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Vrus Chikungunya

CICLOS DE TRANSMISSO

Homem - artrpodo - homem

e.g. Dengue, Chikungunya, Zika, Febre amarela urbana.


Reservatrio pode ser ou o homem ou o vetor artrpodo.
Pode haver transmisso transovariana.

Animal - artrpodo - homem


e.g. Encefalites equinas Leste e Oeste, Febre amarela silvtica.
O reservatrio um animal.
O vrus mantido na natureza em um ciclo de transmisso Emvolvendo o vetor
artpodo e um animal. O homem se infecta incidentalmente.

Ambos ciclos podem ocorrer com alguns arbovrus, como a Febre amarela.

HOMEM-ARTRPODOHOMEM

ANIMAL-ARTRPODOHOMEM

VETORES ARTRPODOS
Mosquitos
Chikungunya, Encefalite japonesa, Oeste do Nilo, Dengue, Febre amarela,
Encefalites St. Louis, Equinas Leste, Oeste, Venezuelana.

Carrapatos
Febre da Crimia-Congo.

Sandflies (mosquito plvora)


Febre da sandlfly siciliana, Febre do Vale Rift.

EXEMPLOS DE VETORES
ARTRPODOS

Aedes Aegyti

Culex Mosquito

Alguns Carrapatos

Phlebotomneo (Sandfly,
mosquito plvora)

RESERVATRIOS ANIMAIS
Em muitos casos, o reservatrio verdadeiro no conhecido. os
seguintes animais podem ser reservatrios:
Aves

Encefalites Japonesa, St Louis, Oeste do Nilo,


Equinas Leste, Oeste

Sunos

Encefalite Japonesa

Macacos

Febre amarela, Zika

Roedores

Encef. Venezuelana, Russian Spring-Summer

DOENAS ASSOCIADAS
Febre e eritema - usualmente inespecfico, lembrando
influenza, rubola, ou infeces por enterovrus.

Encefalites

Febre hemorrgicas

DIAGNSTICO
Sorologia - comumente usada para o diagnstico de arboviroses.
Cultivo - em camundongos ou vrias

linhagens de clulas

podem ser usadas, incluindo clulas de mosquitos. Raramente


usado, pois podem ser perigosos (patgenos de cat. 3 ou 4).
Testes de deteco direta: deteco de antgenos e cidos
nuclicos possveis.

Flavivrus - Organizao do vrion


Nucleocapsdeo

Bicamada
Lipdica

prM

30-50nm
RNA fita simples (+)

3 prots estruturais

7 prots no- estruturais

Vrus da Dengue

Cada sorotipo confere imunidade sorotipo especfica permanente

e contra

outros sorotipos, por curto perodo

Todos os sorotipos podem causar doena grave e fatal

Variao gentica dentro dos sorotipos (Gentipos)

Alguns gentipos parecem ser mais virulentos e com maior potencial epidmico

Novas infeces

com outro

sorotipo, entre 3 -15 mses aps a primeira

infeco podem levar a dengue hemorrgico por desencadeamento de processo


de hipersensibilidade.

Replicao dos Vrus Dengue


(moncitos, macrfagos, linfcitos B, clulas endoteliais e dendrticas

ENDOCITOSE

ssRNA(+)
genmico

Nucleocapsdeo
liberado no
citoplasma
ADSORO

Helicase + RNA
polimerase RNAdependente &
Cofatores

DESNUDAMENTO
Protenas
No-estruturais

Diminuio do pH

ssRNA(+)
poliprotena

Fuso da membrana
do vrus
Prot. E sofre
mudana
conformacional

TRADUO
Mediada pelo CAP

Proteases virais
e celulares

Vrus Clula
hospedeira
via
receptor
celular

Prognies de
ssRNA (+)

Sntese de molde
de ssRNA (-)

Protenas
Estruturais

MONTAGEM

MORFOGNESE
VIRAL

CITOPLASMA

Ocorre no
RER

CITOPLASMA

do
nucleocapsdeo

LIBERAO
Via secretora
do Complexo
de Golgi

Vetores Hospedeiros

Mosquitos do gnero Aedes.

