Os testes sorolgicos so assim chamados porque

buscam detectar a presena de anticorpos existentes

no soro, produzidos pelo indivduo contra um antgeno especfico. Por exemplo: um indivduo que
tenha sido infectado com o Trypanossoma cruzi, vai
apresentar no seu soro, anticorpos contra este parasita estes anticorpos podem ento ser detectados
por um teste sorolgico, o que poder confirmar,
no caso, ser o referido indivduo um portador
da Doena de Chagas.
Por extenso, a deteco de
um antgeno tambm se enquadra neste tipo de teste.

Veja a grande utilidade dos

testes sorolgicos. Eles so correntemente
usados para:
Definio da suspeita clnica
Diferenciao de fases da doena
Diagnstico de doena congnita
Triagem sorolgica em banco de sangue
Seleo de doadores e receptores de rgos para transplante
Prognstico da doena
Critrios de cura
Avaliao / monitoramento da teraputica
Diferenciao da imunidade naturalmente adquirida ou artificialmente
induzida
Estabelecimento da prevalncia da doena
Verificao de erradicao da doena
Verificao de reintroduo de novos casos em reas consolidadas

Um teste sorolgico pode ser qualitativo,

semi-quantitativo ou quantitativo:
- qualitativo,

se os seus resultados informam apenas se

houve ou no reao / deteco (positivo ou negativo).
Veja um laudo imaginrio:
Teste deteco por ELISA de anticorpos IgM contra rubola
Resultado: positivo

- semi-quantitativo, se a amostra testada (soro) foi diluda

a maior diluio a apresentar reao o seu ttulo.
Veja um laudo imaginrio:
Teste deteco por imunofluorescncia de anticorpos IgG contra o T. cruzi
Resultado: positivo at a diluio de 1:320

- quantitativo, se capaz de informar a quantidade absoluta

do material detectado.
Veja um laudo imaginrio:
Teste deteco por ELISA de anticorpos IgM contra o T. gondii
Resultado: 63 UI/ml

A placa abaixo apresenta o resultado de um teste ELISA.

Observe os poos com soros controle positivo,
controle negativo e o cut-off (ponto de
corte). Note que as cores so nitidamente diferentes. Esta placa
ser lida por um fotocolormetro, que informar os valores de densidade tica. Todos os outros poos contem soros que esto sendo
testados. Todos aqueles que apresentarem resultados abaixo do
cut-off sero considerados negativos, enquanto que os que mostrarem valores maiores, sero positivos.

Cont. negativo
Cut-off
Cont.
positivo

Trata-se portanto de um teste qualitativo

Agora veja um teste semi-quantitativo, (hemaglutinao passiva):

diluies seriadas dos soros testes
de 1: 2 a .................. 1:1024

controle positivo
controle negativo

Soros
testes

Veja que na primeira fileira (de cima para baixo), a reao foi positiva at a
diluio de 1:32 . J na segunda fileira o resultado foi negativo em todas as
diluies.
O resultado do primeiro soro teste acima referido : reagente at a
diluio de 1:32 (ou ttulo:1:32). O segundo soro teste no reagente.

Um teste quantitativo fornece resultados precisos, com valores

absolutos. Estes valores podem ser expressos em massa por volume
(por exemplo, mg/ml) ou em unidades internacionais tambm por
volume (por exemplo, UI/ml).
Voc aprender adiante que estes valores so encontrados por interpolao do valor da anlise obtido com o soro teste (por exemplo,
o valor de densidade tica) em curvas construdas com valores padres.
Veja:
Ordenada:
valores obtidos pelo
instrumento de medida
(por exemplo, D.O.)

valores basais

variao
linear

plat

Abscissa: valores padres conhecidos (por exemplo, mg/ml.)

Voc tambm aprender que a interpolao para a dosagem dos soros testes s
pode ser feita para valores que se encaixem na zona de variao linear, vista acima.

A segura interpretao dos testes

sorolgicos depende de algumas
caractersticas e parmetros que
o definem, como por exemplo:
- A sua reprodutibilidade
- A sua validade
- A sua especificidade
- A sua sensibilidade
- O seu valor preditivo

O teste, quando semi-quantitativo ou

quantitativo, deve ter um valor conhecido,
acima do qual seja considerado positivo e
abaixo do qual seja negativo.
-este valor o seu ponto de corte (cut-off)

importante tambm ter em

mente o objetivo de sua utilizao,
por exemplo,
- se para diagnstico
- se para triagem

A seguir voc ser apresentado aos

significados e quando for o caso,
s maneiras de calcular os parmetros
mencionados.

