USO DE BACTRIAS NO CONTROLE DE

FITONEMATIDES

ALAN GUSTAVO
COMIRAN
NELSON PEDROSO DA
SILVA JUNIOR
WERIQ TEODORO DA
SILVA

TIPOS DE INTERAES
O impacto das bactrias sobre os nematides pode ser
decorrente do parasitismo, da produo de antibiticos,
toxinas e enzimas, da interferncia no processo de
reconhecimento planta-hospedeiro, da induo de
resistncia e/ou proporcionando o desenvolvimento
saudvel da planta (Mankau 1980, Stirling 1991,
Siddiqui & Mahmood 1999, Tian et al. 2007).

EXEMPLOS:
BACILLUS THURIGIENSIS
Protenas Cry que acarreta a lise do intestino.

B.SUBTILIS
Interfere no ciclo reprodutivo dos nematides atravs de endotoxinas
Transformao de exsudatos radiculares em subprodutos
Produzem fitorreguladores

B.FIRMUS
Secretam toxinas que alteram a estrutura externa da postura de
nematides, inibindo a ecloso dos mesmos

PASTEURIA PENETRANS
Parasita

Figura 1 - Fotomicrografias de fmeas de Pratylenchus zeae e P.

brachyurus infectadas por Pasteuria thornei: a) pseudoceloma de P.
zeae
preenchido com endsporos da bactria (setas); b) regio anterior de
P. brachyurus exibindo endsporos aderidos cutcula (barras das

ANTAGONISMO DE BACTRIAS ENDOFTICAS

FORMAO DE GALHAS E REPRODUO
DE MELOIDOGYNE JAVANICA EM TOMATEIRO.

ROSEMEIRE L. NAVES; VICENTE P. CAMPOS & RICARDO M. SOUZA

Parte da tese do primeiro autor apresentada UFLA para obteno de grau de Doutor
Departamento de Fitopatologia, Universidade Federal de Lavras, Caixa Postal 37, 37200-ooo,
lavras MG E-mail: rose@ufla.br
Recebido para publicao em 24/05/2000. Aceito em 09/03/2002.

BACTRIAS ENDOFTICAS
Capacidade de viver no interior dos tecidos das plantas.
- (Alteraes morfolgicas e fisiolgicas)
No causam competio com outros organismo.
- (Fungos e outras bactrias).
Podem ser usada no controle biolgico de nematides aps a
penetrao na raiz.
H EVIDNCIAS de que bactrias Endofticas possam contribuir para
o controle de nematides fitoparasitas, porm a eficcia do
antagonismo bacteriano seja limitado nesse caso.

OBJETIVO DO TRABALHO
Avaliar em casa de vegetao, o potencial de bactrias Endofticas
isoladas dos sistemas radiculares sadios de plantas de
Tomate (Lycopersicon esculentum Mill.).
Crotalria ( Crotalaria sp. L.).
Trigo ( triticum aestivum L.).
Milho (Zeas mays L.) .
Braquiria (Brachiaria spp. L.).
No controle biolgico de Meloidogyne, utilizando se mudas de
tomateiro.

MATERIAL E MTODOS
Bactrias Endofticas foram isoladas utilizando se o mtodo todo da
triturao de tecidos de plantas desinfestados superficialmente.
Razes foram cuidadosamente lavadas.
Transferidas para soluo fosfato potssio (PB).
Agitao por uma hora.
*Todo esse procedimento foi repetido 4 vezes.

DESINFESTAO DAS RAZES.

lcool 50% por 30 seg.
Hipoclorito de sdio 1% por 3 minutos.
Lavagem em PB por 3 minutos.
Desalojar bactrias das razes.
Bactrias transferidas em frascos soluo PB.
Banho de ultra som por 10 minutos.
processo repetido mais duas vezes.

TRITURAO
Soluo PB.
Banho de ultra som.
Tempo 10 minutos (desagregao).

AMOSTRAS FORAM PREPARADAS.

Preparadas 5 placas.
Foram mantidas em temperatura de 28C.
Por 48 horas.

