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Analysis of an Outbreak of Salmonella enteritidis

by Repetitive-Sequence-Based PCR and


Pulsed-Field Gel Electrophoresis

Abdullah Kilic, Orhan Bedir, Nafiz Kocak , Belkis Levent , Can Polat Eyigun , Omer
Faruk Tekbas , Levent Gorenek , Orhan Baylan and A. Celal Basustaoglu

Inter Med 49: 31-36, 2010

Presentación elaborada por: QC Miguel Ángel Ortiz Gil


Objetivo
 Investigar un brote de origen alimentario asociado
a huevos contaminados por Salmonella enteritidis
en una unidad militar utilizando electroforesis en
campo pulsado (PFGE) y PCR basado en secuencias
repetidas (rep-PCR).
Introducción
 S. enteritidis se adquieren por la ingestión de
alimentos contaminados, como huevos, leche,
verduras y carne o a través del contacto con
los animales

 S. enteritidis causó 29,762 enfermedades,


2,904 hospitalizaciones, y 79 muertes en los
Estados Unidos de 1985 a 1999.

 En EUA, un total de 121 brotes de salmonela se


presentaron en 2006, causando más de 3.300
enfermedades de origen alimentario.

 Las especies más comunes son S. enteritidis y


S. typhimurium.
Descripción del brote
 Lugar: Unidad militar en Isparta, Turquía.
 Universo: 6,418 soldados.

 Brote: En 1 de las 2 cocinas se origina el


brote cuando los soldados enferman
después de consumir albóndigas, sopa de
lentejas , puré de papa con huevo. (2008)

 Los enfermos desarrollaron diarrea,


además de por lo menos uno de los
síntomas gastrointestinales como fiebre
(>38.5), vómitos, náuseas, dolor de cabeza
o dolor abdominal.
Material y métodos
Bacteriemia Gastroenteritis Ambiental

Muestras de heces Alimentos y


Hemocultivos (n= 445 soldados, de 6 hospitales) muestras ambientales
(artículos de cocina,
Se inocularon en caldo de selenito e fregaderos, grifos )
incubaron de 6 a 8 hrs.

Subcultivos en agar Salmonella Shigella y agar MacConkey,


por un máximo de 3 dias, 37°C.

Identificación con sistema automatizado con pruebas bioquímicas y


Serotipificación por aglutinación con antisueros (Kauffmann-White).
S. enteritidis

Sistema automatizado para susceptibilidad


antimicrobiana de S. enteritidis (BD Phoenix )

PFGE Rep -PCR

Análisis
Resultados
Resultados
Resultados
PFGE
Simbología:

SM= Marcador de peso


molecular (kb).
1= aislamiento clínico.
2= aislamiento en comida.
3= Aislamiento en sangre.
4 al 11= aislamientos en
heces.
12= aislamiento en comida.
Resultados Rep - PCR Simbología:

1= aislamiento en alimento
2= aislamiento en sangre
3 al 10= aislamiento en heces
Conclusiones
 Un reporte que describe el origen y la transmisión
de un brote de S. enteritidis en Turquía, por
métodos microbiológicos y moleculares.

 Los autores sugirieron que los alimentos deben ser


bien cocidos para evitar brote de S. enteritidis.

 Se recomienda el uso de Rep – PCR para el estudio


de brotes.
Conclusiones

Rep - PCR PFGE


Ventajas Desventajas Ventajas Desventajas
•Análisis en 4•Poder de•Estándar de oro. •Complejo y de
horas. discriminación y largo tiempo de
reproducibilidad •Alto poder derealización
•Fácil bajo discriminación y (3dias).
implementación. reproducibilidad
•Alto Costo
•Bajo costo

•Interpretación de
resultados es
sencilla