MICROBIOTA

DO
CORPO HUMANO

 INTRODUO
O corpo humano (10 trilhes de clulas) continuamente habitado por
vrios microrganismos diferentes, em sua maioria bactrias (100
trilhes) que, em condies normais e em um indivduo sadio, so
inofensivos e podem at ser benficos.
rgos e sistemas internos so estreis, incluindo o bao, o pncreas, o
fgado, a bexiga, o SNC e o sangue.
ORIGEM DA MICROBIOTA NORMAL
Recm-nascido sadio adquire sua microbiota normal a partir da
alimentao e do ambiente, incluindo outros seres humanos.
COLONIZAO DE REAS CORPORAIS (mecanismos de defesa)
Pele e mucosas. Ex: pH (5-6) descamao e ressecamento
Trato Respiratrio. Ex: Plos e produo de muco
Trato Intestinal. Ex: pH cido do estmago
Trato Genito-urinrio. Ex: pH da urina

 CONCEITO
Microbiota Normal
Grupo de microrganismos que colonizam, em freqncia varivel, uma ou mais
regies anatmicas de um hospedeiro saudvel sem produzir doenas.
Microbiota transitria
Consiste em microrganismos no patognicos ou potencialmente patognicos que
permanecem na pele ou mucosa por horas, dias ou semanas, provenientes do meio
externo, no provocando doena e no se estabelecendo em definitivo na superfcie.
Residente
Eles so residentes de um corpo saudvel e so ocupantes permanentes. Esses
microrganismos so encontrados com regularidade em determinada idade e rea da
superfcie, sendo perturbada, recompe-se com facilidade.
Patgenos oportunistas
Alguns organismos da microbiota normal podem ser patgenos oportunistas,
causam infeces se ocorrer danos teciduais em stios corpreos especficos ou se a
resistncia do corpo infeco diminuda.

MICROBIOTA NORMAL DO CORPO HUMANO (PELE)

Cocos Gram-positivos:
Staphylococcus aureus (comum)
Staphylococcus epidermidis (proeminente)
Streptococcus spp. (irregular) S.pyogenes
Bacilos Gram-positivos:
Corynebacterium spp. (++)
Propionibacterium acnes

MICROBIOTA NORMAL DO CORPO HUMANO (Conjuntiva)

Cocos Gram-positivos:
Staphylococcus aureus (irregular )
Staphylococcus epidermidis (comum)
Streptococcus spp.(irregular)
Bacilos Gram-positivos:
Corynebacterium spp. (comum)
Cocos Gram-negativos:
Moraxella e Neisseiria spp. (comum)
Haemophillus spp. (irregular)
Bastonetes Gram-negativos:
Escherichia coli (irregular)
Proteus mirabilis (irregular)

MICROBIOTA NORMAL DO CORPO HUMANO

(Boca e faringe)
Cocos Gram-positivos:
Staphylococcus aureus (comum)
Staphylococcus epidermidis (comum)
Streptococcus spp.(proeminente)
Enterococcus spp.(irregular)
Bacilos Gram-positivos:
Corynebacterium spp. (comum)
Cocos Gram-negativos:
Neisseria ssp. (comum)
Haemophillus spp. (irregular)
Bastonetes Gram-negativos:
Pseudomonas aeruginosa (irregular),
Escherichia coli (irregular)
Proteus mirabilis (irregular)

MICROBIOTA NORMAL DO CORPO HUMANO (INTESTINOS)

Bacilos Gram-negativos (principalmente Enterobactrias)
Escherichia coli (proeminente)
Proteus mirabilis (comum)
Pseudomonas aeruginosa (comum)
Bacilos Gram-positivos:
Corynebacterium spp. (comum)
Clostridium tetani (irregular)
Cocos Gram-positivos:
Staphylococcus aureus (proeminente)
Staphylococcus epidermidis (comum)

MICROBIOTA NORMAL DO CORPO HUMANO (VAGINA)

