CRESCIMENTO MICROBIANO
Os microrganismos so, entre os seres vivos, os mais versteis e
diversificados em suas exigncias nutricionais
O cultivo de microrganismos requer meios de cultura apropriados.
Meios de cultura so preparaes de nutrientes utilizados para o
crescimento de microrganismos
Requerimentos nutricionais das clulas
Todo organismo precisa encontrar em seu ambiente, todas as
substncias necessrias para a gerao de energia e
biossntese celular.
Nutrientes: So todos os elementos qumicos utilizados pelo
microrganismos, para seu crescimento. No laboratrio os
microrganismos crescem em um meio de cultura que fornece
todos os nutrientes essenciais, em soluo, para o crescimento
microbiano.
O ciclo do nitrognio
Elemento
% de peso
seco
Fonte
Funo
Carbono
50
Oxignio
20
Nitrogni
o
14
Hidrogni
o
Fsforo
Enxofre
Potssio
Sais de potssio
Magnsio
0.5
Sais de magnsio
Clcio
0.5
Sais de clcio
Sais de ferro
Ferro
0.2
Fatores de crescimento
Um organismo pode necessitar de pequenas quantidades de
certos compostos orgnicos para seu crescimento, pelo fato delas
serem substncias essenciais que no podem ser sintetizadas pelo
organismo a partir de nutrientes disponveis. Estes compostos so
chamados de fatores de crescimento
Fatores de crescimento so organizados em trs categorias:
1.purinas e pirimidinas: requeridas para a sntese de cidos
nuclicos (DNA e RNA)
2. aminocidos: necessrios para a sntese de protenas
3. vitaminas: necessrias como coenzimas e grupos funcionais de
certas enzimas
Vitamina
Coenzima
Funo
p-Aminobenzoic
acid (PABA)
Folic acid
Tetrahydrofolate
Biotin
Biotin
Lipoic acid
Lipoamide
Mercaptoethanesulfonic acid
Coenzyme M
Nicotinic acid
Pantothenic acid
Pyridoxine (B6)
Pyridoxal phosphate
Transamination, deamination,
decarboxylation and racemation of amino
acids
Riboflavin (B2)
Oxidoreduction reactions
Thiamine (B1)
Vitamin B12
Vitamin K
Fonte de energia
Fonte de
carbono
Exemplos
Fotoautotrficos
Luz
CO2
Cianobactria, algumas
bactrias prpuras e verdes
Fotoheterotrficos
Luz
Quimioautotrficos ou
Litotrficos
(Litoautotrficos)
Quimioheterotrficos
Compostos inorgnicos,
ex. H2, NH3, NO2, H2S
Composto
s
orgnicos
CO2
Composto
s
orgnicos
Compostos orgnicos
Quantidade
Funo do componente
Sacarose
10.0 g
K2HPO4
2.5 g
Tampo; fonte de P e K
KH2PO4
2.5 g
Tampo; fonte de P e K
(NH4)2HPO4
1.0 g
Tampo; fonte de N e P
MgSO4 7H2O
0.20 g
Fonte de S e Mg++
FeSO4 7H2O
0.01 g
Fonte de Fe++
MnSO4 7H2O
0.007 g
Fonte de Mn++
gua
985 ml
pH 7.0
Tabela. Meio definido (tambm um meio enriquecido) para o crescimento de Thiobacillus thiooxidans,
uma bactria litoautotrfica.
Component
Quantidade
Funo do componente
NH4Cl
0.52 g
Fonte de N
KH2PO4
0.28 g
Fonte de P e K
MgSO4 7H2O
0.25 g
Fonte de S e Mg++
CaCl2 2H2O
0.07 g
Fonte de Ca++
Enxofre
1.56 g
Fonte de energia
CO2
5%*
Fonte de C
gua
1000 ml
pH 3.0
* Meio aerado intermitantemente com ar contendo 5% de CO 2.
Quantidade
Funo do componente
Extrato de carne
1.5 g
Extrato de levedura
3.0 g
Peptona
6.0 g
Fonte de aminocidos, N, S, e P
Glicose
1.0 g
gar
15.0 g
guar
1000 ml
pH 6.6
Quantidade
Funo do componente
cidos casimino
7.5 g
Fonte de aminocidos, N, S e P
Extrato de levedura
10.0 g
Citrato trissdico
3.0 g
Fonte de energia e C
KCl
2.0 g
Fonte deK+
MgSO4 7 H2O
20.0 g
FeCl2
0.023 g
Fonte de Fe++
NaCl
250 g
gua
1000 ml
pH 7.4
Uso pretendido
Princpios de uso
gar MacConkey
gar desoxicolato
As
colnias
(fermentadoras
vermelhas.
gar feniletanol
gar columbia
CNA
de
coliformes
de lactose) so
Figure. Taxa de crescimento vs temperatura para cinco classes de procariotos. A maioria dos procariotoes
iro crescer em temperaturas em torno de 30 graus. As curvas exibem trs pontos cardinais: mnimo, timo e
mximo para o crescimento.