Nas
Amricas: Aedes aegypti .
Na sia:
Aedes albopictus.

Aedes aegypti

Aedes albopictus

Aedes aegypti

O vrus Dengue transmitido por fmeas do mosquito


infectado

Principalmente se alimenta durante o dia

Possui hbitos domsticos

Coloca os ovos e gera larvas preferencialmente em


recipientes artificiais.

Manifestaes
Clnicas

Manifestaes do Dengue
Infeco por Dengue
Assintomtica
Febre Indiferenciada

Sintomtica
Dengue Clssica
(DC)

com manifestaes sem manifestaes


hemorrgicas
hemorrgicas

Febre do Dengue
Hemorrgico (FDH)

Com choque
Sem
Choque (SCD)
(OMS,1997)

Manifestaes Clnicas do
Febre
Dengue Clssico (DC)
Prostrao
Cefalia
Dor retro-orbital
Artralgia e mialgia
Nuseas/vmito
Anorexia
Rash
Manifestaes hemorrgicas

Rash

Dengue clssica - manifestaes

99% das pessoas apresentam febre durante cerca de sete dias com
incio abrupto.
60% tm dor de cabea frontal severa, dores nas articulaes e
msculos.
50% tm dor atrs dos olhos (retro-orbital);
50% tm prostao, indisposio, perda de apetite, nusea e vmitos.
25% tm manchas vermelhas no trax e braos.
IMPORTANTE: A Dengue se diferencia de resfriados e gripes por no
apresentar sintomas respiratrios.

Manifestaes Hemorrgicas do Dengue


Clssico (DC)

Hemorragias na pele (ex: petquias)

Gengivorragia

Sangramento nasal

Sangramento gastrointestinal

Hematria

Fluxo menstrual aumentado

Petquias

Febre Hemorrgica do Dengue


(FHD)
O paciente dever apresentar os seguintes critrios:

Febre ou histria recente de febre de at 7 dias

Trombocitopenia: plaquetas 100,000/mm3

Manifestaes hemorrgicas

Evidncias de permeabilidade vascular

Confirmao laboratorial durante perodos epidmicos ou

Efuso pleural

PEI = A/B
x 100

interepidmicos

B
A

(OMS,1997)

Sndrome do Choque
da Dengue (SCD)

Ch

oque: ocorre entre o 3 e 7 dia de doena, precedido por um ou mais sinais de


alerta.

De

corrente do aumento da permeabilidade vascular seguido de hemoconcentrao e


falncia circulatria.

de curta durao e pode levar ao bito em 12 a 24 horas ou recuperao rpida


aps terapia anti-choque apropriada.

Resposta Imune nas


Infeces por Dengue
Infeco Primria

Infeco Secundria

(incio dos sintomas)

(incio dos sintomas)

veis de anticorpos e antgeno

IgG
Vrus

Vrus

IgM
NS1

NS1

Tempo

IgM

Diagnstico Laboratorial
Dengue

Coleta e Processamento de Amostras para o


Diagnstico Laboratorial do Dengue

Tipo de
Espcime
Soro de fase
aguda
Soro de fase
convalescente

Momento da
Coleta
De 0-5 dias aps o
incio dos sintomas
Entre os dias 6-21 aps o
incio dos sintomas

Tipo de
Anlise
Isolamento viral, mtodos
sorolgicos, moleculares e
captura de NS1

Mtodos sorolgicos

Diagnstico Laboratorial - Dengue

Isolamento Viral

Inoculao intratorxica de mosquitos Toxorhynchites

Deteco de cido nuclico viral

Cultura de clulas de mosquito A. albopictus clone C6/36

RT-PCR, PCR em tempo real

Sorologia

Mac-ELISA

IgG-ELISA

Captura de antgeno NS1

Kits comerciais

Histopatologia e Imunohistoqumica

Isolamento Viral
Cultura de clulas de mosquito A.
albopictus clone C6/36

(Igarashi, 1978)