Cocos Gram-positivos:
Staphylococcus spp. (comum)
Streptococcus spp. (comum)
Enterococcus spp. (comum)
Bacilos Gram-positivos:
Lactobacilos (proeminente)
Bacilos Gram-negativos:
Escherichia coli
Klebsiella spp.
Proteus mirabilis,
Pseudomonas aeruginosa (comum)

MICROBIOTA NORMAL DO CORPO HUMANO (URETRA)

Cocos Gram-positivos:
Staphylococcus aureus (irregular)
Staphylococcus epidermidis (proeminente)
Streptococcus spp. (comum)
Bacilos Gram-positivos:
Corynebacterium spp. (comum)
Bacilos Gram-negativos:
Escherichia coli (comum)
Proteus mirabilis (comum)

Biossegurana em Microbiologia Clnica

Toda amostra biolgica deve ser considerada potencialmente
contaminada.
Sempre utilizar EPIs como jaleco, luvas de procedimentos e calados
fechados.
Limpar e descontaminar (cido fnico 2%, lcool 70% ou hipoclorito) as
superfcies de trabalho aps respingos e ao incio e final da rotina
laboratorial.
Trabalhar com o bico de Bunsen aceso e interposto entre o tcnico e o
material (clnico ou cultura).
No pipetar nenhum tipo de soluo ou material com a boca.
No reencapar agulhas e descartar material perfurocortantes em
recipiente apropriado.
Manter organizadas todas as reas de trabalho durante a aula e aps o
trmino da mesma.
Tirar o jaleco quando sair do setor e colocar em local designado.
Lavar as mos e/ou superfcie da pele imediatamente aps contato com
amostra biolgica, aps remover as luvas e ao completar qualquer
atividade.

MEIOS DE CULTURA
MEIO DE TRANSPORTE
O MEIO DE CULTURA uma mistura

de nutrientes (protenas, carboidratos

e
co-fatores)
necessrios
ao
crescimento in vitro microbiano. O
meio de cultura deve ainda atender s
necessidades especficas do grupo, da
famlia, do gnero ou da espcie que
se deseja cultivar.
Dentre as principais substncias que
os compem, temos:
gar-gar: agente gelificante que a
maioria dos microrganismos so
incapazes de degradar.
Carboidratos:
acares
(glicose,
lactose, sacarose e maltose) como
fonte
de
energia
para
os
microrganismos.
Protenas e aminocidos: auxiliam
como fatores de crescimento, ex:
peptona de carne e triptona.

Meio Stuart: Meio semi-slido que

impede
consideravelmente
a
multiplicao dos microrganismos pela
carncia de fonte de nitrognio e ao
mesmo
tempo
garante
a
sobrevivncia
atravs
de
sua
composio
nutritiva
at
serem
encaminhados
ao
setor
de
microbiologia.
gar Nutriente ou Nutritivo: Meio
slido relativamente simples, utilizado
na
manuteno
das
culturas
bacterianas por ex: cepas padro
ATCC American Type Culture
Collection.
Salina 0,85% estril: utilizada para
exames fresco de secrees
genitais.

MEIOS DE CULTURA PARA CRESCIMENTO E ISOLAMENTO

MICROBIOLGICO
gar Chocolate (AC)
Meio de cultura slido, rico e no seletivo, para o
crescimento da grande maioria das bactrias aerbias e
anaerbias facultativas.
Especfico para o crescimento de Neisseria spp e
Haemophilus spp.
Atmosfera de incubao: Anaerobiose facultativa.
gar Sangue (AS)
Meio de cultura slido, rico, no seletivo e diferencial para
hemlise.
Permite o crescimento da maioria das bactrias Gram
negativos e Gram positivos, alm de fungos
filamentosos (bolores) e leveduras, exceto
algumas espcies.
Atmosfera de incubao: Anaerobiose facultativa.
gar MacConkey (MC)
Meio de cultura slido, seletivo para bacilos Gram
negativos, e diferencial para a utilizao da lactose.
O cristal de violeta que compe o meio de cultura inibe o
crescimento
de
microrganismos
Gram
positivos
especialmente estafilococos e enterococos.
Atmosfera de incubao: Aerobiose.

