ACTINOMICOSIS

SINONIMIA.
Quijada aterronada.
Quijada hinchada.
Mandbula de caucho.

 ETIOLOGA.
Actinomyces bovis
Es una bacteria alargada, gram positiva,
de crecimiento preferentemente
anaerobio. Tiene a formar filamentos
ramificados en los tejidos del husped.
Son catalasa-negativa
y no acidorresistente. Crece en
anaerobiosis en una atmsfera con el 5%
de bixido de carbono, a los 4-6 das de
incubacin a 37 C, en medios nutrivos
ricos (agar- sangre).

 Las colonias son pequeas y lisas.

Ocasionalmente tambin se aisl de
las
lesiones actinomicticas actinomyces
Israeli o actinobacillus lignieresii;
adems
de estos grmenes tambin se
aislaron, actinomyces pyogenes,
staphylococcus,
aureus y micrococos a los que se le
atribuyen efectos sinrgicos

 Actinomyces bovis: es un habitante

normal del tracto digestivo del
bovino.
Evidentemente el agente llega a los
tejidos profundos a travs de
heridas/ lesiones

 de la mucosa bucal y/o periostio

alveolar (durante el recambio de los
dientes) y luego por va linftica o
hemtica es trasladado a la esponja
de huesos vecinos.
Tambin puede ser causado por
lesiones de la cavidad oral por las
astillas de la madera o a travs de
una picadura por los bordes sin pulir
de la madera en los tablones laterales

 SIGNOS CLNICOS.
La infeccin procede de la mandbula o
del maxilar, como regla la actinomycosis
coloniza el cuerpo de la mandbula. Aqu
se encuentra una deformacin dura,
indolora, que aumenta paulatinamente
de tamao, sobre la cual la piel al
principio an es desplazable.
Con lisis progresiva de la cortical tambin
se ve afectada la piel.

 Se producen orificios alrededor de los

cuales se desarrolla el tpico granuloma
fungiforme, rojo oscuro y que evacua pus
espeso, cremoso, que rara vez tambin
contiene espculas de hueso.
Esto causan dolor y alteran la masticacin
del paciente; su ingestin se ve limitada y
pierde peso.
Incluso en los casos precoses, se puede
observar salivacin.

 Cuando se examinan la boca, en los

casos graves habr desviacin de los
dientes anclados en el hueso
afectado, en casos graves debido a
la desviacin, al cierre defectuoso o
la cada de los dientes. Intentos
torpes para masticar, y la cada del
alimento de la boca.
Puede ser evidente desgarro de la
mucosa oral o de la lengua.

 Los trayectos de drenaje dan salida a

cantidades abundantes de pus
serosa o mucopurulenta que debe
ser considerado infeccin para otras
vacas.
El proceso actinomictico pude
causar estenosis nasal y con ello
dificultad respiratoria

 Los huesos que ms afecta la

actinomicosis son: mandbula, el
maxilar y los huesos palatinos y de
los cornetes.
El maxilar y la mandbula, es
afectada a nivel de tercero y cuarto
molar

 PATOGENIA.
El agente llega a los tejido profundos
a travs de heridas/lesiones de la
mucosa y/o periostio alveolar.
Luego por va linftica o hemtica es
trasladado a la esponja de los huesos
vecinos.
La parte externa del hueso sufre de
periostitis osificante y en la parte
interna se produce una lisis hasta
llegar aun esqueleto esponjoso

 Se produce en los maxilares

osteomielitis rarefacciones como
caracterstica de la
lesin destaca su ndole
granulomatosos, que son los
llamados grnulos de azufre, que
parecen como arena o algn material
granular, tanto en el punto de origen
como en los rganos que invade

 La participacin de los maxilares

obstaculiza la presin y masticacin,
y cuando est afectado el aparato
digestivo se comprueba dificultad de
los movimientos del rumen y la
digestin, lo que provoca inanicin
parcial.
Son raras las localizaciones en otros
rganos, causadas sobre todo por
diseminacin hematgena o partir de
lesiones primarias.

 LESIONES.
La invasin del periostio o de la
medula sea por A. Bovis se
acompaa por una reaccin
inflamatoria, presencia de
osteoporosis.
Formacin de tejidos granulomatosos
o granulacin alrededor de la
periferia, y se produce necrosis por
licuefaccin en el centro

 Se presenta afeccin adicional al hueso por

ramificacin o formacin de tneles hasta
que se forme una masa granulomatosa que
es visible a simple vista.
El tejido osteoide afectado esta aumentado
de tamao como consecuencia de la
inflamacin osteoplstica y consiste de
delgadas trbeculas, tejidos
granulomatosos y reas cualecentes de
necrosis por licuefaccin que forma bolsas
de pus espeso y cremoso

 DIAGNOSTICO DIFERENCIAL.
Actinobacilosis.
Abscesos causados por bacterias
piognas.
Neoplasias sea.
En forma rara con coccidiomicosis

 DIAGNOSTICO.
l diagnostico se hace con base a los
signos clnicos, junto con el examen
microscpico de pus de los abscesos.
La observacin de los grnulos con tincin
de gram, revelar bastones pleomrficos
grampositivos y filamentos radiados del
centro del grnulo.
La confirmacin es hecha por el
aislamiento de A. Bovis de los grnulos o
tejidos

 TRATAMIENTO.
Para el caso de infecciones precozmente
iniciar tratamiento, con estreptomicina
11mg/kg tres veces al da durante 5 das.
Los casos bien arraigados pero que todava
no drenan, deben ser tratados durante un
tiempo de 14 a 30 das.
Las vacas con granulomas cutneos de gran
tamao y con drenaje requiere terapia de
larga duracin durante 1 o 2 meses con
estreptomicina y penicilina.

Inflamacin del hueso

Ndulo linftico de vaca. Inflamacin granulomatosa. Se

observan las drusas actinomicticas y un intenso
infiltrado inflamatorio

Ndulo linftico de vaca. Drusa actinomictica delimitada

por polimorfonucleares neutrfilos, macrfagos, clulas
gigantes y linfocitos

 Se describe el caso de un toro de lidia de 3 aos que presentaba un

gran abultamiento en el maxilar izquierdo. El animal tena una
manifiesta dificultad respiratoria con leve descarga nasal y sonidos
respiratorios anormales cuando realizaba ejercicio. Tras la realizacin
de la necropsia se observ que el abultamiento coincida con una
masa de 2510x15 cm que afectaba al maxilar. La masa se extenda
dorso- rostralmente de forma expansiva, llegando a reducir el interior
de la cavidad nasal y ocluyendo parcialmente su luz. Muestras de la
masa fueron tomadas para el estudio histopatolgico y
microbiolgico. El diagnstico definitivo fue de osteomielitis por
Actinomyces bovis. En este caso el diagnstico macroscpico e
histopatolgico aportan datos suficientes para un diagnstico de
actinomicosis bovina, aunque el diagnstico definitivo se realiz con
el aislamiento del A. bovis. En el toro de lidia ha sido descrita la
actinomicosis con anterioridad, considerada como un proceso a
diferenciar de actinobacilosis, abscesos inespecficos, tuberculosis y
procesos tumorales. El presente caso describe por primera vez el
proceso en un toro de lidia en el maxilar y hemos de incluirla en el
diagnstico diferencial de procesos que originen patologas de vas
respiratorias altas.

ACTINOBACILOSIS.

 SINONIMIA.
Lengua leosa.
Lengua de madera

 DEFINICIN:
Las Actinobacilosis forman parte del
grupo de enfermedades orales
conocidas como estomatitis que, si
bien, rara vez llegan a causar
muerte, ocasionan molestias en el
animal que le impiden comer de
manera normal produciendo prdidas
de tipo productivo
Afecta a tejidos blandos y ganglios

 ETIOLOGA.
Actinobacillus lignieresii.
Son bacilos pequeos inmviles no forman
esporas aerobios y anaerobios facultativos.
Las bacterias son pleomrfas gramnegativas,
que puede parecer desde cocobacilos hasta
bastones filamentosos largos.
Son parte de la flora normal de los tractos
respiratorio digestivo o genital de animales
sanos.