Inoculao intratorxica de mosquitos


Toxorhynchites

Imunofluorescncia Indireta Anticorpos


Monoclonais tipo-especficos (Gubler et

al., 1984)

Sorologia

Captura de anticorpos IgM (MACELISA)

1 Captura IgM

Substrato

2. Bloqueio
3. Soro

Anticorpo
Secundrio

4. Antgeno

Antgeno
de dengue

5. Anticorpo
Secundrio
6. Substrato

Soro Paciente
IgM

Anti-IgM
Placa

Sorologia

Deteco de anticorpos IgG (IgG-

ELISA)

Substrato

Anticorpo
Secundrio
Anti-IgG
Soro
paciente IgG
Antgeno Dengue

Fluido
hiperimune

Placa

RT- PCR para a tipagem dos vrus Dengue


(Lanciotti et al, 1992)

Segunda etapa de amplificao Nested PCR

Transcrio reversa e primeira etapa de


amplificao
CAPSIDEO

DENV
RNA

D1

5
3
D1

cDNA

prM

D2

1 hora/ 42C

3
5

511 pb
produto

TS2

Amplicon DENV-1 (482 bp)


Amplicon DENV-4 (392 bp)

30sec/ 94C
1 min / 55C
2 min / 72C

5
3
produto
511 pb

Amplicon DENV-3 (290 bp)


35 ciclos
Amplicon DENV-2 (119 bp)

3
5

TS3

TS4

TS1

Epidemiologia
Dengue
Segundo a OMS:

~50 milhes de pessoas contraem a


doena
500 mil so hospitalizadas (90% crianas)
24 mil bitos

Cerca de 2,5 3 bilhes de pessoas


vivem em risco de contrair a doena nos
pases onde o dengue endmico.

Mudana na distribuio dos sorotipos


de dengue nos ltimos 30 anos

Distribuio global dos


sorotipos de vrus dengue,
1970

Mackenzie et al., 2004

Distribuio global dos


sorotipos de vrus dengue,

Casos de Dengue Clssico nas Amricas,


19802009*

1998
741,865
BRASIL
(535,388)
~73%

2002
1.015.420
BRASIL
(780,644)
~80%

2008
865.697
BRASIL
(734.384)
~85%
2007
630,000
BRASIL
(560,000)
~90%
2009*
480.909
BRASIL
(332.083)
~69%

http://www.paho.org/English/AD/DPC/CD/dengue.htm

* At a 25 Semana Epidemiolgica

Vacina contra a dengue?

Dificuldades para o desenvolvimento de uma

vacina
Vacinas:

somente em 2016/2017

Falta de um modelo animal adequado que reproduza as formas clnicas da


infeco
Presena de 4 sorotipos
Questionamentos quanto eficcia e custo das vacinas oferecidas

Maior Desafio:
Desenvolver vacina qudrupla combinada em uma nica (tetravalente)
Induza proteo permanente contra os 4 sorotipos
No pode induzir SDH se o vacinado for exposto!
No deve causar reaes de hipersensibilidade.

FEBRE AMARELA (1)


oeste da frica e Amrica do Sul

formas: urbana e silvtica.

silvtica: mosquitos Haemagogus spp.

urbana: mosquito Aedes aegypti.

Regies:

Duas

Forma

Forma

clnicos: calafrios, febre e dor de cabea, mialgia generalizada e sinais gastrointestinais.

infeces assintomticas ou doena febril indiferenciada.

