BIOSEGURIDAD EN EL

LABORATORIO DE
MICROBIOLOGA

EN EL LABORATORIO
USAR TNICA
EN LA MESADA SOLO
MATERIALES DE TRABAJO
SENTARNOS SOLO EN LAS
SILLAS
NO COMER, BEBER NI
FUMAR
CABELLO RECOGIDO

MANTENER EL ORDEN Y
LIMPIEZA
LIMPIAR LA
MESADAS ANTES DE
TRABAJAR
DESCARTAR LOS
MATERIALES
CONTAMINADOS EN
BOCALES
DESCARTAR
MATERIALES NO
CONTAMINADOS EN
LA BASURA

FRENTE A CUALQUIER
ACCIDENTE
AVISAR
INMEDIATAMENTE
AL DOCENTE
RESPONSABLE

LAVARSE LAS MANOS

DESPUES DE
TRABAJAR CON
MUESTRAS O
CULTIVOS
ANTES DE SALIR
DEL LABORATORIO

PROTECCION PERSONAL
USO DE TNICA SIEMPRE
PARA SITUACIONES
ESPECIALES:
-ROPA ESPECIAL
-GUANTES
-LENTES
-TAPABOCAS
OTROS

TAMAO: clula eucariota versus clula procariota

Organelos eucariticos : Cloroplastos

Organelos eucariticos: Mitocondria

FORMA DE LAS BACTERIAS

cocos

bacilos

espirilos

V. cholerae

Helycobacter pylori

L. Monocytogenes

Campylobacter sp.

FLORA NORMAL VAGINAL

lactobacilos

clula epitelial

Streptococcus

Cocos gram positivos

Bacilos Gram negativos

Coloracin de Ziehl- Neelsen

Esquema de E. coli

Micrografa electrnica de barrido mostrando Klebsiella sp

Estructura celular procariota DNA

No tiene ncleo. El DNA est en el
citoplasma. Se habla de nucleoide para
referirse a la zona que ocupa el DNA.
Es haploide. El genoma es una nica
molcula de DNA de doble cadena,
circular.
El genoma contiene 1 - 6 x 106 pares de
bases (bp) en procariotas de vida libre;
1000-5000 genes.
Puede contener otros elementos genticos
no indispensables para la vida: plsmidos
y genomas fgicos.
Est rodeada por la membrana celular y
cubiertas exteriores de naturaleza variable.

La membrana celular
Funciones:
Transporte selectivo de sustratos.
Participa en la generacin de energa y
en la divisin celular.

Estructura:
Bicapa fosfolipdica con protenas
embebidas; puede contener tambin
hopanoides de estructura similar al
colesterol.
*en Archaea, membranas adaptadas a
condiciones extremas - teres de alcohol
isoprenoide, algunas monocapas.

Otro sistemas de membrana

Membrana fotosinttica en lminas
(bacterias prpuras)

Membrana como vesculas

individuales (bacterias prpuras)

Clorosomas unidos a membrana

plasmtica (bacterias verdes)
Bacterioclorofila asociada directamente a
la membrana plasmtica
(Heliobacterium)

Esquema de la estructura de la
pared bacteriana

ESQUEMA DE LA PARED
GRAM POSITIVA

Gram

Eubacterias
Gram

Peptidoglicano o
murena

Pptidoglicano
de Gram +

Pptidoglicano de Gram -

Muropptido de Gram

Peptidoglicano o murena
Funciones: formando un saco rgido y
cerrado, confiere forma a la bacteria y
previene la lisis osmtica.
Estructura: Polmero de muropptidos.
Muropptido: Es el monmero, compuesto por N-acetil
glucosamina (NAG) y cido N-acetil murmico (NAM) en unin
(1,4), ms un tetrapptido unido a NAG.
Cadenas de glicanos: los monmeros se unen formando cadenas
lineales NAG-NAM-NAG-NAM-NAG-NAM------ Entrecruzamientos: los tetrapptidos quedan perpendiculares a las
cadenas lineales y se unen a los tetrapptidos de las cadenas
vecinas por enlaces peptdicos, creando la malla de pptidoglicano.

arabinogalactano
polisacarido

Acyl -lipido

Lipoarabinomanano LAM
(lipopolisacarido)
Ac. Miclico
Cord factor

Paredes celulares Gram positivas y

Gram negativas
Las bacterias se agrupan en base a su tincin
por la tcnica de Gram.
Gram positivos - Pared celular con grueso
peptidoglicano que retiene un colorante
especfico. No tienen membrana externa.
Gram negativos - pared celular compleja, con
membrana externa y un espacio entre
membrana interna y externa -el periplasma- que
contiene el saco de murena y abundantes
enzimas. El peptidoglicano es fino, por lo que
no retienen el colorante.

