PUCE

FACULTAD DE MEDICINA
BIOLOGA T ERICA

HIPOTNICA
ESTIMULACIN DEL
NA+ TRANSPORTE
ACTIVO EN RANA
MSCULO
ESQUELTICO: PAPEL
DEL CITOESQUELETO

MTODOS
Experimento se realizo en el musculo sartorio de
una rana,
Antes de la diseccin refrigerado en una mezcla de
agua helada a la inmovilidad total, duro 40 minutos.
Despus de 20 minutos reaccionan a estmulos.

La solucin salina normal tuvo la siguiente composicin

(mm): 115 de NaCl, KCl 2.5, CaCl 2 1.8, Na2HPO4 2.15 y
NaH2PO4, 0,85 (pH 7,18). El medio isotnico usado como
referencia fue similar a la solucin de Ringer normal,
excepto que la concentracin de NaCl se redujo de 53 mm
y adems tena sacarosa 113 mm.
La presin osmtica relativa, , fue reducido a la mitad
(= 0.5) por supresin de sacarosa y se duplic (= 2)
haciendo que la concentracin de sacarosa 339 mm, as
que independientemente de , todas las soluciones
experimentales tenan la misma composicin inica

Un osmmetro Wescor
5100 fue utilizado para
controlar la osmolaridad de
los medios de comunicacin.

Emanacin se midi
mediante la exposicin de
los msculos para la
solucin de Ringer normal
etiquetados con el istopo
para 2.5 h.

Una serie de tubos que

contienen 2.6 ml de soluciones no
radiactivas.
Fueron digeridos en tubos con
0,4 ml de 70% HNO3. Despus de
la digestin, se agreg agua
destilada hasta un volumen total
de 2.6 ml.

La radioactividad de todas las

muestras se evaluaron en un
contador gamma.
El contenido de Na+ de fibras
musculares en cualquier
momento durante el lavado se
obtuvo del contenido de Na+ de
los msculos.

Se midi la densidad de sitios

de bomba Na+ enlace de ouabana
,
Se ha demostrado que con una
concentracin de saturar de
ouabana (40 m), la constante de
tiempo de enlace es del orden de
16 minutos.

Ouabana del msculo de la rana

tiene dos componentes distintos, la
versin inicial que es relativamente
rpido (lavado del espacio extracelular
y sitios de unin inespecfica), seguida
de una muy lenta, que es
monoexponential y representa la
liberacin de los glucsidos de sitios de
Unin especfica.

Perodos de lavado duraron 540 min y

la tonicidad de la solucin para que el
msculo ha sido expuesto ltima
durante el periodo de enlace. La
cantidad de ouabana vinculado a sitios
especficos (bombas) al final del
perodo de carga est dada por la
extrapolacin del componente lento de
la lavado a tiempo cero

De esta manera puede obtenerse

fcilmente el contenido de
ouabana muscular en cualquier
momento durante el perodo de
lavado.

RESULTADOS
Na+ por la bomba aumenta a medida que [Na+]
sube, a medida que el tiempo transcurre.

La bomba de Na+ , parece

apropiado saber cmo el eflujo
activo de Na+ y [Na+] cambian las
fibras de los msculos se hinchan
expuestos a mitad de la presin
osmtica normal.

Cambio de volumen de agua es

considerablemente lento en
comparacin con los que se ven
en fibras.

Estimulacin de la emanacin
de Na+ activa no es el resultado
de la sntesis de novo de bombas
y es independiente de la
integridad de los microtbulos o
filamentos intermedios

Un destabiliser de los microtbulos,

no alter el efecto de hipoticidad en
el transporte activo de Na+.
Asimismo, la exposicin de los
msculos a 4 mm de acrilamida, un
agente interrumpiendo de filamentos
intermedios no alter la respuesta
hipotnica de la bomba de Na+.

Interrupcin de
microfilamento reduce la
estimulacin hipotnica de la
emanacin de la activa Na+

El aumento hipotnico
de enlace ouabana
depende de la integridad
de microfilamentos

Interrupcin de los microtbulos por

colchicina (100 m) y filamentos
intermedios por acrilamida (4 mm) no
alter el efecto hipotnico. Asimismo,
genistena (100 m), Agentes
interrumpir microfilamento como
Citocalasina B (5 m) y Latrunculina B
(10 m) redujo el aumento inducido por
la emanacin de Na+