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Automatizacion en

la hemostasia

En la actualidad, la automatizacin del laboratorio de


hemostasia es de gran aplicacin a nivel mundial. La
misma ha contribuido a mejorar la estandarizacin y a
la simplificacin de la tarea diaria. Esto ha mejorado
en gran medida la eficiencia de los laboratorios y la
calidad de sus resultados. La automatizacin es
relativamente reciente.
En un principio, los mtodos eran solamente
manuales, basados en una deteccin visual de la
formacin del cogulo de fibrina y con una incubacin
a 37C bien controlada. Mas tarde, en los aos 70s,
surgieron los primeros instrumentos semiautomticos
basados en principios pticos o mecnicos.

Mtodos magnticos.
Se basan en la deteccin de un aumento en la viscosidad del plasma
cuando se forma el cogulo de fibrina. Existen dos variantes de este
principio. En la primera se aplica un campo electromagntico a las
cubetas de reaccin, que detecta el movimiento de una esfera de acero
dentro del plasma. La esfera oscila dentro de la muestra con un
movimiento pendular constante. A medida que la fibrina comienza a
formarse, la viscosidad aumenta y el movimiento de la esfera se retrasa.
El cronmetro se detiene cuando la oscilacin de la esfera alcanza un
nivel predeterminado. El segundo mtodo de deteccin tambin usa una
esfera de acero, pero colocada en una posicin fija gracias a la accin
de un sensor magntico. La esfera rota alrededor de su eje longitudinal,
manteniendo su posicin en tanto la muestra permanece fluida gracias
al campo magntico. Cuando la fibrina se forma, el cogulo captura la
esfera y la mueve de su posicin original. A medida que se mueve fuera
del rango de deteccin del sensor, se interrumpe el circuito y el
cronmetro se detiene.

los mtodos mecnicos, no presentan


interferencias debido a caractersticas fsicas
de las muestras como lipemia o hemlisis. Sin
embargo, poseen el inconveniente de que no
se puede realizar un seguimiento grfico de la
cintica de formacin del cogulo. En suma a
esto, presentan problemas para la deteccin
del punto final cuando las muestras son
pobres en fibringeno.

Principio ptico.
Su fundamento se basa en el hecho de que la
formacin del cogulo modifica la densidad
ptica del plasma. Cuando un haz de luz
atraviesa un plasma, una cierta cantidad de luz
llega al fotodetector ubicado al otro lado de la
muestra. Cuando ocurre la formacin del
cogulo de fibrina, la luz es dispersada. Cuando
la disminucin de luz que alcanza al detector
iguala un valor determinado, el cronometro se
detiene.

BFT II
El analizador BFT II es un
coagulmetro de dos canales
diseado para laboratorios con
volmenes bajos de trabajo.
Aplica las ventajas de los principios
opto-mecnicos para la deteccin de
cogulo y permite analizar con
exactitud las muestras de los
pacientes. Los dos canales de
medicin permiten realizar
determinaciones simultneas de
Tiempo deProtrombina (TP), Tiempo
de Tromboplastina Parcial Activada
(TTPa) y Fibringeno (Fbg).

los mtodos pticos, posibilitan el seguimiento de


la cintica de formacin del cogulo, pero son
susceptibles a la interferencia debida a ictericia,
lipemia, bilirrubinemia y elevada concentracin
de protenas en algunos casos. Adems, en
algunos sistemas existen problemas en la
deteccin del punto final cuando se usan
reactivos completamente transparentes

Principio nefelmetrico.
Estos sistemas usan un diodo emisor de luz a una
determinada longitud de onda, generalmente mayor a
600 nm. Cuando la luz encuentra un cogulo de fibrina,
es dispersada. Dependiendo de cada sistema particular,
se mide la luz dispersada en un ngulo definido, 90 u
180 grados respecto del paso ptico, o se registra el
cambio producido en la luz transmitida. El cronmetro
se detiene cuando la cantidad de luz dispersada
alcanza un nivel determinado. La diferencia entre este
registro respecto al previo a la formacin del cogulo es
proporcional a la cantidad de fibrina formada.

Principio cromognico.
Se basa en el uso de una sustancia capaz de generar
una coloracin especfica, denominada cromforo. La
sustancia ms difundida es la p-nitroanilina (p-NA). La
reaccin emplea un sustrato sinttico unido a la p-NA
en una unin cuya secuencia se asemeja a la del sitio
de accin del factor o protena que se desea
determinar. Como resultado de la accin del factor en
estudio se libera p-NA que es detectado
fotomtricamente. El cambio de densidad ptica es
directamente proporcional a la cantidad de p-NA
liberada y en consecuencia a la cantidad de protena a
determinar presente en la muestra.

Sistema Sysmex CA-1500


Diseado para laboratorios que procesan
volmenes medios, el sistema
Sysmex CA-1500 lleva a cabo pruebas
de coagulacin, cromognicas e
inmunolgicas, incluyendo la prueba de
Dmero D. Se caracteriza por los anlisis
de dilucin mltiple (MDA) para la
deteccin de inhibidores durante las
pruebas de factores e identificacin
precisa de muestras.
manipulacin y seleccin de lmite de
control o reglas de Westgard
completas para control de calidad.

Principio inmunolgico.
Se basa en reacciones antgeno-anticuerpo en donde uno de los
reactivos consiste en micropartculas de ltex recubiertas con
anticuerpos especficos dirigidos contra los analitos que se desean
medir. Cuando estas micropartculas se encuentran con el analito
presente en la muestra, se forman puentes entre las mismas y
comienzan a aglutinarse.
A medida que el dimetro de estos agregados se incrementa e
iguala a la longitud de onda del rayo de luz monocromtica
incidente, aumenta tambin la cantidad de luz absorbida. Este
incremento es proporcional al tamao de los agregados antgenoanticuerpo, que a su vez es proporcional al nivel de antgeno en la
muestra, el cual es luego interpolado en una curva de calibracin.

La posibilidad de disponer de
mtodos cromognicos e
inmunolgicos permite la
incorporacin de nuevos ensayos
para los cuales no es aplicable la
deteccin del cogulo. Adems, estos
ensayos logran una mayor precisin
respecto a los ensayos
cogulomtricos.