 EPIDEMIOLOGA.
Esta es una enfermedad de
distribucin mundial con
presentacin espordica.
Actinobacillus lignieresii es
susceptible a las influencias
ordinarias del ambiente y no vive de
ms cinco das en el heno o la paja

 Las lesiones de la mucosa oral o de

la piel que se contamina son A.
Lignieresii puede crear una infeccin
de los tejidos blandos que se
caracteriza por una celulitis inicial
que evoluciona hacia una infeccin
piogranulomatosa clsica que se
puede confundir con una neoplasia o
con la actinomicosis.

 Tambin son posibles los granulomas

del esfago, del prestomago y, a
veces, de otras localizaciones
viscerales.
La linfoadenitis, los abscesos de los
ganglios linfticos y los granulomas
infecciosos que se originan en los
ganglios linfticos pueden ir seguidos
de infecciones de los tejidos blandos
de la cavidad oral de la faringe.

 El material fibroso ha sido

incrementado como la causa de la
lesin de la mucosa que permiti la
infeccin oportunista de A.Lignieresii

 SIGNOS CLNICOS.
Se manifiesta al principio por babeo e
incapacidad de tomar o masticar el
alimento
adecuadamente.
A medida de que la lengua resulta ms
afectada, aumenta de tamao, es
dura,
inmvil y sobre sale de la boca.
Puede llegar a ulcerarse en los lados o
presentar ndulos.

 En las infecciones agudas existe fiebre pero

en los casos subagudos o crnicos con
frecuencia falta.
Los conductos salivales dilatados que
aparecen como rnulas se pueden observar
en situaciones ventral con respecto a la
lengua.
La anorexia es relativa o total porque la
lengua ha reducido la movilidad y puede ser
daada por los dientes si intenta masticar.

 PATOGENIA.
Para que ingrese A,lignieresii
necesita de la ruptura en la
integracin de la cubierta celular del
tubo digestivo para causar
enfermedad.
Tal ruptura ocurre cuando se
consume alimento grosero, duro y
fibroso.

 Por defectos de las instalaciones sufren

traumas repetidos por comer o abrevar,
padecen idnticas lesiones al chocar o
raspar contra las mismas rejas.
En grosamiento duro de la piel subcutneo
o de la lengua.
Despus se desarrollan abscesos los
cuales se abren y forman un granuloma
ulcerado y fistulizado, fungiforme,
supurante en su superficie y de fcil
sangrado

 En la lengua de madera crnica se

forman masas piogranulomatosas y
fibrosis.
Pero los piogranulomas se pueden
formar a lo largo de los vasos
linfticos y ganglios linfticos

 Incluso se le conoce como rosario a

los gramulomas que se ordenan a lo
largo del vaso linfticos.
Los granulomas son elevados, de
color rojo y de consistencia que varia
de carnosa a dura, y contiene
grnulos de azufre.

 Estos se pueden encontrar la cavidad

oral, en el esfago, en el
preestomago, o en otras
localizaciones viscerales.
Se han, encontrado granulomas
externos en las ventanas nasales, en
los prpados, en la cara, en la regin
faringe, en el cuello, en las
extremidades y en el abdomen.

 LESIONES.
Consistencia de masas piogranulomatosas
y fibrosis.
Granulomas con descarga de exudado
viscoso blanco ligeramente verdoso este
exudado puede contener grnulos blancos
grisceos, conocidos como Grnulos de
azufre incluso puede estar cubiertos por
costras o presentar sangre.
A diferencia actinomicosis estos grnulos
de azufre son mas pequeos y lobulados.

DIAGNOSTICO DIFERENCIAL.
Dermatitis nodosa.
Tuberculosis.
Neoplasias.
Actinomicosis.
Botriomicosis.
Granuloma parasitario o por cuerpos
extraos.

DIFFERENTIAL DIAGNOSIS
Foreign bodies in the mouth
Rabies
Esophageal obstruction
Tuberculosis
Cutaneous lymphosarcoma

 DIAGNOSTICO.
Se realiza mediante el aislamiento de
la bacteria causante de las lesiones
granulomatosas junto con los signos
clnicos y el examen fsico.
La muestra colectada por aspiracin
de las lesiones cerradas, transferidas
aun tubo estril y transportadas al
laboratorio en hielo.

 El material purulento de los abscesos

puede contener los grnulos de
azufre.
Son teidos con la tcnica de gram,
despus de que han sido macerados
en un solucin al 10 % de hidrxido
de sodio, revelan pequeos bastones
y cocobacilos gramnegativos,
examinados bajo inmersin en
alcohol

 TRATAMIENTO.
Es con yoduro sdico intravenoso es
un preparado sumamente irritable.
La dosis de 30g/450kg de peso
corporal, esta dosis se repite a
intervalos de 2 a 3
das hasta que aparezca el yodismo.

 Los signos de yodismo son:

Incluyen lagrimeo o seroso,
secrecin nasal sero mucoide,
y piel con escamas parecidas a la
caspa que aparece en la cara y en el
cuello del ganado vacuno tratado.

 Los agentes sulfamdicos y otros

antibiticos, como la tetraciclina o la
ampicilina, estreptomicina, tambin
es posible que sean tiles y pueden
usarse juntos con la terapia de yodo
en las infecciones graves de la
lengua con A. Lignieresii.

Lengua de palo, superficie nodular

Edema circunscrito submandibular

Lengua afectada , fibrosa. Granulos de

azufre

Actinobacilosis cutanea

perros

 SEGUIMOS.
SALE PUES.

Pleuroneumona
en cerdos

 La pleuroneumona porcina producida por

Actinobacillus pleuropneumoniae es una de
las enfermedades de mayor impacto asociadas
al Complejo respiratorio del cerdo. Una
evaluacin del efecto derivado del diagnstico
de la enfermedad evidenci recientemente que
las perdidas econmicas estaban en el orden de
los $ 53 millones anuales en Estados Unidos.

El significativo impacto econmico de la

pleuroneumona porcina, ha justificado la
intensa actividad de investigacin generada en
los ltimos aos en bsqueda de la
identificacin de los factores asociados a la
produccin de esta enfermedad.

 La informacin generada a travs de esos aos

de investigacin nos permite hoy en da conocer
al menos parcialmente:
Cuales son los factores de virulencia del agente
causal responsables de la produccin de la
enfermedad,
Algunas de las condiciones necesarias para que
la bacteria exprese sus factores de virulencia in
vitro y poder disear un inmungeno eficaz en la
proteccin contra la enfermedad.
La epidemiologa de la pleuroneumonia que
permita cortar los eslabones de la cadena de
transmisin de la infeccin y disear un plan
efectivo de erradicacin.

 Actinobacillus pleuropneumoniae es una

bacteria Gram negativa inmvil, no
formadora de esporas, coccobacilar, con
formas filamentosas que son raras en los
cultivos jvenes pero se hacen mas
evidentes despus de 24-96 horas de
incubacin. La presencia de capsula es mas
evidente en los cultivos jvenes menores
de 6 horas de incubacin (Nicolet, 1986).

 Es un agente nutricionalmente exigente que requiere el

suministro de una fuente de piridin nucleotido (factor
V) para el crecimiento in vitro, (Kilian, 1976; Kilian et al,
1978). A fin de garantizar este requerimiento, es
necesario suplementar el medio con Nicotinamida
Adenina Dinucleotido (NAD). Esa alta afinidad por el
NAD, explica la capacidad para competir eficazmente
por dicho compuesto in vivo, (O'Reilly and Niven,
1986).

