaes de oxidao/Reduo)
1.1.atuando em CH-OH
1.2.atuando em C=O
1.3.atuando em C=O1.4.atuando em CH-NH2
1.5.atuando em CH-NH1.6.atuando em NADH, NADPH

2.Transferases (Transferncia de grupos)


2.1.grupos com um carbono
2.2.grupos aldedo ou cetona
2.3.grupos acil
2.4.grupos glicosil
2.7.grupos fosfatos
2.8.grupos contendo enxofre

Classificao das Enzimas


3.Hidrolases (Reaes de Hidrlise)
3.1.steres
3.2.ligaes glicosdicas
3.4.ligaes peptdicas
3.5.outras ligaes C-N
3.6.anidridos cidos
4.Liases (Adio ou remoo de grupos)
4.1. =C=C=
4.2. =C=O
4.3. =C=N-

Classificao das Enzimas


(Transferncia de grupos dentro da mesma
molcula, formao de ismeros)

5.Isomerases

5.1.racemases
5.2. Cis-Trans isomerases
5.3. Oxirredutases Intramoleculares
5.4. Transferases Intramoleculares (Mutases)
5.5. Liases Intramoleculares

(catalisam a ligao de duas molculas com


hidrlise da ligao pirofosfato na molcula de ATP (ou
uma semelhante, igualmente trifosfatada)

6.Ligases

6.1. C-O
6.2. C-S
6.3. C-N
6.4. C-C

Classificao das Enzimas


1. Oxirredutases Reaes de oxidao/Reduo
Exemplo: Lactato desidrogenase

Reduo c. Pirvico
c. ltico

Classificao das Enzimas


2. Transferases - Transferncia de grupos

Exemplo Hexoquinase

Tranferncia do P do
ATP para glicose

Classificao das Enzimas


3. Hidrolases - Reaes de Hidrlise
Exemplo: Lactase

Catalisa a hidrlise da lactose em glicose e galactose

Classificao das Enzimas


4. Liases Adio ou remoo de grupos (H2O, NH4+, CO2).
Ex: Fumarase

hidratao de fumarato em L-malato

Classificao das Enzimas


5. Isomerases Transferncia de grupos dentro da mesma
molcula, formao de ismeros

Exemplo: Triose Fosfato


Isomerase

Interconverso reversvel de dihidroxiacetona


fosfato e D-gliceraldeido-3-fosfato

Classificao das Enzimas


6. Ligases catalisam a ligao de duas molculas com
hidrlise da ligao pirofosfato na molcula de ATP (ou
uma semelhante, igualmente trifosfatada)

Exemplo: Piruvato carboxilase

Formadora de ligao C-C

Classificao das Enzimas


Exemplo:

ATP + D-Glicose

ADP + D-Glicose-6-fosfato
Glicose fosfotransferase

E.C.
2 - Classe - Transferase

Nome trivial: Hexoquinase

Classificao das Enzimas


Exemplo:

ATP + D-Glicose

ADP + D-Glicose-6-fosfato
Glicose fosfotransferase

E.C.
2 - Classe - Transferase
7 - Subclasse - Fosfotransferases

Nome trivial: Hexoquinase

Classificao das Enzimas


Exemplo:

ATP + D-Glicose

ADP + D-Glicose-6-fosfato
Glicose fosfotransferase

E.C.
2 - Classe - Transferase
7 - Subclasse - Fosfotransferases
1 - Sub-subclasse - Fosfotransferase
que utiliza grupo hidroxila como
receptor

Nome trivial: Hexoquinase

Classificao das Enzimas


Exemplo:

ATP + D-Glicose

ADP + D-Glicose-6-fosfato
Glicose fosfotransferase

E.C.
2 - Classe - Transferase
7 - Subclasse - Fosfotransferases
1 - Sub-subclasse - Fosfotransferase
que utiliza grupo hidroxila como
receptor
1 - Indica ser a D-glicose o receptor do
grupo fosfato

Nome trivial:
Hexoquinase

Outras formas de classificar


atuam no interior da clula
Enzimas intracelulares

sintetizam o material celular


realizam reaes
catablicas que suprem as
necessidades energticas
da clula.
atuam fora da clula

Enzimas extracelulares

executando as alteraes
necessrias penetrao
dos nutrientes para o
interior das clulas.

