Enzimas

Ing. C. Mabel Luna

ENZIMAS
:
Son biomolculas orgnicas de naturaleza proteica cuya
funcin es aumentar la velocidad de las reacciones
bioqumicas que se producen en el organismo, actan por lo
tanto como catalizadores biolgicos.

Las cadenas de aminocidos de

las protenas estn estiradas o
adoptan alguna forma particular?
Las protenas tienen una estructura
tridimensional que se describe en funcin
de cuatro niveles jerrquicos de
organizacin

Estructura primaria
Estructura secundaria
Estructura terciaria
Estructura cuaternaria

La estructura primaria es la
disposicin lineal o secuencia de
aminocidos que constituyen la
cadena polipeptdica, est referida
al orden, la secuencia y el nmero
de aminocidos.

La estructura secundaria, resulta del

plegamiento peridico de la cadena de
aminocidos

Dicho plegamiento puede adoptar dos

disposiciones geomtricas:
alfa hlice espiralada
lmina beta plegada
La estructura secundaria se estabiliza
mediante enlaces por puentes de hidrgeno

 La estructura terciaria est dada por la disposicin

tridimensional de todos los restos de aminocidos.
Resulta de la interaccin entre aminocidos de
diferentes puntos de la estructura secundaria enrollada
como tambin globular
Su estructura se mantiene por enlaces S S o puentes
disulfuro que se producen entre los aminocidos
vecinos

Cuando dos o ms cadenas de

polipptidos se asocian para formar
una molcula de protena se da la
estructura cuaternaria.

Ejemplo de estructura de una enzima: la quimotripsina ,

una enzima digestiva que hidroliza protenas.
La estructura primaria de
esta enzima consta de 245
aminocidos.
La estructura cuaternaria de
consta de tres cadenas
polipeptdicas: a, b y c.
Los enlaces disulfuro unen
las cadenas a,b y c entre s.
Los aminocidos del Sitio
Activo son tres: His, Asp y
Ser.
De 245 aminocidos totales,
solamente los grupos R de
tres de ellos conforman el
sitio activo de esta enzima.

Clasificacin de la enzimas
1. Trivial: terminacin asa: tripsinasa, glucosidasa, lipasa.

(Lisozima)

2. De acuerdo a la Comit Internacionl de Qumica Pura y

Aplicada
EC 1. Oxidoreductasas: Catalizan reacciones de xidoreduccin.
EC 2. Transferasas: Transfieren grupos y pueden requerir
coenzimas.
EC 3. Hydrolasas: hidrlisis, clase especial de transferasas
donde el aceptor del grupo transferido es el agua.
EC 4. Liasas: lisis de sustratos, generan dobles enlaces.
EC 5. Isomerasas: cambios estructurales, reacciones de
isomerizacin.
EC 6. Ligasas (sintetasas): formacin de enlaces, juntan
moleculas.

Clasificacin de enzimas:
Grupos
1. Oxidorreductasas

2. Transferasas
grupos aldehidos
gupos acilos
grupos glucosilos
grupos fosfatos (kinasas)

3. Hidrolasas
Transforman polmeros en monmeros.
Actuan sobre:
enlace ster
enlace glucosdico
enlace peptdico
enlace C-N

4. Liasas
(Adicin a los dobles
enlaces)
Entre C y C
Entre C y O
Entre C y N

5. Isomerasas
(Reacciones de
isomerizacin)

6. Ligasas
(Formacin de enlaces,
con aporte de ATP)
Entre C y O
Entre C y S
Entre C y N
Entre C y C

Grupo 1: Oxidorreductasas
Nomenclatura del subgrupo en oxidorreductasas:
EC 1.1.x EC 1.2.x EC 1.3.x EC 1.4.x EC 1.5.x EC 1.6.x etc.

Deshidrogenasas
Oxidasas
Peroxidasas
Oxigenasas
Hidroxilasas
Reductasas

Aplicaciones: Ensayos de diagnostico clnico (glucosa oxidasa y colesterol oxidasa

Deslignificacin Bioblanqueamiento

Clasificacin y nomenclatura
Grupo 3: Hidrolasas
Clasificacin de las hidrolasas:
3.1.-.3.2.-.3.3.-.3.4.-.3.5.-.etc.