Sinais

Alguns:

Vrus Da Febre Amarela


Famlia Flaviviridae, Gnero Flavivirus

um arbovirus prottipo da famlia


Transmitidos por mosquitos
Possui um s sorotipo

Organizao da Partcula e
Genoma Virais
Nucleocapsdeo
M

Bicamada
Lipdica

prM

30-50nm
RNA fita simples (+)

3 prots estruturais

7 prots no- estruturais

Replicao Vrus da Febre Amarela


(moncitos, macrfagos, linfcitos B, clulas endoteliais e dendrticas

ENDOCITOSE

ssRNA(+)
genmico

Nucleocapsdeo
liberado no
citoplasma
ADSORO

Helicase + RNA
polimerase RNAdependente &
Cofatores

DESNUDAMENTO
Protenas
No-estruturais

Diminuio do pH

ssRNA(+)
poliprotena

Fuso da membrana
do vrus
Prot. E sofre
mudana
conformacional

TRADUO
Mediada pelo CAP

Proteases virais
e celulares

Vrus Clula
hospedeira
via
receptor
celular

Prognies de
ssRNA (+)

Sntese de molde
de ssRNA (-)

Protenas
Estruturais

MONTAGEM

MORFOGNESE
VIRAL

CITOPLASMA

Ocorre no
RER

CITOPLASMA

do
nucleocapsdeo

LIBERAO
Via secretora
do Complexo
de Golgi

PATOGENIA FEBRE
AMARELA
Vrus replica em linfonodos e
infecta clulas dendrticas=>
Vai ao fgado e infecta
hepatcitos (provavelmente via clulas de Kupfer, indiretamente), o que leva a uma degradao
eosinoflica destas e liberao de citocinas.
Massas necrticas
(corpsculos de Councilman) surgem no citoplasma dos hepatcitos.

Em caso de progresso fatal,


ocorre choque cardiovascular e falha mltipla de rgos, com nvel muito elevado de citocinas (citokine
storm)

Fonte: Wikipedia

FEBRE AMARELA (2)


dias
mente infectados=> bradicardia

Sinais:
PI 3 a 4

Severa

50%

ictercia
hemorragias.

dos pacientes => doena fatal: hemorragias


oliguria
hipotenso.

FEBRE AMARELA SINAIS

Febre Amarela - reas de risco

Febre Amarela - reas de risco

Diagnstico:
Em reas endmicas, cada caso deve ser considerado suspeito
pois pode contribuir para o alastramento da doena (6-10 dias
depois de deixar a rea infectada com sinais de febre, dor,
nusea e vmitos).
Vrus somente pode ser detectado at 6-10 dias do incio.
Confirmao por RT-PCR em busca do genoma viral.
Isolamento viral fcil: a partir de plasma em clulas BHK,
Vero, LLCMK2 e outras
Sorolgico: ELISA para IgM especfica.
aumento no ttulo de IgG especfica 4 vezes

A ORIGEM DO VRUS VACINAL


AMOSTRA 17D PARA FEBRE AMARELA
V
acinao: vacina produzida em embrio de galinha, com a amostra Asibi 17D. Indicao:
pessoas em reas endmicas ou viajantes.

1
935: a amostra Asibi ( do nome do paciente do qual o vrus foi isolado) foi adaptada em
tecidos de embrio de camundongo. Aps 17 passagens, o vrus, denominado 17D, foi
cultivado por 58 passagens em tecidos de embrio de galinha e at a passagem 114, em
tecidos de embrio denervados.

E
nto, Theiler e Smith injetaram o vrus via IC em macacos mostrando uma acentuada
reduo no vscero- e neurotropismo.

O
vrus foi cultivado ainda at as passagens 227 e 229 estes forma usados para imunizar 8
voluntrios humanos.