Outras formas de classificar


Agem dentro das molculas
Endoenzimas

Agem nas extermidades das


molculas
Ex:
exoamilases,
que
hidrolisam,sucessivamente,
ligaes glicosdicas a partir
da extremidade no redutora
das mesmas.

Ex: endoamilases, que


hidrolisam
ligaes
glicosdicas ao acaso ao
longo das cadeias de
amilose

Exoenzimas

Outras formas de classificar


Enzimas habituais
ou constitutivas

As clulas sempre as sintetizam

Enzimas indutivas

As clulas s as sintetizam
quando esto na presena do
substrato da enzima

Isoenzimas

Enzimas que tm a mesma funo,


ou seja, catalisam uma mesma
reao, porm apresentam
estruturas diferentes

Propriedades Gerais
Diferenas entre enzimas e catalisadores qumicos

Velocidade de reao mais rpida:


106 a 1012x > que as no catalisadas,
e so varias ordens de magnitude > do
que as reaes catalisadas quimicamente.

Propriedades Gerais
Diferenas entre enzimas e catalisadores qumicos

Maior especificidade da reao


o Grau de especificidade imensamente > em relao
a identidade dos seus S e dos seus P
o Reaes enzimticas raramente produzem
subprodutos.
o Estereoespecificidade:
Agem
em
grupos
funcionais especficos catalisando reaes de
forma estereoepecfica, formando somente um
dos enantimeros possveis

Propriedades Gerais

Condies reacionais mais brandas


o pH
o Temperatura

Desnaturao

Mecanismo de Ao
A reao enzimtica ocorre em duas etapas:
E+S

ES

2 modelos:
Modelo chave-fechadura
Modelo do ajuste induzido

P+E

Mecanismo de Ao
Modelo Chave-fechadura

Emil Fischer em 1894


Relao estrica entre enzima e substrato

Mecanismo de Ao
Modelo do ajuste induzido
Koshland em 1958
Prev um stio de ligao no totalmente prformado,
E e o S sofrem conformao para o encaixe.

Mecanismo de Ao

Estudos por raio X indicam que os stios de ligao aos


substratos da maioria das enzimas so, em grande
parte, pr-formados, mas sofrem mudanas
conformacionais no momento da ligao do substrato
(um fenmeno denominado ajuste induzido).

Mecanismo de Ao
Conceitos

Teoria da Coliso:
o As reaes qumicas acontecem quando ligaes
so quebradas ou formadas.
o Para isto tomos, ons e molculas devem colidir.
o Todos os tomos, ons e molculas esto em
constante movimento e portanto colidindo
constantemente.
o A energia transferida pelas partculas na coliso
pode desorganizar suas estruturas eletrnicas o
suficiente para que as ligaes qumicas sejam
quebradas ou novas ligaes se formem.

Mecanismo de Ao
Energia de ativao: Quantidade de en. requerida para
romper a configurao eletrnica estvel de qualquer
molcula especfica para que os eltrons possam ser
reorganizados.

Energia de Ativao

G reao

Mecanismo de Ao
G: A diferena de energia entre produtos e reagentes

No depende da E.A.

Energia de Ativao

G reao

Mecanismo de Ao
Taxa de reao: A freqncia de colises contendo
energia suficiente para que a reao acontea.

taxa de reao:
o

de T = o calor a freqncia das colises e o n


de molculas que atingem a E.A.

o Reagentes esto + concentrados = Dist. entre as


molculas menor.

Energia do sistema (G)

Reaes Catalisadas por


Enzimas

No catalisada

Energia de Ativao na
ausncia de enzima

Catalisada

Energia de Ativaao na
presena de enzima
Reagentes

G reao
Produtos

Progresso da Reao

Reaes Catalisadas por


Enzimas

Energia do sistema (G)

Catalisador atua diminuindo a Energia de Ativao


No catalisada

Energia de Ativao na
ausncia de enzima

Catalisada

Energia de Ativaao na
presena de enzima
Reagentes

G reao
Produtos

Progresso da Reao

Energia do sistema (G)

Reaes Catalisadas por


Enzimas

No catalisada

Energia de Ativao na
ausncia de enzima

Catalisada

Energia de Ativaao na
presena de enzima
Reagentes

G reao
Produtos

Progresso
da Reao nem o G
No altera
: equilbrio

Reaes Catalisadas por


Enzimas

Energia do sistema (G)

Gcat = Eficincia Catalisador


No catalisada

G: Energia de Ativao
na ausncia de enzima

Catalisada

Reagentes

G: Energia de Ativaao
na presena de enzima
G reao
Produtos

Progresso da Reao

Mecanismo de Ao
Enzimas atuam de diversas formas:

Baixando a E.A., atravs da criao de um ambiente


no qual o estado de transio estabilizado (ex.,
distorcendo a forma da molcula do S).
Providenciando uma via alternativa (ex., reagindo
com o S formando um complexo ES, de existncia
impossvel sem a presena da E).
Reduzindo a variao da entropia da reao ao
orientar os S de forma correta para facilitar a reao.
Na ausncia de E, as molculas colidem em todas as
direes possveis de forma aleatria.