Esterasas (carboxilesterasas, fosfoesterasas, sulfoesterasas)

Glicosidasas
ter hidrolasas
Pptido hidrolasas
Acil anhdrido hidrolasas

Aplicaciones: Lipasas Sntesis de tensioactivos

Proteasas Fabrico de quesos
Glicosidasas Clarificacin de jugos; liberacin de aromas en los
vinos; aplicaciones textiles

Especificidad de las enzimas

La alta especificidad
se debe a que su
estructura terciaria le
permite formar
cavidades llamadas
sitios activos, lugar
donde se ubica el
sustrato durante el
proceso de catlisis.

Enzimas
Para que ocurra una reaccin, adems de contar con
energa de activacin, sta debe tener una orientacin
adecuada.
Las enzimas poseen un punto especfico de unin llamado
sitio activo, que permite la orientacin exacta, y un sitio
cataltico, que debilita enlaces existentes o facilita la
formacin de otros nuevos, segn corresponda.
Las enzimas son muy sensibles a cambios de factores
como pH, temperatura o concentracin de sustrato y
operan en mrgenes bastante estrechos.

sustrato
Complejo
enzima-sustrato

productos

Teoras de la Accin
odelo
de Llave y Cerradura (Emil Fischer)
Enzimtica

Substrato
y
enzima
se
acoplan
de
forma
estereospecfica, de la misma
manera que una llave se
ajusta a su cerradura.
Modelo aceptado durante
mucho
tiempo;
hoy
se
considera insuficiente al no
explicar algunos fenmenos
de la inhibicin enzimtica.

Modelo de Ajuste Inducido (Koshland)

Tanto la enzima como el

substrato
sufren
una
alteracin
en
su
estructura por el hecho
fsico de la unin.
Est mucho ms de
acuerdo con todos los
datos
experimentales
conocidos
hasta
el

Modelo espacial de la Quimotripsina

La enzima tiene un
aspecto
globular,
dado
por
el
plegamiento de las
subunidades a,b y
c.
El S.A se muestra
en naranja.
Esta enzima tiene
un solo S.A.
Las
enzimas
pueden tener un
S.A por subunidad.

Un acercamiento al sitio activo

En detalle pueden
verse los grupos
funcionales de la
enzima que toman
contacto con el
sustrato
de
la
reaccin

La velocidad de una reaccin

catalizada por una enzima es
siempre la misma?
No, depende de muchos factores entre los que se
cuentan:
Temperatura
pH
Concentracin del sustrato
Concentracin de la enzima
Presencia de agua

Temperatura
Cada enzima tiene una temperatura ptima en la cual su
actividad cataltica es mxima

pH
Cada enzima tiene un pH ptimo en el
cual la actividad enzimtica es mxima

Concentracin del sustrato

Desnaturalizacin de una Protena

Estado Nativo

Estado Desnaturalizado

Se llama desnaturalizacin de las protenas a la

prdida de las estructuras de orden superior
(secundaria, terciaria y cuaternaria), quedando la
cadena polipeptdica reducida a un polmero
estadstico sin ninguna estructura tridimensional fija

Cofactores enzimticos
Algunas enzimas necesitan para llevar a cabo su actividad cataltica de la
concurrencia de una o ms sustancias de naturaleza no proteica que reciben el
nombre de cofactores.
En ausencia de cofactor el enzima resulta catalticamente inactivo y recibe el nombre
de apoenzima; la combinacin de apoenzima y cofactor da el holoenzima
catalticamente activo. Existen dos tipos de cofactores enzimticos: los iones
metlicos y los coenzimas.