Figura. MEV de uma espcie de Bacillus termoflico isolado de uma pilha de composto orgnico a 55 o C
Tabela. Termos usados para descrever microrganismos em relao aos requerimentos de temperatura de
crescimento.
Mnimo
timo
Mximo
Comentrio
Psicrfilo
Abaixo
de 0
10-15
Abaixo de 20
Psicrotrfico
15-30
Acima de 25
mesfilo
10-15
30-40
Abaixo de 45
Termfilo
45
50-85
Acima de 100
(ebulio da gua)
Bactria
Mnimo
timo
Mximo
Listeria monocytogenes
30-37
45
Vibrio marinus
15
30
Pseudomonas maltophilia
35
41
Thiobacillus novellus
25-30
42
Staphylococcus aureus
10
30-37
45
Escherichia coli
10
37
45
Clostridium kluyveri
19
35
37
Streptococcus pyogenes
20
37
40
Streptococcus pneumoniae
25
37
42
Bacillus flavothermus
30
60
72
Thermus aquaticus
40
70-72
79
Methanococcus jannaschii
60
85
90
Sulfolobus acidocaldarius
70
75-85
90
Pyrobacterium brockii
80
102-105
115
Mnima
tima
Mxima
pH timo
Sulfolobus
55
75-85
87
2-3
Desulfurococcus
60
85
93
Methanothermus
60
83
88
6-7
Pyrodictium
82
105
113
Methanopyrus
85
100
110
Aerbico
Anaerbico
Aerbio obrigatrio
Cresce
Microaerofilo
Cresce em nveis no
to altos
Anaerbio obrigatrio
No cresce
Efeito do O2
No
cresce
No
cresce
Crescimen
to txico
Cresce
Cresce
Cresce
Cresce
No necessrio, no utilizado
Grupo
Superxido
dismutase
Catalase
Peroxidase
pH Mnimo
pH timo
pH Mximo
Thiobacillus thiooxidans
0.5
2.0-2.8
4.0-6.0
Sulfolobus acidocaldarius
1.0
2.0-3.0
5.0
Bacillus acidocaldarius
2.0
4.0
6.0
Zymomonas lindneri
3.5
5.5-6.0
7.5
Lactobacillus acidophilus
4.0-4.6
5.8-6.6
6.8
Staphylococcus aureus
4.2
7.0-7.5
9.3
Escherichia coli
4.4
6.0-7.0
9.0
Clostridium sporogenes
5.0-5.8
6.0-7.6
8.5-9.0
Erwinia caratovora
5.6
7.1
9.3
Pseudomonas aeruginosa
5.6
6.6-7.0
8.0
Thiobacillus novellus
5.7
7.0
9.0
Streptococcus pneumoniae
6.5
7.8
8.3
Nitrobacter sp
6.6
7.6-8.6
10.0
Caulobacter
1.00
Spirillum
1.00
Pseudomonas
.91
Salmonella/E. coli
.91
Lactobacillus
.90
Bacillus
.90
Staphylococcus
.85
Halococcus
.75
Application
Comments
Enumeration of bacteria in
milk or cellular vaccines
Enumeration of bacteria in
milk, foods, soil, water,
laboratory cultures, etc.
Turbidity measurement
Measurement of total N or
protein
Estimations of large
numbers of bacteria in
clear liquid media and
broths
Measurement of total cell
yield from very dense
cultures
Measurement of
Biochemical activity e.g. O2
uptake CO2 production,
ATP production, etc.
Microbiological assays
Meio
Tempo de gerao
(minutos)
Escherichia coli
Glicose-sais
17
Bacillus megaterium
Sacarose-sais
25
Streptococcus lactis
Leite
26
Streptococcus lactis
Caldo lactosado
48
Staphylococcus
aureus
27-30
Lactobacillus
acidophilus
Leite
66-87
Rhizobium japonicum
Manitol-sais-extrato
de levedura
344-461
Mycobacterium
tuberculosis
Sinttico
792-932
Treponema pallidum
Rabbit testes
1980