Reaes Catalisadas por


Enzimas
Ex: Decomposio do H2O2
H2O2

Catalase

Condies da Reao

H2O +

O2

Energia livre de Ativao


KJ/mol
Kcal/mol

Velocidade
Relativa

Sem catalisador

75,2

18,0

Platina

48,9

11,7

2,77 x 104

Enzima Catalase 23,0

5,5

6,51 x 108

Reaes Catalisadas por


Enzimas
Embora a enzima participe da seqncia da reao, ela
no sofre nenhuma transformao.

Poucas molculas de E so capazes de catalisar a


converso de milhares de molculas de S a P.
Atuam em pequenas concentraes

Reaes Catalisadas por


Enzimas
1 molcula de Catalase

decompe
5 000 000 de molculas
de H2O2
pH = 6,8 em 1 min

Nmero de renovao = n de molculas de substrato


convertidas em produto por uma nica molcula de
enzima em uma dada unidade de tempo.

Fatores que Influenciam a Ao


Enzimtica
pH
Temperatura
Concentrao da Enzima
Concentrao do Substrato

Fatores que Influenciam a Ao


Enzimtica
pH
A ionizao de aa pode provocar modificaes na
conformao da enzima.
O substrato pode ver-se afetado.
Pepsina pH timo 1,5
Tripsina pH timo 7,7

Fatores que Influenciam a


Ao Enzimtica
Temperatura
temperatura dois efeitos ocorrem:

A taxa de reao aumenta, como se observa na


maioria das reaes qumicas;

A estabilidade da protena decresce devido a


desativao trmica.
Enzima temperatura
tima para que atinja sua
atividade mxima

Fatores que Influenciam a


Ao Enzimtica
Concentrao da Enzima
A velocidade mxima da reao uma funo da
quantidade de enzima disponvel (existindo substrato
em excesso).

Figura: Efeito da [ ] da enzima sobre a velocidade inicial (V0)


com de substrato em excesso.

Fatores que Influenciam a


Ao Enzimtica
Concentrao do Substrato

Inicialmente a velocidade da reao


diretamente proporcional a [S].

Fatores que Influenciam a


Ao Enzimtica
Concentrao do Substrato

A velocidade passa a ser


constante porque no
depende da [S]

Fatores que Influenciam a


Ao Enzimtica
Concentrao do Substrato

A quantidade de reagente
o suficiente grande para
saturar todos os stios
catalticos enzimas.

Inibio enzimtica
Inibidores

Substncias que reduzem a


atividade de uma enzima de forma a
influenciar a ligao do substrato.

Grande parte do arsenal farmacutico


(Por ex. tratamento da AIDS feito com drogas que inibem
a atividade de certas enzimas virais.

Inibio enzimtica
Classificao:

Irreversvel
Competitiva
Reversvel
No Competitiva

Inibio Irreversvel
O inibidor liga-se to fortemente enzima que a
dissociao muito lenta.
Podem destruir grupos funcionais que so essenciais
para a atividade enzimtica.
A enzima no retoma a sua atividade normal.
Ex.: Inseticidas organofosforados na acetilcolinesterase
(enzima importante na transmisso dos impulsos
nervosos).

Inibio Irreversvel
Ex: Inibio da enzima ciclo-oxigenase pelo acetilsalicilato

Ciclo-oxigenase

SNTESE

Prostaglandinas

Processo biolgicos, ex. sensao de dor

Inibio Reversvel
Competitiva
Uma substncia que compete diretamente com o
substrato pelo sitio de ligao de uma enzima.
Inibidor normalmente semelhante ao substrato, de
modo que se liga especificamente ao sitio ativo, mas
difere do substrato por no poder reagir com ele.
O inibidor liga-se enzima formando o complexo EI
cataliticamente inativo.