Basado en el requerimiento de NAD, dos biotipos han

sido descritos: el biotipo 1 (que incluye a las cepas que
requieren de NAD) y el biotipo 2 (que comprende cepas
que no necesitan el suplemento de NAD para su
crecimiento in vitro).

 El aislamiento del microorganismo de animales

crnicamente infectados, usualmente se
complica por la contaminacin con otros agentes
de mas rpido crecimiento, (Nicolet, 1986). Para
evitar ese inconveniente, Pijoan et al, (1983),
desarrollaron una tcnica de dilucin que
permite incrementar la tasa de aislamiento a
partir de pulmones recolectados a nivel de la
sala de matanza.
Se ha obtenido una excelente tasa de
recuperacin de la bacteria a partir de muestras
de pulmn utilizando hisopos inmersos en caldo
BHI adicionado de NAD al 0.01%.

 Las toxinas ApxI, ApxII, Apx III, y Apx IV constituyen el

factor primario de virulencia de A. pleuropneumoniae.
Siendo las toxinas ApxI y ApxII producidas por todas las
cepas virulentas de esta bacteria.
Dichas toxinas son hemolticas, la mxima expresin
de ambas ocurre al final de la fase exponencial y al
principio de la fase estacionaria cuando son cultivadas
en medio de infusin cerebro corazn adicionado de
NAD.
Esta expresin contrasta con lo reportado con relacin
a la produccin de antgenos capsulares los cuales son
expresados en mayor concentracin al inicio de la fase
exponencial (alrededor de las 4 a 6 horas de incubacin
a 37 grados C) (Jarma y Regassa, 2004).

 Apx I a diferencia de las otras

toxinas, requiere de la adicin de Ca
al medio para su expresin in vitro

 SEROTIPOS DE A. pleuropneumoniae
La presencia de una capsula de naturaleza polisacrida constituye la base para la
tipificacin serologica de A. pleuropneumoniae, ya que los antgenos serotipo
especficos estn presentes en esta estructura, (Nicolet, 1986).
Quince serotipos de A. pleuropneumoniae han sido reconocidos hasta la
fecha. Las cepas de referencia de los serotipos 1 al 12 y el serotipo 15 son NAD
dependientes (biotipo 1), mientras que las pertenecientes a los serotipos 13 y 14
son NAD independientes (biotipo 2).
Las reacciones cruzadas entre los diferentes serotipos est asociada con la
existencia de antgenos comunes presentes a nivel del LPS y de protenas de la
membrana externa de la bacteria siendo las reacciones cruzadas mas intensas
aquellas relacionadas a las protenas de peso molecular de 52 Kd y de 78 kd, (Rapp
et al, 1986).
Recientemente, Gottschalk et al, (2000) han reportado la existencia de cepas que
reaccionan positivamente frente a antisueros de serotipos 1, 4 y 7. Estas cepas
poseen una capsula de polisacrido antigenicamente relacionada con el serotipo 1
as como tambin una cadena O-de LPS antigenicamente relacionada con los
serotipos 4 y 7, siendo el patrn de produccin de toxinas similar al de serotipo 7.
Pruebas de ELISA basadas en LPS identificarn estas cepas como serotipo 7
mientras que pruebas basadas en antgenos capsulares las identificarn como
pertenecientes al serotipo 1.

 La existencia de subtipos ha sido reportada para los serotipos 1

(Utrera 1991) y 5 (Nielsen, 1988). En el caso del serotipo 5 se ha
demostrado la presencia de antgenos capsulares de naturaleza
polisacrido especficas para cada subtipo A y B.
La serotipificacion ha sido por muchos aos la base para la
identificacin de las cepas aisladas de A. pleuropneumoniae. El
mtodo de coaglutinacin fue recomendado por un grupo de expertos
como la tcnica de eleccin para la tipificacin rutinaria de
aislamientos (Nicolet, 1986). Esta prueba ha demostrado ser serotipo
especfica, sensible, simple, rpida, reproducible y fcil de leer e
interpretar, (Mittal et al, 1987). La prueba de coaglutinacin ha
demostrado ser lo suficientemente sensible como para detectar
antgenos serotipo especficos en extractos salinos de tejidos
calentados hasta la ebullicin, (Mittal et al, 1983).
La tcnica de reaccin en cadena de la polimerasa, es de utilidad para
identificar diferentes serotipos utilizando un set de primers para los
genes de las citolisinas ApxI, ApxII, ApxIII y ApxIV. Mediante esta
tcnica, 10 de 13 serotipos pudieron ser diferenciados, sin embargo,
no fue posible distinguir entre los serotipos 2 y 8, serotipo 5a del 5b y
serotipo 9 del 11 (Sthitmatee et al, 2003; Klein et al, 2003).

 SEROTIPOS DE A. pleuropneumoniae
La presencia de una capsula de naturaleza polisacrida constituye la
base para la tipificacin serologica de A. pleuropneumoniae, ya que
los antgenos serotipo especficos estn presentes en esta estructura,
(Nicolet, 1986).
Quince serotipos de A. pleuropneumoniae han sido reconocidos hasta
la fecha. Las cepas de referencia de los serotipos 1 al 12 y el serotipo
15 son NAD dependientes (biotipo 1), mientras que las
pertenecientes a los serotipos 13 y 14 son NAD independientes
(biotipo 2).
Las reacciones cruzadas entre los diferentes serotipos est asociada
con la existencia de antgenos comunes presentes a nivel del LPS y
de protenas de la membrana externa de la bacteria siendo las
reacciones cruzadas mas intensas aquellas relacionadas a las
protenas de peso molecular de 52 Kd y de 78 kd, (Rapp et al, 1986).

 Recientemente, Gottschalk et al, (2000) han

reportado la existencia de cepas que reaccionan
positivamente frente a antisueros de serotipos 1,
4 y 7. Estas cepas poseen una capsula de
polisacrido antigenicamente relacionada con el
serotipo 1 as como tambin una cadena O-de
LPS antigenicamente relacionada con los
serotipos 4 y 7, siendo el patrn de produccin
de toxinas similar al de serotipo 7. Pruebas de
ELISA basadas en LPS identificarn estas cepas
como serotipo 7 mientras que pruebas basadas
en antgenos capsulares las identificarn como
pertenecientes al serotipo 1.

 La existencia de subtipos ha sido reportada para los serotipos 1 (Utrera

1991) y 5 (Nielsen, 1988). En el caso del serotipo 5 se ha demostrado la
presencia de antgenos capsulares de naturaleza polisacrido especficas
para cada subtipo A y B.
La serotipificacion ha sido por muchos aos la base para la identificacin
de las cepas aisladas de A. pleuropneumoniae. El mtodo de
coaglutinacin fue recomendado por un grupo de expertos como la
tcnica de eleccin para la tipificacin rutinaria de aislamientos (Nicolet,
1986). Esta prueba ha demostrado ser serotipo especfica, sensible,
simple, rpida, reproducible y fcil de leer e interpretar, (Mittal et al,
1987). La prueba de coaglutinacin ha demostrado ser lo suficientemente
sensible como para detectar antgenos serotipo especficos en extractos
salinos de tejidos calentados hasta la ebullicin, (Mittal et al, 1983).
La tcnica de reaccin en cadena de la polimerasa, es de utilidad para
identificar diferentes serotipos utilizando un set de primers para los genes
de las citolisinas ApxI, ApxII, ApxIII y ApxIV. Mediante esta tcnica, 10 de
13 serotipos pudieron ser diferenciados, sin embargo, no fue posible
distinguir entre los serotipos 2 y 8, serotipo 5a del 5b y serotipo 9 del 11
(Sthitmatee et al, 2003; Klein et al, 2003).

