UNIVERSIDAD

TCNICA DE
MANABI
FACULTA DE CIENCIAS DE LA SALUD
CARRERA LABORATORIO CLINICO

catedra: BIOLOGIA MOLECULAR II

Docente: Dra. Mayra Parraga
Aula: 2do NIVEL Paralelo A
Perid acad. Oct. 2015-Feb 2016

TEMA:
Hibridacin de cidos
nucleicos.
Sondas de anticuerpo
para protenas.
Integrantes:

Yadira Arana Z.
Alexandra Santana
Rosa Guanoluisa R
Vinicio Cedeo M.
Liz Castro P
Natacha Lpez A.
Jessica Fernndez
Kevin Zambrano V.

P
U
R
G
4
#

PALABRAS
CLAVES:
Hibridacin

antigenos

Inmunoprecipitaci
n

Sondas

Fragmentos de
ADN

Genoma Humano

ADN clonado

Placas de fago

GLOSARIO:
transferencia Western:

es una tcnica analtica usada para

detectarprotenasespecficas en una muestra determinada Mediante
unaelectroforesis en gelse separan las protenas

Inmunoprecipitacin:

Este mtodo detecta interaccin entre

protenas endgenas sin marcar), de modo que tiene la misma fiabilidad
que la coinmunoprecipitacin, aunque depende tambin de la
disponibilidad de anticuerpos adecuados.

Hibridacin: Lahibridacindecidos nucleicos es un proceso por el

cual se combinan dos cadenas de cidos nucleicos antiparalelas y con
secuencias de bases complementarias en una nica molcula de doble
cadena, que toma la estructura de doble hlice, donde las bases
nitrogenadas quedan ocultas en el interior.

ADN clonado:

son un conjunto de mtodos experimentales

utilizados enbiologa molecularque se utilizan para ensamblar
molculas de ADN y lograr su copiado dentro deorganismos
receptores.n un experimento convencional de clonado molecular, el
ADN que se desea clonar se obtiene del organismo objeto del trabajo,
luego se lo trata con enzimas en un tubo de ensayo para producir
fragmentos ms pequeos de ADN.

Hibridacin de cidos
nucleicos.

La clave para la deteccion de

secuencias especificas de cidos
nucleicos es el apareamiento de
bases entre hebras
complementarias de ARN o ADN

Las hebras complementarias de

ADN se separan
(desnaturalizacin) dando
molculas de cadenas simple

Si dichas hebras desnaturalizadas

de ADN se incuban en
condiciones adecuadas (65c), re
naturalizan para formar
molculas de doble cadena por
apareamiento complementario de
bases un proceso denominado
hibridacin de cidos
nucleicos.

Como se ha descrito
anteriormente, la hibridacin ente
cebadores y ADN molde
proporciona la especificidad a la
ampliacin por PCR

El ADN clonado es marcado con

nucletidos radioactivos o con
nucletidos modificados que
puede detectarse por
fluorescencia o
quimioluminiscencia.

Este ADN marcado es marcado es

despus empleado como sonda
para la hibridacin con
secuencias de ADN o ARN
complementario, que se son
detectadas mediante
radioactividad, fluorescencia o
luminiscencia de los hbridos de
doble cadena resultantes

EL primer paso en el aislamiento

tanto de ADN genmico o de
clones de ADNc es
frecuentemente la preparacin
de bibliotecas de ADN
recombinante- colecciones de
clones que contienen todas las
secuencias genmicas o de ARN
m de un tipo celular concreto
.Por ejemplo, una biblioteca de
ADN humano genmico puede
prepararse clonando fragmentos
aleatorios de ADN de unas 15kb
en un vector A

Microarrays de ADN

SONDAS DE ANTICUERPOS PARA

PROTENAS

Los anticuerpos son

protenas sintetizadas
por determinadas
clulas del sistema
inmune (linfocitos B)
que reaccionan con
molculas que el
organismo husped ha
reconocido como
exgenas(antgenos).

La variacin da un
resultado de
linfocitos
Genes distintos
Codificantes de
anticuerpo (se
generan mediante
inoculacin de una
protena animal)

Responden a
distintos antgenos

Proporciona un reactante inmunolgico de alta

especifidad.

Natacha

Une
a
muchas
molculas
del
detergentes, que desnaturaliza y da a la
protena
una
carga resultante negativa. Bajo estas
circunstancias,
todas
las
protenas
migran hacia el electrodo positivo
estando
sus
tasas
de
migracin
nicamente determinadas (como el
acido
nucleicos).
El anticuerpo unido al filtro puede ser
determinado de varias maneras, como la
quimioluminiscencia, identificando de
este modo la protena contra la cual esta
dirigido
el
anticuerpo.
En
la
inmunoprecipitacion los anticuerpos son
utilizados para aislar las protenas
contra las que reaccionan. Por ejemplo,
las
clulas
son
incubadas
con

 El inhibidor de la ribonucleasa en
forma de herradura forma una
interaccin protena-protena con
la protena de la propia
ribonucleasa. Los contactos de las
dos protenas se muestran como
manchas coloreadas