MICROBIOLIZAO.
Processo.
Semente tomate + desinfestao (hipoclorito de sdio 1%) + enxaguadas 3 vezes +
secadas em papel toalha.
Tratamento.
Imersas em soluo bacteriana 15 minutos + semeadas.
Aps 15 dias ovos de Meloidogyne javanica, foram adicionados.
Casa de vegetao
Blocos 40 x 2.
Aps 30 dias avaliados, altura de planta, peso de matria fresca do sistema
radicular, nmeros de galhas e de ovos por grama de raiz.

RESULTADO E DISCUSSO.
Todos isolados

18,79%

(n galhas/g)

COMPARADOS COM A TESTEMUNHA.

RAIZ
58,68%
Segundo Hallmann et al. Reduo 50% de galhas produzidas por Meloidogyne incgnita,
em plantas de pepino.

20,75%

64,87%

 Bactrias da rizosfera e do rizoplano, controle de

fitonematides Coimbra (1998).
Nmeros de galhas
20,75%.

45,09%.
Nmeros de ovos
40,32%

100%

INFLUNCIA DEBACILLUS SUBTILISNA ECLOSO,

ORIENTAO E INFECO DEHETERODERA GLYCINESEM SOJA

Fbio Fernando de Arajo:Engenheiro Agrnomo,

Doutorando em Proteo de Plantas,
(UNESP/Botucatu), Professor do Curso de Agronomia,
UNOESTE Presidente Prudente, SP.
Joo Flvio Veloso Silva:Engenheiro Agrnomo,
Doutor, EMBRAPA-CNPSo, CP 231, 86001-970.
Londrina, PR.
Ademir Srgio Ferreira de Arajo. Engenheiro
Agrnomo, Curso de Ps-Graduao em Microbiologia
Agrcola, ESALQ/USP, CP 96, 13400-000, Piracicaba,
SP.

RESUMO PRVIO
Bacillus subtilis
Heterodera glycines: Nematide do cisto
da soja
Casa de vegetaco e laboratrio
Cmara de ecloso
Exsudatos da semente de soja
Dependncia do heterodera
Inibio e migrao de larvas juvenis
Calda e p molhavel

OUTRAS BACTRIAS EXISTENTES

Bacillus megaterium, que reduziam a infeco de
nematides em beterraba

Bradyrhizobium japonicumeGlomus
fasciculatum) resultou em aumento da nodulao em
feijo-guandu (Cajanus cajan) e reduo da
multiplicao de nematide (Heteroderacajani)

METODOLOGIA
O isolado estirpe AP-3
Cultura Batata-dextrose (BD) durante sete dias a 25oC
agitao constante a 130rpm
concentrao final de 2,0. 108clulas/ml
P Molhvel (PM) a calda foi centrifugada (5000rpm) e o
precipitado misturado a caulinita e surfactantes com
posterior secagem em equipamento "spray-drier" para
concentrao final de 2,0.108clulas/g do produto.

Figura . Spray dryer.

Http://www.gea.com/global/en/productgroups/dryers_particle-processing-systems/spray-dryers/pilot_small-scalespray-dryers/index.jsp

TESTE DE INIBIO DO HETERODERA

GLYCINES
Foram utilizados vasos plsticos contendo 1,0kg de
mistura areia:solo (1:1v/v). Os vasos foram
acondicionados em casa de vegetao na qual foi
conduzido o experimento. Sementes de soja (Glycine
max) cv. BR-37 foram tratadas com a formulao PM
contendoB. subtilisnas dosagens de 1000g e 500g
para 50kg de semente correspondendo,
respectivamente, concentrao de 1,0.106e
5,0.105clulas/semente, seguindo-se a semeadura nos
vasos (uma semente/vaso).

TESTE DE INIBIO DO HETERODERA

GLYCINES
Adio da calda bacteriana diretamente no solo 30
minutos antes da semeadura. Nesse caso, foi
determinada uma concentrao em torno de
1,0.108clulas/g de solo. Aps onze dias da semeadura
foram introduzidos ovos de nematide (Heterodera
glycines), na concentrao de 4.000 ovos/vaso. Os
ovos foram adicionados atravs de um orifcio com 1cm
de dimetro no solo distante 2cm da haste da planta de
soja.

TESTE DE INIBIO DO HETERODERA

GLYCINES
Tratamentos controle
Desenvolvimento das plantas
Presena de cistos de nematide na rizosfera
Populao deBacillusna rizosfera.