 DIAGNOSTICO SEROLOGICO
Cerdos infectados con A. pleuropneumoniae producen anticuerpos contra
los principales componentes antignicos de la bacteria tales como
antgenos serotipo-especficos capsulares, protenas de membrana externa
(OMP), lipopolisacaridos (LPS) y toxinas Apx, (Devenish et al, 1989;
Fenwick and Osburn, 1986; Inzana and Mathison, 1987; Rapp and Ross,
1986;Rosendal et al, 1988).
Diferentes mtodos han sido desarrollados para evaluar la respuesta
inmune humoral contra A. pleuropneumoniae. Por muchos aos la prueba
de fijacin de Complemento fue aceptada como la tcnica standard para
la identificacin serolgica de animales infectados con A.
pleuropneumoniae, (Lombin et al, 1982; Nicolet, 1990; Nielsen, 1990).
Debido a la actividad pro complementaria del suero de cerdo la actividad
hemoltica del complemento de cobayos es incrementada dando lugar a
reacciones falsas negativas principalmente a diluciones bajas del suero
(Bankowsky, 1953; Boulanger, 1955). Aparte de ello el suero de cerdo
posee una leve actividad hemoltica contra glbulos rojos de carnero,
ambos efectos pueden ser abolidos mediante el calentamiento del suero a
60 C por 30 min., (Nicolet, 1971; Nielsen, 1982).

 ELISAs desarrollados para la deteccin de antgenos de LPS han demostrado

ser especficos y tiles para el diagnostico serolgico de la enfermedad
(Klausen et al, 2001). Pruebas basadas en la deteccin del antgeno O-LPS
han sido descritas, sin embargo recientemente se demostr la existencia de
cepas con LPS incompleto o truncado las cuales no pueden ser detectadas
mediante esta tcnica.
La respuesta inmune humoral contra las toxinas Apx de A. pleuropneumoniae
ha sido extensamente estudiada (Devenish et al, 1989). Una ELISA indirecta
ha sido recientemente desarrollada que permite la deteccin de anticuerpos
dirigidos contra la Apx IV de A.
pleuropneumoniae. Dicha tcnica demostr poseer 100 % de especificidad y
93.8 % de sensibilidad pudiendo identificar rebaos positivos a la bacteria aun
en ausencia de signos clnicos. Cerdos vacunados con una vacuna de
subunidades conteniendo las toxinas Apx I, Apx II y Apx III resultan negativos
a esta tcnica de ELISA (Dreyfus et al, 2004).
Recientemente fue demostrado que la citolisina Apx III del serotipo 15 no era
detectada por las tcnicas serolgicas que evidencian Apx III de los otros
serotipos, de igual manera vacunas que contienen la citolisina Apx III no
protegen contra dicho serotipo lo cual sugiere que posee factores de
virulencia diferentes o que la citolisina Apx III posee diferencias significativas
con la expresada por otros serotipos (Tumamao et al, 2004)

 Ttulos altos de anticuerpos contra ApxI, ApxII y contra antgenos

capsulares son detectados en cerdos que presentan lesiones
pulmonares. Cerdos que albergan A. pleuropneumoniae en el tracto
respiratorio superior, no muestran niveles de anticuerpos en el suero.
Por lo tanto, mtodos mas sensibles para la deteccin del agente tales
como PCR son necesarias para la deteccin e identificacin de cerdos
portadores ya que las pruebas serolgicas no son tiles para ese fin
(Fittipaldi et al, 2003). El uso de hisopados tonsilares puede ser de
utilidad para la deteccin de cerdos portadores sanos de la bacteria,
utilizando la tcnica de reaccin en cadena de la polimerasa (PCR).
Dicha tcnica demostr una buena correlacin con el status serolgico
de los cerdos inoculados experimentalmente (Fittipaldi, et al, 2003).
La tcnica de PCR para la deteccin de A. pleuropneumoniae
desarrollada en base a la amplificacin del gen dsbE-like, demostr
ser de utilidad para la deteccin de cerdos portadores de la bacteria a
partir de hisopados nasales (Chiers et al, 2001).
Una prueba de PCR serotipo especifica demostr que diferentes
serotipos pueden colonizar las amgdalas de un mismo animal (Angen
y Jessing, 2004

 MECANISMOS de VIRULENCIA
Diferentes factores han sido identificados en A. pleuropneumoniae asociados con la
patognesis de la enfermedad y/o permiten que la bacteria sobreviva in vivo.
Toxinas
La virulencia de los 15 serotipos de A. pleuropneumoniae es principalmente determinada
por las tres principales toxinas RTX ApxI, ApxII y ApxIII, las cuales son secretadas por todos
los serotipos virulentos de este microorganismo en diferentes combinaciones. Una cuarta
toxina, ApxIV, es producida por todos los 15 serotipos durante la infeccin pero no in vitro.
Por lo tanto cerdos infectados con A. pleuropneumoniae producen anticuerpos especficos
contra la ApxIV, mientras que, cerdos libres de la enfermedad pueden presentar
anticuerpos dirigidos contra cualquiera de las otras toxinas que tambin pueden ser
producidas por otras especies de Actinobacillus tales como A. suis.
El desarrollo de mutantes no virulentas que carecen o expresan las citolisinas de una
manera reducida han sido descritas. Utrera (1991), demostr que la baja virulencia de una
cepa de serotipo 1 estaba en parte asociada con una reducida expresin de capsula as
como tambin de la citolisina Apx I.
Bei y col (2005) desarrollaron una mutante avirulenta de A. pleuropneumoniae serotipo 7
que expresaba la toxina Apx II inactivada. Dicha mutante produjo 100 % de inmunidad
protectora contra el desafo homologo con el serotipo 7 y proteccin parcial (70 %) contra
el desafo heterologo con cepas de serotipo 1 y 3.

 La inoculacin intratraqueal de las toxinas purificadas de A. pleuropneumoniae ha

demostrado ser eficaz en reproducir las lesiones tpicas de pleuroneumona en
cerdos susceptibles (Kamp et al 1989). Dicho efecto fue mucho ms marcado con
las toxinas Apx I y Apx III.
Mutantes de A. pleuropneumoniae que carecen de Apx I y de Apx II fueron
incapaces de inducir las lesiones caractersticas de la enfermedad, lo que sugiere
que ambas toxinas son esenciales en la patognesis de la pleuroneumona
(Boekema et al, 2004).
Capsula
Los polisacridos capsulares de A. pleuropneumoniae han sido asociados con la
patognesis. Dichas molculas juegan un papel importante en garantizar a la
bacteria una barrera protectora contra las defensas del hospedador (Fenwick et al,
1986; Fenwick and Osburn, 1986; Inzana et al, 1988). Mutantes isogenicas no
encapsuladas son generalmente avirulentas y son fcilmente eliminadas por las
defensas del hospedador (Inzana et al, 1988). La cantidad de material capsular
asociado a la clula bacteriana ha sido responsabilizado por las diferencias en
virulencia observada entre las diferentes cepas de A. pleuropneumoniae serotipos
1 y 5 (Jensen and Bertram,1986; Jacques et al, 1988; Rosendal et al, 1990).

 Lipopolisacaridos (LPS)
El LPS de las bacterias Gram negativas contribuyen al potencial patognico de los
microorganismos al activar los mecanismos de defensa del hospedador siendo
responsables en algunos casos de dao a los tejidos y signos clnicos asociados a la
infeccin (Fenwick, 1990).
Protenas de Membrana Externa
El papel que juegan ciertas protenas de la envoltura celular en patogenicidad e inmunidad
ha sido estudiado. (Denner and Potter, 1989; Smeltzer and Fenwick, 1989). Archambault et
al, 2003 demostraron la existencia de protenas de membrana que se unen a la
Hemoglobina del cerdo lo cual sugiere que podran ser un mecanismo de captura de hierro
para la supervivencia de la bacteria in vivo.
La lactoferrina, la transferrina y la hemoglobina son molculas con alta afinidad por el
hierro que reducen la disponibilidad de este mineral para patgenos potenciales. La
capacidad para captar hierro de estas molculas ha sido demostrada en las cepas
patgenas de A. pleuropneumoniae a travs de ciertas protenas de membrana que son
expresadas in vivo (Beddek et al, 2004) Recientemente se ha demostrado que una protena
de la membrana externa de A.
pleuropneumoniae de 60 kd es responsable de la adherencia al colgeno presente en el
pulmn del cerdo y pudiera ser un factor importante en la patognesis de la enfermedad.
Se ha demostrado que la adherencia al colgeno porcino es ms evidente en los serotipos
1 y 7 (Enriquez-Verdugo,etal,2004).

