The effect of Initial Cell

Concentration on Xylose
Fermentation by Pichia stipitis
Alumna: Pamela Guittins Alcal
Materia: Diseo de Biorreactores
Catedrtico: Alejandro Valdez

Fermentacin de Xilosa para producir

etanol:

S. stipitis
es capaz
de realizar tanto
fermentacin con oxigeno limitado como
aerbica y tiene la capacidad natural ms alta
conocida de cualquier levadura para fermentar
directamente xilosa, convirtindola a etanol,
un
rasgo
potencialmente
valiosa
econmicamente.

La xilosa es un azcar hemicelulsico que se

encuentra en todas las plantas angiospermas.

Como tal xilosa constituye el segundo resto de

carbohidrato ms abundante en la naturaleza.

La xilosa puede ser producido a partir de

madera o residuos agrcolas a travs de la
hidrlisis auto- o cido.

Condiciones ambientales y
nutricionales
Se cultiv en extracto de levadura, peptona, placas de agar xilosa a 30 C
durante 3 d.
Los platos se prepararon a partir de:
10,0 g / L de extracto de levadura,
20,0 g / L de peptona
20,0 g / L de xilosa
20,0 g/ L de agar .
Las colonias de las placas fueron cultivadas durante la noche en un
medio de fermentacin esterilizada por filtracin que contiene 1,7 g / L
base nitrogenada de levadura (sin aminocidos y sulfato de amonio), 2,27
g / L de urea, 6,56 g / L de peptona y 20,0 g / L de xilosa.

Re
su
m
en
El propsito del articulo fue
establecer una comparacin en la
produccin de etano ,mediante la
fermentacin de xilosa ,usando
Pichia stipitis , a diferentes
concentraciones iniciales.

FASE DE
DESACELERACIN

Fase exponencial

Cur
va
de
crec
imie
nto
de
la
leva
dura
a
dife
rent
es
con
cent
raci
one
s
inici
ales

Fase
estacionaria

Curva de consumo de la xilosa a diferentes concentraciones iniciales

Curva de concentracin de Etanol a diferentes concentraciones iniciales

Curvas de concentracion a una biomasa inicial de 1.8 g/L

140

A 1.8 g de biomasa/L:

120

*Tipo de fermentacin
parcialmente asociada
*Presenta fase exponencial
muy breve, solo de 0 a 6 hr.

100

Concentracion (g/L)

60
40
20

*Fase de desaceleracin
amplia, abarca el resto del
tiempo registrado
*No se aprecia una fase
estacionaria muy obvia,
apenas parece comenzar a
formarse.

Crecimiento (g/L)
Sustrato (g/L)
Etanol (g/L)

80

0
0 20 40 60 80 100120140160
T iempo (h)

Tiempo
0
6
12
25
37
48
73
96
120
144

Crecimiento
(g/L)
1.8
2.4
3.1
3.7
4.3
4.8
5
5.5
5.8
6

Sustrato
(g/L)
120
117
109
104
100
98
95
91
80
78

Etanol
(g/L)
0
2
4
5.6
9.2
11
13
15.5
17
18.3

Rendimiento
global, t de 0 a 144 hr

Rendimiento
en fase exponencial, t de 0 a 6 hr

g de biomasa/ g de sustrato

g de biomasa/ g de sustrato

Rendimiento
en fase exponencial, t de 0 a 6 hr
g de producto / g de sustrato

Rendimiento
global, t de 0 a 144 hr
g de producto / g de sustrato
Velocidad especifica de crecimiento
t de 0 a 6 hr

Curvas de concentracin a una biomasa inicial de 4.3 g/L

140
120

A 4.3 g de biomasa/L:

100
Crecimiento
Sustrato
Producto

80
Concentracin (g/L)
60

*Tipo de fermentacin
parcialmente asociada

40

*Presenta fase exponencial

muy breve, de 0 a 6 hrs.

20
0
0

20

40

60

80 100 120 140 160

T iem po (h)

Concentracin Concentracin
Tiempo(h) de biomasa (g/L) de sustrato(g/L)
0
4.3
120
6
5.7
111
12
5.9
105
25
6.9
95
37
6.7
92
48
7.1
84
73
7.4
77
96
7.9
69
120
8
58
144
7.9
47

Concentracin
de producto
(g/L)
0
3.5
7.5
8.5
12
14
17.3
22
24.6
28

*fase de desaceleracin amplia,

de 6 a 127 hrs (aprox).
*La fase estacionaria se ve a
partir de las 127 hrs.

Rendimiento
global, t de 0 a 144 hr
g de biomasa/ g de sustrato

Rendimiento
en fase exponencial, t de 0 a 6 hr
g de producto / g de sustrato
Rendimiento
global, t de 0 a 144 hr
g de producto / g de sustrato

Velocidad especifica de crecimiento

t de 0 a 144 hr

Rendimiento
en fase exponencial, t de 0 a 6 hr
g de biomasa/ g de sustrato

Curvas de concentracin a una biomasa inicial de 6.5 g/L

140
120
100
Crecimiento
Sustrato
Producto

80
Concentracin (g/L)

60

A 6.5 g de biomasa/L:

40
20
0
0

20 40 60 80 100 120 140 160

T iem po (h)

Tiempo (h)
0
6
12
25
37
48
73
96
120
144

Crecimiento
(g/L)
6.5
8.7
8.6
9.3
9
9.6
9.7
9.7
10.1
10

Sustrato
(g/L)
120
104
100
92
84
80
62
56
42
31

Producto
(g/L)
0
4
7
11
13.5
17.5
20.5
24.7
27
33

*Tipo de fermentacin
parcialmente asociada
*Presenta fase exponencial muy
breve, de 0 a 6 hrs.
*Fase de desaceleracin amplia,
de 6 a 80 hrs
*Se distingue bien la fase
estacionaria a partir de las 80
horas.

Rendimiento
en fase exponencial, t de 0 a 6 hr
g de biomasa/ g de sustrato

Rendimiento
en fase exponencial, t de 0 a 6 hr
g de producto / g de sustrato

Rendimiento
global, t de 0 a 144 hr
g de producto / g de sustrato

Velocidad especifica de crecimiento

t de 0 a 6 hr

Rendimiento
global, t de 0 a 144 hr
g de biomasa/ g de sustrato

Discusin:
Por qu se detiene el crecimiento en cada uno de los
casos?
La inhibicin de sustrato no es la causa debido a que, en los tres casos,
a 192 horas (duracin del experimento), an queda parte del sustrato.
Hiptesis:
Durante la fermentacin de xilosa se obtiene un producto secundario,
el xilitol. En la tabla 1, se puede ver como el rendimiento de xilitol va
aumentando conforme la concentracin inicial de biomasa aumenta, a
su vez la selectividad de etanol disminuye a mayor concentracin
inicial de biomasa, debido a lo anterior, con los datos que reporta el
articulo se puede asumir que el crecimiento se detiene por el xilitol.

Referencia:
Agbogbo K., Frank, GUILLERMO COWARD-KELLY, 1 MADS TORRY-SMITH, 1
KEVIN WENGER, 1 AND THOMAS W. JEFFRIES2 1 novozymes north america inc.,
77 perry chapel church road, franklinton, NC 27525, e-mail: fkag@novozymes.Com;
and 2institute from microbial and biochemical technology, forest products laboratory,
one gifford pinchot dr., Madison, WI 53705 The Effect of Initial Cell Concentration
on Xylose Fermentation by Pichia stipitis. 2007