Deficient)
gar Salmonella Shigella (SS)
Meio de cultura slido, seletivo para
bacilos Gram negativos principalmente
para
crescimento
de
colnias
caractersticas de Salmonella spp e
Shigella spp , em amostras de fezes,
alimentos e gua.
Diferencial para a utilizao de lactose
(colorao rsea)
produo de H2S (colorao negra).
Ateno: Outros bacilos entricos
Gram negativos tambm crescem no
meio SS.
Atmosfera de incubao: Aerobiose

Meio de cultura slido e no seletivo

Devido a sua composio deficiente em
eletrlitos inibe a formao do vu de
Proteus spp.
Diferencial para a utilizao de lactose.

Cepas lactose (+): Colnias de

colorao amarela.
Cepas lactose (-): Colnias inalteradas
quanto colorao (verde ou azul)
Atmosfera de incubao: Aerobiose.

Caldo Tetrationato (TETRA)

Meio de cultura lquido, constitudos
de sais de bile que inibem bactrias
Gram positivas e potencializam o
isolamento do gnero Salmonella.
Com a adio da soluo de iodo
ocorre
inibio
da
microbiota
intestinal de espcies fecais.
Atmosfera de incubao: Aerobiose.
Caldo BHI (Brain Heart Infusion)
Meio de cultura lquido derivado do
nutriente do crebro e corao,
peptona e dextrose.
Utilidades: Auxilia no crescimento e
motilidade bacteriana.
Atmosfera de incubao: Aerobiose

CALDO TETRA

BHI

Meios
Meios de
de Cultura
Cultura para
para identificao
identificao
microbiolgica
sero
mencionados
microbiolgica sero mencionados no
no
decorrer
decorrer das
das aulas...
aulas...

Meios para Teste de Susceptibilidade

aos antimicrobianos
gar Mueller Hinton
Meio de cultura slido e rico.
Para realizar teste de avaliao da
resistncia aos antimicrobianos pelos
mtodos de difuso em disco e fitas de E
Test
para
enterobactrias,
no
fermentadores e Staphylococcus spp.
Atmosfera de incubao: Aerobiose.

Mueller Hinton

gar Cromognico (Bactrias associadas infeces do trato

urinrio, Enterococcus spp, Candida spp)
Meio de cultura slido e seletivo para diferentes microrganismos .
So constitudos de substratos cromognicos que agem nos
microrganismos, formando radicais coloridos (colnias coloridas).
Atmosfera de incubao: Aerobiose.

CHROM. ITU

CHROM. ENTEROCOCO

CHROM. CANDIDA

TIPOS DE SEMEADURAS
Semeadura Qualitativa (esgotamento)
Utiliza-se ala microbiolgica de 0,01mL (10L).
Permite o isolamento de todas as colnias microbiolgicas diferentes, atravs
do decrescente gradiente de concentrao do inculo (amostra biolgica).
As amostras biolgicas semeadas de forma qualitativa so:

Lquidos biolgicos estreis;

Secrees (genitais, feridas cirrgicas...);
Escarro expectorado ou induzido;
Esperma;
Fezes (oriundas do caldo tetrationato).