 Fimbrias
Cerdos sanos o enfermos en forma subclnica, pueden albergar A.
pleuropneumoniae a nivel de cavidad nasal y de tonsilas, (Nielsen,
1979; Kume et al, 1984; Kume et al, 1986; Wilson et al, 1987). Inzana et
al (1988), demostraron la existencia de estructuras semejantes a
fimbrias en A. pleuropneumoniae fagocitado por clulas
polimorfonucleares. La expresin de fimbrias fue demostrada cuando
cultivos de primer y segundo pasaje a partir de cerdos infectados
fueron evaluados a travs de microscopio electrnico de transmisin
(Utrera y Pijoan, 1991). La capacidad de la bacteria para expresar esas
estructuras parece perderse despus de pasajes sucesivos in vitro.
Las fimbrias de A. pleuropneumoniae poseen una protena de 17-kd,
que reacciona en forma cruzada con la fimbria tipoIV de M. bovis. La
regulacin gentica asociada con la expresin de las fimbrias ha sido
evaluada (Boekema et al, 2004). La expresin de dichos genes ha sido
demostrada despus que la bacteria entra en contacto con clulas
epiteliales e in vivo despus de la inoculacin experimental por va
endobronquial.

 PATOGENESIS
La infeccin usualmente ocurre a travs de la va area o por contacto
directo. El microorganismo es capaz de colonizar las amgdalas y adherirse
al epitelio alveolar. En general, el paso inicial para la colonizacin
bacteriana lo constituye la adherencia a las clulas del hospedador. Se ha
demostrado que A. pleuropneumoniae es capaz de unirse in vitro a
fosfolipidos el cual representa el principal componente de las membranas
celulares. El antigeno O del LPS esta implicado en tal adherencia ya que
anticuerpos monoclonales dirigidos contra ese antigeno, inhiben tal unin
(Jeannotte et al, 2003).
Kaplan et al (2005), demostraron que A. pleuropneumoniae tiene la
capacidad de formar bio films o bio pelculas en medio de cultivo slido,
propiedad que pierde despus de uno o dos pasajes in vitro. La propiedad
fenotipica de formar bio pelculas pudiera ser un factor importante para la
colonizacin, virulencia y transmisin del agente.

 A. pleuropneumoniae tambin es capaz de adherirse a las clulas bucales

epiteliales lo cual puede ser un factor importante en la existencia de cerdos
portadores sanos, (Hammer-Barrera et al, 2004), La presencia de fimbrias
tambin debe jugar un papel en la adherencia de la bacteria a las
superficies mucosas.
Bajo ciertas circunstancias la bacteria puede llegar al pulmn en donde es
fagocitada rpidamente por los macrfagos alveolares. Cuando la
concentracin de bacterias que alcanza el pulmn es muy elevada, supera
la capacidad fagoctica de los macrfagos, observndose bacterias
adheridas a la superficie de las clulas fagocticas desde donde comienza la
secrecin de las toxinas ApxI, Apx II, Apx III y/o Apx IV. Dichas toxinas
poseen efecto toxico sobre los macrfagos alveolares, clulas endoteliales,
clulas epiteliales alveolares, siendo la Apx III de particular efecto toxico
contra macrfagos alveolares.
Las cepas de mayor virulencia tienen la capacidad de producir una mayor
cantidad de capsula la cual previene la fagocitosis. La presencia de LPS
activa la elaboracin de citoquinas que contribuyen al dao tisular asociado
con la infeccin pulmonar.
Las infecciones concomitantes con agentes como el virus del PRRS y/o
Mycoplasma hyopneumoniae contribuyen a un cuadro clnico mas severo

 Las lesiones necrticas y hemorrgicas a nivel pulmonar

pueden ser evidentes de 3 a 5 horas post infeccin, con
presencia de congestin y edema a nivel de la pared
alveolar. Hay acumulacin de neutrofilos, acumulacin de
fibrina, presencia de trombosis e infartos. En casos de
bacteriemia el cuadro clnico se hace mucho ms severo y
puede presentarse muerte sobreaguda. A medida que pasan
los das se produce muerte de macrfagos y neutrfilos que
se acumulan en la lesin y a nivel de los bronquios. A medida
que la lesin evoluciona se hace necrtica y comienza un
proceso de fibrosis que conduce a la cicatrizacin. La
infeccin genera la produccin de anticuerpos dirigidos
contra cada uno de los factores de virulencia bacteriana.
Esos anticuerpos son evidentes a partir de los 10 das post
infeccin. Anticuerpos contra la Apx IV no se producen
cuando la bacteria coloniza el epitelio nasal o el epitelio de
las amgdalas.

 EPIDEMIOLOGIA
Modo de transmisin
Cerdos portadores sanos o portadores crnicos juegan un papel crucial en la
epidemiologa de la enfermedad y representan la principal fuente de infeccin de
cerdos susceptibles (Sebunya and Saunders, 1983; Nielsen, 1982).
El contacto directo nariz con nariz constituye el modo mas importante de transmisin
de la infeccin, (Nicolet, 1986; Nielsen, 1982; Shope, 1964; Olander, 1963; Nielsen,
1970; Little and Harding, 1971).
El modo de transmisin areo no parece ser una manera comn de contagio.
Torremorell et al (1997), demostraron que la transmisin area era posible a un
metro de distancia. Sin embargo Kristensen et al, (2004), no fueron capaces de
demostrar transmisin a esa distancia cuando menos del 10 % del aire era
transferido de un rea contaminada a un rea libre del patgeno, simulando lo que
normalmente ocurre bajo condiciones naturales.
Desrosier et al, (1984) no fue capaz de demostrar la transmisin de la infeccin por
va area durante un periodo de 2 meses en un ensayo en donde cerdos susceptibles
fueron mantenidos separados de animales infectados en forma aguda y mantenidos
a 3 metros de distancia de los enfermos, (Desrosiers et al, 1984).
La transmisin de A pleuropneumoniae a travs de vehculos contaminados fue
demostrada por Fussing et al, (1998).

 Factores predisponentes

Por lo general la infeccin por A. pleuropneumoniae es subclnica

hasta que una situacin de stress, resulta en la aparicin de
brotes, (Rosendal and Mitchell, 1983). Cambios climticos
bruscos con frecuencia representan el factor predisponente de los
brotes, (Sandford and Josephson, 1981; Sebunya et al, 1982;
Greenway, 1981; Rosendal et al, 1985). La severidad de la
enfermedad esta correlacionada con el nivel de inmunidad del
rebao afectado, (Shope, 1964; Mylrea et al, 1974; Schiefer et al,
1974; Nielsen and Mandrup, 1977).
Brotes de la enfermedad han estado asociados con,
hacinamiento, pobres condiciones sanitarias, sistemas de
produccin de flujo continuo, pobre ventilacin, humedad elevada
y variaciones extremas de temperatura a lo largo del da, (Nielsen
et al, 1976; Sandford and Josephson, 1981; Schultz et al, 1982;
Gunnarson et al, 1977; Pijoan et al, 1983).