Coenzimas
Las coenzimas son pequeas molculas
orgnicas, que se unen a la enzima.
Las coenzimas colaboran en la reaccin
enzimtica recibiendo transitoriamente
algn grupo qumico: H+ , OH, CH3 .
La enzima sin la coenzima recibe el nombre
de APOENZIMA

El NAD es una coenzima aceptora de H

Sustrato
oxidado

Aproximadamente 1/3 enzimas

requiere algn in metlico
para catalizar

Algunas enzimas requieren metales para

mejorar su actividad

Inhibidor:
Efector que hace disminuir la actividad enzimtica, a travs de
interacciones con el centro activo u otros centros especficos
(alostricos).
Esta definicin excluye todos aquellos agentes que inactivan a
la enzima a travs de desnaturalizacin de la molcula enzimtica
De esta forma, habr dos tipos de inhibidores:
I. Isostricos: ejercen su accin sobre el centro activo
II. Alostricos: ejercen su accin sobre otra parte de la
molcula, causando un cambio conformacional con
repercusin negativa en la actividad enzimtica.

Los inhibidores isostricos pueden ser de dos tipos:

1. Inhibidor reversible: establece un equilibrio con la enzima libre,

con el complejo enzima-substrato o con ambos:
E+I

EI

ES + I

ESI

2. Inhibidor irreversible: modifica qumicamente a la enzima:

E+I

Inhibicin reversible
(a) El inhibidor se fija al centro activo de la enzima libre,
impidiendo la fijacin del substrato: Inhibicin Competitiva
(b) El inhibidor se fija a la enzima independientemente de que lo
haga o no el substrato; el inhibidor, por tanto, no impide la
fijacin del substrato a la enzima, pero s impide la accin
cataltica: Inhibicin No Competitiva
(c) El inhibidor se fija nicamente al complejo enzima-substrato
una vez formado, impidindo la accin cataltica; este tipo
se conoce como Inhibicin Anticompetitiva

Inhibicin competitiva
Al aumentar la cantidad
de
SUSTRATO
el
inhibidor competitivo es
desplazado y se forma
producto

Inhibidor No Competitivo
Se une a un lugar diferente del sitio activo la enzima
Se une a la enzima libre y tambin al complejo enzimasustrato
Por accin del inhibidor disminuye la Vm pero el valor de
Km no se altera

Inhibidor Incompetitivo
Se une a un lugar diferente del sitio activo de la enzima
Se une slo al complejo enzima-sustrato
Los efectos que tiene: disminuye el valor de Km y
tambin el de Vmx

S
E

ES
ESI

E+P
Inhibicin
Anticompetitiva

El inhibidor slo puede fijarse al complejo ES;

el complejo ESI no es productivo

Inhibidores Irreversibles
Producen inactivacin permanente de la actividad
enzimtica
Se interfiere con el normal desarrollo de una reaccin o
va metablica
Ejemplos:p-cloromercuribenzoato,yodoacetato,
iisopropilfluorfosfato

Algunos tipos de inhibidores irreversibles

1. Reactivos de grupos -SH

2. Organofosfricos
3. Ligandos de metales
4. Metales pesados

Enzimas alostricas
Las enzimas alostricas
presentan
estructura
cuaternaria.
Tienen diferentes sitios
activos, unen mas de
una molcula de sustrato
La unin del sustrato es
cooperativa
la curva de velocidad
presenta
una
forma
sigmoidal

Desnaturalizaci
n de la
ribonucleasa. En
general, la
desnaturalizacin
fuerte produce una
destruccin
permanente de la
Agentes
desnaturalizantes:
Se
molcula

distinguen agentes fsicos

(calor) y qumicos
(detergentes, disolventes
orgnicos, pH, fuerza
inica).

Algunas aplicaciones

Otros procesos biolgicos

Biognesis o biomineralizacin.

Es la formacin de minerales en suelos

a partir de sus componentes por accin
bacteriana
Biocorrosin.

Es la degradacin de metales y
materiales por accin bacteriana.

Drenajes cidos de minas

En el futuro..
Es claro que la amplia variedad de reacciones que
pueden catalizar las enzimas prev un panorama
prometedor para la biocatlisis en el sector de la
sntesis orgnica, calculndose que en los prximos
aos su impacto en este sector industrial se ver
incrementado de manera significativa.
Sin embargo, un factor clave a considerar en la
consolidacin
de
los
biocatalizadores
como
herramientas de sntesis, es un aumento considerable
en su eficiencia y disponibilidad. Para esto, el uso de las
herramientas modernas de la biologa molecular y de la
ingeniera de protenas deber jugar un papel
preponderante en la obtencin de nuevos y ms
eficientes biocatalizadores.