Teste de inibio do heterodera glycines

O solo aderido s razes foi coletado e aps secagem
(45oC), foram retiradas amostras de 10g de solo seco
para diluio em 100mlde gua esterilizada. Aps
diluies sucessivas o material foi submetido a choque
trmico (70oC/10 minutos) visando selecionar as
bactrias formadoras de esporos. Das diluies 10-4e 105, foi retirado 0,1 mle foi espalhado em placa de Petri
contendo meio de cultivo BDA. As colnias formadas
foram contadas e caracterizadas como pertencentes ao
gneroBacillus.

 Teste de ecloso10g de sementes de soja cv. ( BR-37 ) foram desinfectados

superficialmente com hipoclorito de sdio e adicionados em recipiente com
100mlde gua deionizada estril. Em seguida o material foi incubado a 25 oC,
sob agitao constante e ausncia de luz. As sementes foram removidas aps
24 horas, e a soluo contendo os exsudatos foi esterilizada por filtrao atravs
de filtro Millipore 0,45mm. A soluo que continha os exsudatos foi diluda 100
vezes em gua estril, Cmaras plsticas medindo 10x10x3cm foram montadas
para avaliar a ecloso de nematides atravs da insero de peneira (10 mesh),
coberta com papel absorvente, dentro da cmara. No fundo da cmara foi
adicionada a soluo que continha os exsudatos de soja at cobrir totalmente o
papel absorvente sobre a peneira. Sobre o papel foi adicionado uma suspenso
com 8000 ovos deH. glycines. Aps sete dias, o nmero de juvenis eclodidos
na soluo contendo os exsudatos foi avaliado, sendo os mesmos em seguida
descartados. Os ovos restantes foram novamente incubados na cmara, sendo
realizada a mesma avaliao aps oito dias.

http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0103-84782002000200003

http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0103-84782002000200003

http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0103-84782002000200003

 Os resultados encontrados com o tratamento das

sementes de soja
comBacillussubtilissubtilisdemonstraram ter
havido uma reduo, significativa, em cerca de 70%, da
presena de cistos de nematides viveis nas razes das
plantas, quando se trataram as sementes com a
formulao PM na dosagem 1000g/50kg de semente.
No caso da adio direta deB. subtilisno solo (conc.
inicial de 1,0.107cels./g de solo), a reduo da presena
de cistos foi maior em cerca de 80% de controle

http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0103-84782002000200003
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ARAJO, F.F.Efeito deBacillusspp e seus metablitos na competitividade e na nodulao da soja (Glycine max[L.] Merrill)
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BACILLUS THURIGIENSIS NO CONTROLE DE

M.INCOGNITA NA CEVADA

Ravi Datt Sharma

18 Revista Nematologia Brasileira pg.79-84

MATERIAL E MTODOS
As culturas foram obtidas atravs de centrifugao com temperatura
entre 28-30C em frascos de 500ml contendo 100ml de sacarose.
Foram utilizadas as seguinte quantidades volumtricas a partir de
solues contendo 108 esporos/ml
Btt: Duas doses de 1,25ml
Bti: 1,25ml ; 2,5ml ; 5ml e 7,5ml
O Solo anteriormente era cultivado com pimenta e quiabo, altamente
infestado com M.Incognita, coletado na regio de Planaltina, Distrito
Federal. A propriedade fica a 6km da EMBRAPA CPAC.
O solo foi peneirado usando uma tela de 5mm e misturado antes de
encher tubos de pvc (7.5x2.0cm).

MATERIAL E MTODOS
Posto o solo nos tubos, foram feitos transplantes de
plntulas de cevada com trs dias aps a germinao
cv. PFC 8299 e simultaneamente as inoculaes.
Aps as inculaes foram aplicados 100ml de gua
destilada com o intuito de gera uma distribuio
uniforme do inculo.
Foram feitos controles para cada bioagente, cada
tratamento foi replicado cinco vezes com distribuio
aleatria.
Houve a aplicao de fertilizante(10-10-10) a cada 15
dias e rega diria.

MATERIAL E MTODOS
Avaliou-se a altura, peso e peso da raiz das plantas,
alm da populao final dos nematides no solo e nas
razes.
As dados das anlises estatsticas foram feitas usando
ANOVA e as comparaes com o teste de mltiplos
alcances de Duncans.

RESULTADOS E DISCUSSES

OBRIGADO