 Papel de las madres

La inmunidad de las madres juega un rol
crtico en la epidemiologa de la enfermedad.
La duracin de la inmunidad calostral oscila
entre 2 a 8 semanas, dependiendo
principalmente del nivel de anticuerpos
obtenidos a partir de la madre (Utrera et al,
2000; Vigre et al, 2003). Una reduccin
significativa de la prevalencia de lesiones a
nivel de matadero ha sido demostrada a
consecuencia de la aplicacin de un
programa de vacunacin del rebao (Beskow
et al, 1989; Utrera et al, 2000).

 INMUNIDAD
Uno de los elementos claves que determinan la evolucin de la enfermedad en los rebaos
afectados, lo constituye la inmunidad contra el agente causal. Una vez que un animal se
recupera de la infeccin, adquiere proteccin contra el desafo por todos los serotipos de A.
pleuropneumoniae (Nielsen, 1984). El control de la enfermedad mediante bacterinas
elaboradas a base de clulas completas ha sido tradicionalmente insatisfactorio induciendo
una pobre inmunidad que solo es serotipo-especifica (Nicolet, 1990; Nielsen, 1976; FedorkaCray et al, 1990).
La presencia de inmunidad calostral es un factor importante que se ha demostrado que
interfiere en la inmunidad activa de los lechones (Nechvatalova et al, 2004). Una tpica
respuesta inmune primaria solo es evidente en lechones que no poseen anticuerpos
calostrales al momento de ser desafiados.
La vacunacin de las madres ha demostrado poseer un efecto positivo en la estabilizacin de
la inmunidad del rebao y en reducir la incidencia del problema en cerdos destetados (Utrera
et al, 2000). El uso de vacunacin simultanea contra Mycoplasma hyopneumoniae y A
pleuropneumoniae ha demostrado ser efectivo para garantizar un buen nivel de inmunidad
calostral contra ambas enfermedades (Kristensen et al, 2004).
La inmunidad calostral posee un efecto protector contra la infeccin por A.
pleuropneumoniae, (Nielsen, 1982). La duracin de la inmunidad pasiva varia entre 2 a 8
semanas dependiendo del nivel de anticuerpos adquiridos (Utrera et al, 2000; Vigre et al,
2003). No existe correlacin entre los niveles de inmunoglobulinas dirigidos contra antgenos
capsulares serotipo especficos y la proteccin. Esto contrasta con la inmunidad protectora
asociada con el nivel de anticuerpos especficos contra las toxinas Apx.

 Diseando la vacuna ideal

A la hora de tomar decisiones acerca de cual podra ser la mejor vacuna para el control de la enfermedad es
importante comprender cuales son los antigenos responsables de inducir una inmunidad protectora.
Cada uno de los componentes antignicos de la bacteria han demostrado ser inmunogenicos, sin embargo, cada uno
de ellos por separado induce una proteccin parcial contra los signos clnicos y las lesiones producidas por A.
pleuropneumoniae (Inzana et al, 1988; Fenwick and Osburn, 1986; Kamp and Leengoed, 1989; Rapp and Ross,
1986).
La inmunidad protectora contra la infeccin por A. pleuropneumoniae esta directamente relacionada con los niveles
de anticuerpos especficos contra las toxinas Apx I, Apx II, Apx III y Apx IV. La colonizacin de las amgdalas y de la
mucosa nasal puede ocurrir en presencia de anticuerpos calostrales. El desarrollo de anticuerpos neutralizantes
contra las toxinas Apx requiere que la infeccin se haya ubicado a nivel pulmonar ya que la colonizacin a nivel nasal
o de amgdalas no induce un nivel suficiente de anticuerpos neutralizantes, por lo tanto, cerdos portadores del
microorganismo a nivel de amgdalas o cavidad nasal sin involucrar los pulmones carecen de inmunoglobulinas
especficas contra las toxinas Apx de A. pleuropneumoniae (Chiers et al, 2002), esto explica el porque dichos
animales son susceptibles de sufrir la enfermedad a pesar de albergar el agente a nivel del tracto respiratorio
superior.
Para que una vacuna sea capaz de inducir inmunidad protectora es necesario que sea capaz de estimular la
produccin de anticuerpos dirigidos contra las toxinas Apx. Sin embargo dichas inmunoglobulinas no previenen la
colonizacin por parte de A. pleuropneumoniae. Ninguna vacuna desarrollada hasta el presente es capaz de prevenir
que los cerdos alberguen la bacteria a nivel de las amgdalas y se conviertan en portadores sanos de la infeccin.
Una vacuna capaz de prevenir la adhesin del microorganismo a las clulas epiteliales del tracto respiratorio superior
podra ser efectiva en prevenir la aparicin de cerdos portadores sanos. Bacterias cultivadas bajo condiciones de
restriccin de la disponibilidad de NAD (0.001 % NAD), poseen una incrementada capacidad de adherencia a las
clulas alveolares (van Overbeke et al, 2002). Bacterinas elaboradas bajo tales condiciones demostraron inducir una
proteccin parcial pero superior a aquellas elaboradas con medio de cultivos enriquecidos con NAD (Van Overbeke et
al, 2003).

 Cuadro clnico
La pleuroneumona puede adoptar
las formas sobreaguda, aguda
crnica. Las dos primeras se dan en
explotaciones indemnes, infectadas
por primera vez, mientras que la
crnica se relaciona con reas
endmicas (52,57).

 La sobreaguda aparece de sbito,

con apata, anorexia e hipertermia
(hasta 42C) (44,62) seguido de
vmitos, diarrea ligera, tos, epistaxis
o movimientos masticatorios (87). A
las pocas horas hay aceleracin del
pulso y fallo cardiaco y circulatorio,
que conduce a cianosis generalizada
de piel y mucosas (54).

 En la fase final hay sntomas

respiratorios acusados, con disnea y
respiracin bucal. La muerte
sobreviene en 24 h pero a veces,
sobre todo en lechones, es tan rpida
que no llegan a observarse sntomas
(57,80).
En la forma aguda todo es posible,
desde la muerte en pocos das hasta
el paso a la forma crnica, despus de
2-4 das.

 La forma crnica surge una vez

superado el proceso agudo, con
sintomatologa inespecfica,
temperaturas desde 37 a 40-41C,
tos crnica e inapetencia, aunque los
sntomas pueden agudizarse en
cualquier momento por otras
infecciones o el transporte

 RESUMEN
Enfermedad respiratoria grave de contagio por contacto
directo. Altamente contagiosa, de desarrollo brusco, curso
corto y altas morbilidad y mortalidad.
Etiologia:
Actinobacillus pleuropneumoniae.
Sntomas:
Muerte repentina.
Dificultad respiratoria.
Descarga nasal y oral espumosa.
Sangramiento.
Fiebre.
Anorexia.
Resistencia al movimiento.
En casos agudos descargas nasales con sangre y espuma

Tpica imagen de cerdo con APP

Bronconeumona fibrinosa,hemorrgica y
necrtica aguda.

 Lesiones
Se limitan al aparato respiratorio. En las fases
sobreaguda (si la evolucin lo permite) y aguda, se
desarrolla una neumona fibrinoso-hemorrgica
necrosante con pleuritis serofibrinosa.
Las reas afectadas presentan un color rojo negruzco o
rojizo (la pleura), con adherencias fibrinosas a la pared
costal y pericardio.
En la cavidad torcica puede observarse lquido
serosanguinolento y cuando el curso es muy rpido,
trquea y bronquios contienen exudado mucoso con
cogulos de fibrina y los ganglios estn edematosos
(4,5,24,59).

 CLNICA
Varan segn el estado de inmunidad
de los cerdos, el grado de exposicin
al agente infeccioso y en menor
medida las condiciones ambientales.
El periodo de incubacin corto (1224 h.), tras el que se desarrolla la
enfermedad con curso sobreagudo,
agudo o subagudo-crnico.