Inibio Reversvel No
Competitiva
O inibidor no competitivo pode ser uma molcula que
no se assemelha com o substrato, mas apresenta
uma grande afinidade com a enzima.

Esta ligao pode distorcer a enzima tornando o


processo cataltico ineficiente.

Co-fatores
Quase 1/3 das enzimas requerem um componente no
protico para sua atividade, denominado cofator
Poro protica
APOENZIMA

HOLOENZIMA

Cofator

ons metlicos

Molculas
orgnicas
Coenzimas

Co-fatores
A natureza essencial de tais co-fatores explica por que
razo os organismos necessitam de quantidades
diminutas de certos elementos nas suas dietas.
Isso tambm explica, os efeitos txicos de certos metais
pesados (o Cd2+ e o Hg2+) que podem substituir o Zn2+
nos stios ativos de certas enzimas

Co-fatores
Algumas enzimas que contm ou necessitam de
elementos inorgnicos como cofatores
ENZIMA

COFATOR

PEROXIDASE

Fe+2 ou Fe+3

CATALASE
CITOCROMO OXIDASE

Cu+2

LCOOL DESIDROGENASE

Zn+2

HEXOQUINASE

Mg+2

UREASE

Ni+2

Co-fatores - Coenzimas
Maioria deriva de vitaminas hidrossolveis
Muitos organismos no conseguem sintetizar certas
pores das coenzimas essenciais. Tais substncias
devem estar presentes na dieta desses organismos e
so, portanto, chamadas de vitaminas.
Classificam-se em:
transportadoras de hidrognio
transportadoras de grupos qumicos

Co-fatores - Coenzimas
Transportadoras de hidrognio

Co-fatores - Coenzimas
Transportadoras de de grupos qumicos

Regulao da Atividade
Enzimtica
Um organismo deve poder regular as atividades
catalticas de suas enzimas para que ele possa
coordernar seus processos metablicos, responder s
mudanas no meio, crescer e diferenciar-se, tudo de
maneira ordenada.
H duas maneiras pelas quais isso pode ocorrer:
Controle da disponibilidade da enzima.
Controle da atividade da enzima.

Regulao da Atividade
Enzimtica
Controle da disponibilidade da enzima.

A quantidade de uma enzima em uma clula


depende
velocidade de sntese
velocidade de degradao.
Cada uma dessas velocidades diretamente
controlada pela clula e esta sujeita a
mudanas drsticas em perodos que vo de
minutos (em bactrias) at horas (em
organismos superiores).

Regulao da Atividade
Enzimtica
Controle da atividade da enzima.

A atividade pode ser regulada por meio de


alteraes estruturais que influenciem a afinidade
da ligao do substrato enzima.
A afinidade de ligao do S a uma E pode, variar
tambm com a ligao de pequenas molculas,
chamadas efetores alostricos que podem tanto
aumentar como dimunuir a atividade.
Um modelo muito comum de regulao alostrica
a inibio por "feed-back.

Regulao enzimtica
Algumas enzimas podem ter suas atividades reguladas,
atuando assim como moduladoras do metabolismo
celular. Esta modulao essencial na coordenao dos
inmeros processos metablicos pela clula.
Substrato
inicial
A

B
Enzima a1

Enzima b

D
Enzima c

E
Enzima d
Produto
final

Mecanismos de controle
Induo: A presena do substrato A induz a
sntese da enzima a

Regulao enzimtica
Algumas enzimas podem ter suas atividades reguladas,
atuando assim como moduladoras do metabolismo
celular. Esta modulao essencial na coordenao dos
inmeros processos metablicos pela clula.
Substrato
inicial
A

B
Enzima a1

Enzima b

D
Enzima c

E
Enzima d
Produto
final

Mecanismos de controle
Retroinibio: O produto final E, inibe a ao
das enzimas a

Regulao enzimtica
Algumas enzimas podem ter suas atividades reguladas,
atuando assim como moduladoras do metabolismo
celular. Esta modulao essencial na coordenao dos
inmeros processos metablicos pela clula.
Substrato
inicial
A

B
Enzima a1

Enzima b

D
Enzima c

E
Enzima d
Produto
final

Mecanismos de controle
Represso catablica: Caso haja um caminho mais
conveniente, a sntese de todas as enzimas reprimida

Regulao enzimtica
Algumas enzimas podem ter suas atividades reguladas,
atuando assim como moduladoras do metabolismo
celular. Esta modulao essencial na coordenao dos
inmeros processos metablicos pela clula.
Substrato
inicial
A