Pared celular Gram positiva

Posee un polmero de peptidoglicano.
Organismos gram positivos altamente sensibles a
antibiticos -lactmicos

cidos teicoicos confieren carga negativa a la pared

celular.
cidos lipoteicoicos anclan la pared a la membrana
plasmtica
No funciona como barrera de permeabilidad

Pared celular Gram negativa

Membrana externa de bacterias gram negativas
Capa externa consituda por lipopolisacridos (LPS)
Capa interna de fosfolpidos; unida a peptidoglicano por
lipoprotenas

Protenas porinas permiten el pasaje (de pequeas

molculas) al periplasma
Protenas de enlace periplasmticas unen nutrientes,
interactan con proteinas de transporte en membrana
plasmtica para facilitar el ingreso de nutrientes.

Lipopolisacrido (LPS)
Lpido A (NAG-P + grupos acilos)
Ncleo del polisacrido
contiene KDO
(cetodesoxioctonato) otros
carbohidratos (ramnosa, cido
galacturnico)
usualmente especfico de especies
O-antigen
nmero de repeticiones variables
tambin contiene carbohidratos
especfico de cepa
A menudo txico para animales endotoxina
Crea superficies densamente
hidroflicas

Otros polisacridos extracelulares

Glicocalix
Cpsulas - altamente organizado
Capas mucilaginosas - menos
organizado
Usualmente constitudo por
polisacridos

Funciones
Proteccin contra defensas del
husped
Proteccin contra desecacin
Proteccin contra virus, toxinas
Adhesin a superficies

Streptococcus pneumoniae-cpsula

Fimbria, Pili, Flagelo

Fimbria - filamento proteico
corto, involucrado en funciones
de adhesin a superficies.
Pelo sexual - unin a clula
receptora durante la conjugacin.
Flagelo - filamento proteico
involucrado en la motilidad.

Flagelos

Flagelos
Localizacin y nmero
frecuentemente usados para
distinguir bacterias.
Solo detectado por tcnicas de
tincin especficas
monotrico - nico flagelo
polar
anfitrico - uno en cada
extremo
lofotrico - agrupados en un
extremo
peritrico - todo alrededor

Micrografa electrnica de Proteus vulgaris

Mecanismo de accin flagelar

Rotacin de anillos en el cuerpo
basal estara dirigido por
gradiente de H+ - no ATP.
Rotacin antihoraria produce
movimiento hacia
adelante:corridas.
Rotacin horaria causa cese del
movimiento hacia adelante:
vueltas
Corridas/ Vueltas controladas por
quimioatrayentes y repelentes

Endosporas
Resistencia al calor, radiacin, desecacin.
Producidas principalmente por los gneros Bacillus y
Clostridium
Permite la supervivencia en ambientes desfavorables
DNA protegido por cido dipicolnico y protenas
Luego de la activacin por stress, la disponibilidad de
nutrientes dispara la germinacin y el crecimiento
La localizacin de la espora en la clula puede ser usada para la
identificacin

Clostridium botulinum

Inclusiones citoplasmticas
Algunas bacterias tienen estructuras internas
grnulos de almacenamiento - polifosfato,
sulfuro, polihidroxibutirato (PHBs)
vesculas de gas - flotacin
membranas fotosinttica y respiratoria

DIFERENTES MORFOLOGAS
COLONIALES

MEDIO SELECTIVO Y
DIFERENCIAL
Colonia Lactosa negativa

Colonia Lactosa positiva

HEMOLISIS EN AGAR SANGRE

HEMLISIS COMPLETA

HEMLISIS PARCIAL

S. epidermidis en agar sangre

Serratia marcescens

Pseudomonas aeruginosa
Siembra en medio OF
Metabolismo oxidativo