Procedimento
Procedimento da
da semeadura
semeadura qualitativa:
qualitativa:

Homogeneizar
Homogeneizar a
a amostra
amostra biolgica;
biolgica;

Flambar
a
ala
microbiolgica
Flambar a ala microbiolgica (10L),
(10L), deixar
deixar esfriar;
esfriar;

Introduzir
ala
microbiolgica
10L
na
amostra
Introduzir ala microbiolgica 10L na amostra biolgica;
biolgica;

a
integridade
da
pelcula
de
amostra
Observar
Observar a integridade da pelcula de amostra formada
formada na
na
ala
at
descarregar
o
inculo
em
um
canto
da
placa;
ala at descarregar o inculo em um canto da placa;

Estriar
Estriar partindo
partindo da
da ponta
ponta da
da primeira
primeira semeadura;
semeadura;

o
procedimento
anterior
por
duas
Repetir
Repetir o procedimento anterior por duas vezes.
vezes.

No
No Esquecer
Esquecer
Semear seguindo
cultura
Semear
seguindo a
a seqncia
seqncia dos
dos meios
meios de
de cultura
mais
mais ricos
ricos para
para os
os mais
mais seletivos.
seletivos.

Semeadura Quantitativa
A semeadura quantitativa se baseia na semeadura de um
volume conhecido de material e a contagem do nmero de UFC
(Unidades Formadoras de Colnias) obtidas aps incubao.
Utiliza-se ala microbiolgica calibrada 0,001mL (1L) Tambm
denominada ala calibrada.
Amostras biolgicas semeadas por tcnica quantitativa:
Urina;
Lavado bronco alveolar;
Secreo traqueal.

Procedimento
Procedimento semeadura
semeadura quantitativa:
quantitativa:

Homogeneizar
Homogeneizar a
a amostra
amostra biolgica;
biolgica;

Flambar
a
ala
microbiolgica
Flambar a ala microbiolgica (1L),
(1L), deixar
deixar
esfriar;
esfriar;

Introduzir
Introduzir ala
ala microbiolgica
microbiolgica 1L
1L na
na amostra
amostra
biolgica;
biolgica;

Observar
Observar a
a integridade
integridade da
da pelcula
pelcula de
de amostra
amostra
formada
na
ala
at
descarregar
o
inculo
formada na ala at descarregar o inculo em
em
um
nico
sentido;
um nico sentido;

Estriar
Estriar o
o inculo
inculo inicial
inicial de
de forma
forma perpendicular
perpendicular
e
e paralelo
paralelo a
a este.
este.

Semeadura por Rolagem (Tcnica de Maki)

A tcnica de semeadura por rolagem utilizada para semear cateteres (5 cm);
Utiliza-se pina estril para realizao da semeadura;
Processa-se amostras com nmeros de colnias >15 UFC/placa.

Procedimento
Procedimento da
da semeadura:
semeadura:
Flambar
Flambar a
a pina
pina e
e deixar
deixar esfriar;
esfriar;
Retirar
o
cateter
do
tubo
Retirar o cateter do tubo estril
estril com
com auxlio
auxlio de
de uma
uma
pina
estril;
pina estril;

Colocar
Colocar na
na superfcie
superfcie do
do gar
gar sangue
sangue (AS);
(AS);

Com
Com o
o auxlio
auxlio da
da pina,
pina, rolar
rolar o
o cateter
cateter por
por toda
toda a
a
superfcie
do
meio
AS
para
frente
e
para
trs,
por
superfcie do meio AS para frente e para trs, por
duas
duas vezes.
vezes.

Como processar diferentes

amostras biolgicas nos
meios de cultura em
microbiologia?

Processamento de cultura de ponta de Cateter para exames microbiolgicos

Processamento de cultura de escarro para exames microbiolgicos

Processamento de cultura de fezes para exames microbiolgicos

Processamento de cultura de LBA para exames microbiolgicos

Processamento de cultura de lquidos biolgicos estreis (amnitico,

asctico, LCR, pleural, pericrdico e sinovial) para exames microbiolgicos

Processamento de cultura de sangue para exames microbiolgicos

Processamento de cultura de secrees em geral (feridas cirrgicas, lceras,

abcessos, genitais, oculares e exsudatos) para exames microbiolgicos

Processamento de cultura de Urina para exames microbiolgicos