B
Enzima a1
Enzima a2
Enzima a3

Enzima b

D
Enzima c

E
Enzima d
Produto
final

Mecanismos de controle
Cada isoenzimas pode ser regulada independentemente
Controle fino do metabolismo

Comparao das enzimas


com catalisadores qumicos
Enzimas

Catalisadores Qumicos

alta

baixa

Natureza da estrutura

complexa

Simples

Sensibilidade T e pH

alta

Baixa

suaves

drstica (geralmente)

alto

Moderado

Natureza do processo

batelada

Contnuo

Consumo de energia

baixo

Alto

Formao de subprodutos

baixa

Alta

difcil/cara

simples

Atividade Cataltica (temperatura ambiente)

alta

baixa

Presena de cofatores

sim

no

Estabilidade do preparado

baixa

alta

Energia de Ativao

baixa

alta

alta

baixa

Caracterstica
Especificidade ao substrato

Condies de reao (T, P e pH)


Custo
de
obteno
purificao)

(isolamento

Separao catalisador/ produtos

Velocidade de reao

Comparao das enzimas


com catalisadores qumicos
Enzimas

Catalisadores Qumicos

alta

baixa

Natureza da estrutura

complexa

Simples

Sensibilidade T e pH

alta

Baixa

suaves

drstica (geralmente)

alto

Moderado

Natureza do processo

batelada

Contnuo

Consumo de energia

baixo

Alto

Formao de subprodutos

baixa

Alta

difcil/cara

simples

Atividade Cataltica (temperatura ambiente)

alta

baixa

Presena de cofatores

sim

no

Estabilidade do preparado

baixa

alta

Energia de Ativao

baixa

alta

alta

baixa

Caracterstica
Especificidade ao substrato

Condies de reao (T, P e pH)


Custo
de
obteno
purificao)

(isolamento

Separao catalisador/ produtos

Velocidade de reao

Comparao das enzimas


com catalisadores qumicos
Enzimas

Catalisadores Qumicos

alta

baixa

Natureza da estrutura

complexa

Simples

Sensibilidade T e pH

alta

Baixa

suaves

drstica (geralmente)

alto

Moderado

Natureza do processo

batelada

Contnuo

Consumo de energia

baixo

Alto

Formao de subprodutos

baixa

Alta

difcil/cara

simples

Atividade Cataltica (temperatura ambiente)

alta

baixa

Presena de cofatores

sim

no

Estabilidade do preparado

baixa

alta

Energia de Ativao

baixa

alta

alta

baixa

Caracterstica
Especificidade ao substrato

Condies de reao (T, P e pH)


Custo
de
obteno
purificao)

(isolamento

Separao catalisador/ produtos

Velocidade de reao

Comparao das enzimas


com catalisadores qumicos
Enzimas

Catalisadores Qumicos

alta

baixa

Natureza da estrutura

complexa

Simples

Sensibilidade T e pH

alta

Baixa

suaves

drstica (geralmente)

alto

Moderado

Natureza do processo

batelada

Contnuo

Consumo de energia

baixo

Alto

Formao de subprodutos

baixa

Alta

difcil/cara

simples

Atividade Cataltica (temperatura ambiente)

alta

baixa

Presena de cofatores

sim

no

Estabilidade do preparado

baixa

alta

Energia de Ativao

baixa

alta

alta

baixa

Caracterstica
Especificidade ao substrato

Condies de reao (T, P e pH)


Custo
de
obteno
purificao)

(isolamento

Separao catalisador/ produtos

Velocidade de reao

Referencias Bibliogrficas
AQUARONE, Eugnio; BORZANI, Walter; ALMEIDA
LIMA, Urgel de; SCMIDELL, Willibaldo. Biotecnologia
industrial. Volumes 1, 2, 3 e 4.
CHAMPE, Pamela C. & HARVEY, Richard A. - Bioqumica
Ilustrada. Artes Mdicas. Porto Alegre, 1997. pp 126-131.
LEHNINGER, Albert L; NELSON, David L.; COX, Michael
M. Principios de bioquimica. 4. ed. So Paulo: Sarvier,
2006.
STRYER, Lubert. Bioqumica. Rio de Janeiro:
Guanabara Koogan,1996. Captulo 7
VOET, Donald; VOET, Judith G. Bioqumica. 3. ed. Porto
Alegre: ARTMED, 2006. 1596p.