Os resultados foram satisfatrios no houve reaes


semanas.

adversas e todos soroconverteram em 2

Paciente Asibi, Dakar, 1935

Paul Hermann Mller (1899-1965


1939

P Mller

DDT (dichloro-dipheynl-tricholoethane)
discovery of the insecticidal qualities and use of DDT for the
control of vector-borne diseases (yellow fever, dengue,

vrus Chikungunya

Infeco pelo vrus Chikungunya

vrus Chikungunya epidemiologia

Os primeiros casos no Brasil => 2010 apresentaram os sintomas depois de


uma viagem Indonsia. A terceira paciente, uma paulista de 25 anos,
esteve na ndia.
Em junho de 2014 => seis casos no Brasil de soldados que retornaram de
uma misso no Haiti.
Em 15 de outubro de 2014, foram confirmados 337 casos no pas, sendo
274 apenas na cidade de Feira de Santana, na Bahia.
Em 2015 ocorreu um surto na Amrica do sul nos primeiros quatro meses
deste ano com estimativa de 10 mil casos e 113 mortes.
Estima-se que 2.500 desses casos foram no Brasil, a maioria dos casos na
Bahia, Minas Gerais e So Paulo.

CHIKUNGUNYA

Infeco pelo vrus Chikungunya

CHIKUNGUNYA AGUDA
SINAIS
Febre
Poliartralgias (pode haver inchao)
Dor de cabea
Dores musculares
Dor nas costas
Nusea
Vmito
Eritema
Poliartrite
Conjuntivite
Calafrios

Em crianas=> tende a ser mais grave.

CHIKUNGUNYA
CRNICA SINAIS
Poliartralgia => pode durar
semanas a anos.
Dores articulares at 2 anos
95% dos adultos so assintomticos
Porm, a maioria se torna
desabilitado por meses ou semanas => destreza reduzida, perda de mobilidade, reaes atrasadas.
Dor articular recorrente ocorre em
3040% dos infectados.
Complicaes raras: miocardite,
meningoencefalite, hemorragias leves, uveite, retinite.

Morte rara.
However, increases in crude death
rates have been reported during the 20042008 epidemics. More than half of patients who suffer from severe chikungunya
fever are over 65 years old, and more than 33% of them die. Most of these adults have underlying medical conditions and
appear to be more likely to suffer complications.

CHIKUNGUNYA - SINAIS

CHIKUNGUNYA SINAIS

Dengue x Chikungunya

Chikungunya
evoluo da infeco no hospedeiro

Chikungunya diagnstico

- Isolamento viral
- RT-PCR
- Sorologia (IgM e IgG)
- Coletar sangue na primeira semana
- IgM + ou aumento de ttulos IgG 4 x
entre amostras coletadas nas fases
aguda e convalescente

Site recomendado:
http://www.paho.org/hq/index.php?option=com_content&view=article&id=9722:chikungunya-photo-story&Itemid=41027&lang=en

Vrus Zika - mais um Flavivrus !

O primeiro caso bem documentado do vrus Zika foi em


1964, comeando com uma leve dor de cabea que
progrediu para um exantema mculo-papular, febre e dor
nas costas.
Com dois dias, a erupo comeou a desaparecer, e com 3 dias,
a febre desapareceu permanecendo apenas a erupo.
Sinais
-dor de cabea leve
-exantema maculopapular,
-febre,
-mal estar,
-conjuntivite,
-artralgia.

Zikavrus distribuio at 2007

Zikavrus distribuio at 2015

Vrus Zika
Transmisso
transmitida por mosquitos e foi isolado de um nmero de
espcies do gnero Aedes - Aedes aegypti, Aedes
africanus, Aedes apicoargenteus, Aedes furcifer, Aedes
luteocephalus e Aedes vitattus.
Patogenia
perodo de incubao extrnseca (em mosquitos) ~10 dias.
Os hospedeiros vertebrados=> macacos e humanos.
Acredita-se que infecte clulas dendrticas prximas ao lugar de
inoculao => ndulos linfticos => na corrente sangunea.
Tratamento/preveno
No h vacina.
Tratamento sintomtico:
anti-inflamatrios no-esterides
analgsicos no-saliclicos.
Diagnstico diferencial de Zoster: ateno!

Infeco por vrus Zika