CULTIVOS

CELULARES
PRESENTADO POR:
ROXANA MARGARITA MIER CAAZ
MILAGRO BARANDICA MORALES
YULITH MARCELA MIER CAAZ

CULTIVOS CELULARES
Conjunto de Tcnica que
permiten el matenimento
de clulasin vitro,
manteniendo al mximo sus
propiedades fisiolgicas,
bioqumica y gentica

HISTORIA
Wilhelm Roux en 1885 cultivo clulas de embrin
de pollo en solucin salina durante algunos
das.
Harrison en (1907), realiz cultivos de medula espinal
embrionaria de anfibios.
Burrows en 1910 utilizo plasma para nutrir los
explantes de clulas embrionarias de pollo

Carrel en 1913 demostr la posibilidad de mantener

clulas de embrin de pollo, a un tiempo superior al de
la vida del animal, mantuvo las clulas durante 34 aos.

Frasco de Carrel

Rous-Jones en 1916 emplearon por primera vez

extractos enriquecidos con tripsina para disociar las
clulas de embrin de pollo, estableciendo el primer
cultivo celular propiamente dicho.

1940 con la produccin de antibiticos se

estabilizaron los cultivos celulares durante mas
tiempo.
Bacterias y hongos no permita la proliferacin de
clulas.

 En 1961, Hayflick y Moohead demostraron que a

partir de clulas de tumores humanos Se pueden
generar lneas celulares.
1952 Gey, Coffman y Kubicek, establecieron la
primera lnea celular continua. Clulas Hela
Henrietta Lacks

Hela

 1952 se desarrollaron las primeros

medios de cultivo qumicamente
definidos.
Eagle
MBE

RPMI
1640

Medio
199

DMEN
MEME

 TIPOS DE CULTIVOS
Cultivo primario: cultivo, tejidos u rganos tomados
directamente de un animal.

Cultivo de rganos, explantes, mantenimiento de

rganos o partes de rganos in vitro.

Cultivo de tejidos: mantenimiento de tejidos in vitro.

Cultivo de clulas: mantenimiento de clulas

dispersas.

MEDIO RPMI
Es una mezcla de sales enriquecida con
aminocidos
y
otros
componentes
esenciales para el crecimiento celular.
Acta como una solucin nutritiva en
cultivo celular.

MEDIO DULBECCO
MEM
Es una mezcla de sales enriquecida con aminocidos
y otros componentes esenciales para el crecimiento
celular.
Acta como una solucin nutritiva en cultivo celular.

COLECCIONES DE CULTIVOS
CELULARES
Las colecciones operan como
bibliotecas que protegen material
viviente y requieren de una
plataforma estable y segura a
largo plazo con vistas a proveer un
servicio sostenible

Tipos de colecciones
Nacionales con fin de inventariar y
preservar las colecciones de inters
sanitario, agrcola e industrial existentes
en el pas.
De preservacin de la biodiversidad
microbiana ex situ.
De
microorganismos
usados
como
controles: cultivos de referencia.
Colecciones Universitarias y de Centros de
Investigacin.

Las Colecciones de Cultivos a

nivel internacional

La Federacin Internacional de Colecciones de

Cultivo (WFCC) constituyen una nica red global
para la preservacin ex situ de la diversidad
microbiana que sostiene la vida en la tierra.
Su principal objetivo es la promocin y desarrollo
de colecciones de cultivos de microorganismos y
lneas celulares.

La Federacin Latinoamericana de
Colecciones de Cultivos (FELACC)
Es un organismo sin fines de lucro,
dedicado a promover acciones de inters
para las colecciones de cultivo de Amrica
Latina y El Caribe, en su funcin de
preservar
ex
situ
la
diversidad
microbiana.
Actualmente,
estn
asociadas
51
colecciones de cultivos de: Argentina,
Brasil, Cuba, Colombia, Ecuador, Mxico,
Per, Uruguay y Venezuela. 53722
cultivos.

LNEA CELULAR
Cultivo celular que tiene alta capacidad de
multiplicarse in vitro, establecido a partir del
primer subcultivo de un cultivo primario y
que tiene las mismas caractersticas que el
tejido de origen.

EJEMPLO DE LINEAS
CELULARES

Coloracin de las clulas Hep-2

con Giemsa
Se utilizaron placas de 24 de pozos sobre
laminillas de vidrio en medio Dmen- f12, a
una temperatura de 37c
Se levaron con solucin salina estril
Se fijaron metanol por 15 minutos para
iniciar la coloracin

Metodologa
Estandarizacin de cultivos

Se realizo sobre una de 24 pozos

se agrego 500u del medio Dmen o Men.
Suero feral bovino del 5 a 10%
El algunos pozos se agregaron 5 u de
antibitico mezclado con 5 u glutamina
Las cajas se incubaron a 37 c con 5% de
Co2 y se monitorearon por 3 das

Doblaje poblacional y de
duplicacin de la lnea celular
se sembraron en una placa de 24 pozos a
diferentes densidad en 1 ml del medio
Dmen-f12
En otra placa se sembraron las clulas Hep2 a diferentes densidades en 1 ml del medio
Men
Se complementaron con la muestra con 10%
de SFB y 1% de antibiticos
Se incubaron a una temperatura de 37c y
las placas fueron monitoreadas por 48h

MUCHAS GRACIAS