 Forma sobreaguda:
En la que uno o ms cerdos de la misma o distinta
sala enferman de repente mostrando: fiebre, apata
y anorexia; los animales enfermos se encuentran
postrados en el suelo pero sin signos respiratorios
evidentes, aunque muy pronto sufren la muerte.
Ya en fases terminales si se puede observar disnea
aguda con respiracin bucal y en posicin de perro
sentado: antes de morir, se observa con frecuencia
espuma sanguinolento en la boca y en la jeta.
La muerte suele presentarse a las 24-36 horas.
Tambin es normal muertes repentinas sin
apreciarse sintomatologa alguna y suele ser la
forma observada al inicio de un brote en
explotaciones que no estaban infectadas.

 Forma aguda:
afecta a muchos cerdos de la misma o
distinta sala. Inicialmente presentan los
mismos sntomas: fiebre, depresin,
anorexia; sin embargo, se suelen
observar claros sntomas respiratorios
con disnea, tos y, en algunos casos,
respiracin con la boca abierta. A veces
se producen vmitos.
Esta forma puede evolucionar bien hacia
la muerte en un plazo mximo de 36-48
horas, hacia la recuperacin del animal o
hacia una forma subaguda-crnica.

 Forma subaguda-crnica:
se presentan como evolucin de una forma
aguda o pueden darse sin sntomas previos
de enfermedad. Los sntomas en este caso
no son caractersticos: los animales pueden
mostrar tos, estornudos, inapetencia y
disminucin del peso.
A veces se pueden observar artritis,
abscesos en distintas localizaciones e
incluso se han descrito otitis. Los animales
pueden morir despus de varias semanas o
recuperarse aunque con graves problemas
de desarrollo crecimiento

 En la forma aguda pueden observarse cantidades

variables de fibrina y adherencias pleurales.
En las formas crnicas se aprecia un engrosamiento
fibroso de la pleura y, en el parnquima pulmonar, las
reas de necrosis estn limitadas por cpsulas
gruesas, de color blanquecino, formando secuestros.
Microscpicamente, en la forma sobreaguda, se
observa congestin, trombosis, hemorragia, edema y
exudacin de fibrina.
En la forma aguda hay focos de necrosis por
coagulacin, rodeados por clulas inflamatorias
(linfocitos, macrfagos y clulas plasmticas).
Igualmente, se observa fibrina, eritrocitos y
neumocitos en la luz de los alveolos.

 Los septos interalveolares estn

engrosados y es frecuente la
trombosis vascular.
En la evolucin a la forma crnica,
desde la periferia de las reas de
necrosis progresa un tejido de
granulacin que es responsable del
encapsulamiento y los secuestros, en
los que quedan acantonadas
bacterias .

 Diagnstico
El cuadro clnico es el primer dato, que se confirma en el laboratorio con el
aislamiento e identificacin.
La diferenciacin con otras neumonas (P. multocida o mycoplasmas) puede
establecerse a partir de las lesiones (8). El aislamiento de A. pleuropneumoniae
se lleva a partir de material de lesiones (pulmn o tonsilas).
Puede utilizarse hisopos, sembrando en medios selectivos y agar sangre con
una estra nodriza. Luego se procede a la identificacin y tipificacin.
Los procedimientos de deteccin e identificacin directa son de un valor
inestimable, pues permiten poner en marcha las medidas de control ms
rpidamente. Se incluyen, entre otros, la coaglutinacin, la
inmunohistoqumica, el ELISA y la PCR. Las ventajas de la coaglutinacin
incluyen la deteccin de animales infectados simultneamente con varios
serotipos y la posibilidad de trabajar con muestras en mal estado, aunque
detecta mal los enfermos crnicos.
La inmunohistoqumica, con sueros marcados con peroxidasa o con biotina
(28,32, 58) es fcil de ejecutar, pero laboriosa y permite trabajar sobre
muestras fijadas.
La PCR es un mtodo muy adecuado para el que se han realizado varias
propuestas. Se han aplicado primers aleatorios (AP-PCR), incluyendo el M13 y
los T3-T7 (29), para diferenciar los serotipos en cultivos puros. Tambin se han
diseado primers para los genes apx (17,18) o para el gen de la cpsula (98).

 Las tcnicas PCR-RFLP discriminan intraespecficamente; se han realizado propuestas

sobre el gen omlA, de una lipoprotena de membrana externa, utilizando las enzimas
Hinfl VspI (60) o el aroA (30), separando los serotipos en tres grupos.
Nosotros mismos (13) hemos propuesto una PCR-RFLP para la deteccin y tipado, basada
en los genes tbpA y tbpB. Con los tbpA se obtuvo un producto de 28 kb en los 12
serotipos, que despus de sometido a restriccin gener 10 perfiles que permitan
discriminar, no solo entre serotipos, sino de otras especies prximas.
Deteccin de anticuerpos: Hasta la fecha, se han utilizado diversos procedimientos
para la identificacin de anticuerpos en animales infectados o convalecientes, aunque
los ms utilizados han sido la fijacin del complemento (FC) y el ELISA (25;48).
La FC fue utilizada, desde el principio, como mtodo de referencia, con extractos
(capsulares u otros) antignicos (25); en cualquier caso, ha sido sustituida
progresivamente por el ELISA, en razn de los importantes inconvenientes de los sueros
porcinos. Nosotros utilizamos la FC con una suspensin bacteriana de 6 h como antgeno
(24).
Nicolet et al., (53) utilizaron un ELISA en el diagnstico y, desde entonces, ste ha sido el
procedimiento ms extendido.
Como antgeno se han usado distintas preparaciones, aunque las ms comunes incluyen
extractos salinos, hervidos y extrados por un sistema fenol-agua, utilizando la fase
fenlica o acuosa segn el serotipo liso o rugoso (64,65). Recientemente, se ha descrito
un mtodo con el polisacrido capsular marcado con biotina/estreptavidina (34).
En nuestro laboratorio utilizamos un ELISA indirecto con un antgeno de extracto hervido
y extrado por un mtodo fenol-agua (24,73).

 Tratamiento
A.pleuropneumoniae es susceptible a numerosos antibiticos, aunque se ha
descrito un aumento importante de las resistencias, en especial a
penicilinas y tetraciclinas.
En un estudio se obtuvieron ms de un 10% de cepas resistentes a
penicilina G y ampicilina, siendo ms del 26% y 59% resistentes a
tetraciclina y oxitetraciclina (27).
Resultaron muy eficaces la kanamicina, ntamicina, pero las quinolonas
fueron, los ms seguros. Recientemente se ha descrito el uso de tilmicosina
en el pienso de cerdas gestantes (7), de difloxacina intramuscular (93) o de
florfenicol en el agua (37) con excelentes resultados.
Como norma, sin embargo, la terapia antibitica solo es eficaz al comienzo
y en masa.
En el tratamiento de la fase aguda se deben administrar antibiticos por va
parenteral y a dosis elevadas o mejor, una combinacin de sta con la
medicacin oral.
Para evitar recadas se recomienda un periodo de tratamiento de 4-5 das,
descanso 5 y reanudacin con el mismo tiempo, repitiendo el ciclo varias
veces.
En brotes subagudos o crnicos, la terapia oral en el pienso posee valor
escaso, debido a la anorexia, adems de que dadas las elevadas CMIs de la
mayora de los aislamientos, no es fcil administrar la dosis teraputica
adecuada.