REPRODUTIBILIDADE = confiabilidade, fidedignidade, ou preciso

Capacidade de obter resultados com valores muito prximos entre si, quando
analisadas uma mesma amostra em um mesmo ou em diferentes ensaios.

Reprodutibilidade termo usado para testes qualitativos.

Preciso - testes quantitativos (determina-se o coeficiente de variao).

Reprodutibilidade (%) = Nmero de resultados concordantes X 100

Nmero total de resultados

Testes quantitativos:

cv = s
X

cv- coeficiente de variao

s= desvio padro

X = mdia dos resultados

VALIDADE = acuidade, acurcia ou exatido

Grau em que o exame apropriado para medir o verdadeiro valor

daquilo que medido, observado ou interpretado. Capacidade de
produzir valores muito prximos aos obtidos num ensaio de
referncia (padro ouro).
O clculo feito pela expresso:
Nmero de resultados corretos X 100
Nmero total de resultados

SENSIBILIDADE a capacidade de detectar amostras verdadeiramente

positivas. , portanto, a relao entre:
S=

AP
X 100
AP + FN

ESPECIFICIDADE a capacidade em detectar amostras verdadeiramente

negativas. O seu valor obtido pela expresso:
E=

AN
X 100
AN + FP
________________________
AP = amostras verdadeiramente positivas
AN = amostras verdadeiramente negativas
FP = amostras falso-positivas
FN = amostras falso-negativas
Um teste ser mais sensvel quando apresentar menos resultados falsonegativos, e mais especfico quando apresentar menos resultados falsopositivos.

VALOR PREDITIVO

Valor preditivo positivo (VPP) - probabilidade de que um resultado

positivo ser verdadeiramente positivo.

Valor preditivo negativo (VPN) - probabilidade de que um resultado

negativo ser verdadeiramente negativo .
Veja as expresses para VPP e VPN
VPP =

AP
X 100
AP + FP

VPN =

AN
X 100
FN + AN

Os valores preditivos de um teste variam de acordo com a

prevalncia da doena ou infeco.
PREVALNCIA corresponde ao nmero total de casos de uma doena ou
infeco numa determinada populao, num perodo de tempo.

PONTO DE CORTE PARA DELIMITAR RESULTADOS POSITIVOS

O ponto de corte para um teste sorolgico (cut off) ou limiar de reatividade,
o valor que define o limite entre um teste negativo e um teste positivo. A
definio do ponto de corte leva em conta a distribuio das frequncias dos
resultados observados na populao, bem como os valores requeridos para
a especificidade e a sensibilidade do teste em questo. Veja os grficos
abaixo:

A curva ROC ( receiver operating curve ), representada abaixo, tem sido

bastante utilizada para definio de valores de cut-off. Veja abaixo,
como exemplo, a curva ROC de um teste ELISA (ELISA BHI), desenvolvido pelo Laboratrio de Imunologia. Neste caso, o cut-off foi
determinado em 0,25, pois tal valor combina os melhores percentuais de
sensibilidade e especificidade requeridos para o teste.

Curva ROC do ELISA BHI

Sensibilidade (%)

0,25
100

0,2

0,17

10

20

0,15

0,1

0,075

0,3

80
0,5

0,4

60

40

0,5

20

0
0

30

40

50

60

1 - Especificidade (%)

70

80

90

100

UTILIZAO DOS TESTES SOROLGICOS

A maior ou menor sensibilidade e especificidade de um teste
sorolgico depende de qual a sua finalidade.
- Para diagnstico - necessrio a utilizao de testes mais especficos.
Nestes casos, importante que sejam evitados os testes falso-positivos.
- Para triagem em Banco de Sangue (ou outras finalidades similares)
os testes so usados com fins preventivos, ou seja, a funo prevenir a
contaminao do receptor. Aqui busca-se evitar os testes falso-negativos (a
repetio de um teste com resultado falso-positivo custa pouco, entretanto, a
disseminao da doena em consequncia de um resultado falso-negativo, tem que
ser impedida a todo custo).

FIM