 OTRAS INVESTIGACIONES;

Entre los antibiticos de eleccin para el tratamiento de la pleuroneumona

porcina estn la tilmicosina (Paradis et al, 2004), la tulatromicina, el florfenicol, el
ceftiofur sodico y la tiamulina entre otros (Nanjianni et al, 2005). El uso de
tilmicosin ha sido reportado de utilidad en la terapia de animales afectados. La
actividad bactericida de los macrfagos alveolares fue potenciada por este
antibitico (Brumbaugh et al, 2002).
La administracin oral de tilmicosin a cerdos infectados con A. pleuropneumoniae
induce apoptosis en leucocitos del fluido bronco alveolar y disminuye las
concentraciones de clulas y las lesiones inflamatorias asociadas con la infeccin
(Nerland et al, 2005).
La terapia con Amoxicilina a razn de 20 mg/kg como dosis nicas demostr ser
tan efectiva como la administracin de 4 dosis de 5 mg/kg a intervalos de 8
horas (Lauritzen et al, 2005). Aparte del uso de antibiticos, la sueroterapia
podra ser una alternativa. La produccin de inmunoglobulina Y en huevos de
gallinas ha sido reportado como una alternativa para el control de los signos y
lesiones asociados a la infeccin (Shin et al, 2002). Dichos investigadores fueron
capaces de prevenir la enfermedad en cerdos que consumieron yema de huevo
inmune frente a A. pleuropneumoniae.

 Vacunacin
En los ltimos aos se ha venido insistiendo repetidamente en la vacunacin,
en la creencia de que una buena vacuna ser decisiva en el control.
Desde los ms antiguos hasta los productos ms recientes, se han
experimentado diversidad de combinaciones, en las que algunos factores de
virulencia, especialmente las Apx, han centrado el inters.
Pese a todo, an se carece de un producto que proteja frente a la enfermedad
aguda y prevenga la condicin de portador crnico y eliminador de A.
pleuropneumoniae.
Las bacterinas incluyen el microorganismo completo, del serotipo
predominante en la explotacin o en la regin, inactivado por formol al 02%.
La concentracin oscila en torno a 109-1010 UFC/ml. Por lo general se aade
un adyuvante que refuerza la respuesta inmune.
De ordinario se administra una dosis a las 9 semanas o coincidiendo con la
entrada de los animales en la explotacin y, al menos una repeticin a las 2-3
semanas (12,74).
En este tipo de productos la proteccin slo es homloga, por lo que se suele
incorporar ms de un serotipo, por ejemplo, mezclas de los serotipos 1 y 5; 2 y
5; 1 y 7; 2, 7 y 9; 4 y 2 (14,40,43,82,89).
Las bacterinas reducen la gravedad y la mortalidad, pero no resuelven el
problema de la prevencin ni la persistencia de lesiones o la presencia de
portadores.

 Vacunas de extractos: Los extractos de cultivos son una alternativa a las bacterinas.
Se han utilizado extractos crudos de cultivos jvenes, concentrados o no, en ocasiones
precipitados con polietilenglicol o cetavln (para la cpsula), conjugados con Apx, LPS y
carbohidratos y, por lo general, con adyuvantes (15,31), aunque en general solo han reducido la
mortalidad o las lesiones, pero no resolvieron el problema de los portadores.
Vacunas atenuadas: Se han obtenido distintos mutantes atenuados con los que se ha inducido
inmunidad protectora, como la cepa CM5 del serotipo 1 (76) o la cepa BES (89), pero solo se han
conseguido descensos en la mortalidad y lesiones.
Tambin se han obtenido mutantes acapsulados, atenuados por mutagnesis qumica, de los
serotipos 1 y 5 (36), que han sido estudiadas en condiciones experimentales y, segn su autor,
una dosis de 2 x109 UFC indujo una fuerte respuesta capaz de resistir el desafo intratraqueal,
tanto del serotipo homlogo como heterlogos, sin sntomas ni lesiones.
Fuller y Mulks (21) trabajaron sobre mutantes auxotrficos (biosntesis de riboflavina) sugiriendo,
tambin, su valor como cepas vacunales.
Vacunas de subunidades: Muchos antgenos de superficie inducen respuesta srica, por lo que han
sido investigados desde el punto de vista vacunal.
Es el caso del LPS, que se ha utilizado detoxificado y adyuvantado con resultados protectores,
aunque inferiores a los conseguidos con una bacterina (69). Algunas OMP del serotipo 5
adyuvantadas tambin fueron investigadas (66) obteniendo un descenso significativo en el
nmero de casos de neumona, despus de la infeccin intranasal con la cepa homloga (67).
La cpsula, igualmente, ha sido estudiada desde el punto de vista vacunal. Lenser et al. (42)
estudiaron polisacridos y protenas de la cpsula, a partir de sobrenadantes de cultivo de los
serotipos 5 y 7, precipitados con cetavln y mezclados con un adyuvante oleoso. Todos los ratones
inmunizados intraperitonealmente sobrevivieron a la infeccin con el serotipo homlogo, pero no
con el heterlogo.
Las toxinas Apx se consideran inmungenos muy importantes frente a los que se forman
anticuerpos neutralizantes en el suero de cerdos convalecientes (3;20) o inmunizados
artificialmente (6).

 Se ha descrito el uso vacunal experimental (en el ratn) de Apx-I recombinante en E. coli y de la Apx-II
purificada del serotipo 7 (33), adyuvantadas con hidrxido de aluminio, obtenindose resultados protectores
frente a algunos serotipos, pero no frente a otros.
Tambin se ha utilizado (83) un sobrenadante crudo de cultivo del serotipo 1, con Apx-I, solo o mezclado con
una preparacin inactivada de clulas enteras, en ambos casos con un adyuvante oleoso, siendo esta
combinacin la que comparativamente produjo los mejores resultados en forma del ttulo de anticuerpos.
En la actualidad se comercializa una vacuna de subunidades con tres toxoides de Apx-I, Apx-II y Apx-III y una
OMP (45,63,92) con adyuvante oleoso. Se han descrito buenos resultados cuando se comparan con los
controles, pero el problema an sigue sin resolverse de modo definitivo.
Vacunas conjugadas: Se ha estudiado (16) una vacuna de oligosacridos de la pared celular conjugados con
un toxoide tetnico, comprobndose que los polisacridos desempean un papel significativo en la
inmunidad.
Van den Bosch et al. (94) desarrollaron una vacuna conjugada que combinaba, en distintas opciones, la Apx-I
de los serotipos 1 5b con OMP del serotipo 1 y un adyuvante, con excelentes resultados de mortalidad,
pero no en el desarrollo de lesiones.
Tambin se ha estudiado la mezcla de polisacrido capsular con hemolisina o su conjugacin con el LPS (9),
producindose un aumento significativo del ttulo de anticuerpos, con descenso de la mortalidad y lesiones,
pero el producto no resolvi satisfactoriamente el control.
Rossi-Campos et al. (77) utilizaron dos antgenos recombinantes del serotipo 7, que incluan el extremo Cterminal de la Apx-II y una Tbp de 60 kDa.
Todos los animales desarrollaron una fuerte respuesta humoral, comparable a la que se induca en la
infeccin natural, con una menor mortalidad y afectacin que los controles, pero solo frente a la exposicin
con el serotipo homlogo.
Utrera et al. (90) han ensayado un preparado constituido por antgenos de clulas enteras y por el toxoide
Apx-I, con el que han obtenido una importante reduccin de la mortalidad de los animales vacunados.
Por ltimo, ha sido descrito una vacuna preparada a base de antgenos asociados a clulas recombinantes,
as como antgenos secretados, entre ellos, protenas de unin a transferrina y la toxina Apx-II. El preparado
ha sido contrastado frente a la inoculacin endobronquial del serotipo 9, con resultados de proteccin
aceptables (95).

Bronconeumona fibrinosa hemorrgica

necrotizante

Bronconeumona fibrinosa hemorrgica

necrotizante y pleuritis fibrinosa

El aislamiento del microorganismo de animales crnicamente infectados, usualmente se complica por

la contaminacin con otros agentes de ma s rpido crecimiento

La presencia de capsula es mas evidente en los

cultivos jvenes menores de 6 horas de

incubacin