ELISA

Anticuerpo
son unas protenas en forma de Y producidas por
el

sistema

inmunolgico

para

identificar

neutralizar las sustancias dainas y extraas al

cuerpo, llamadas antgenos.

Antgeno
Es una sustancia ajena al cuerpo que el sistema
inmunolgico reconoce como una amenaza.
Cuando el cuerpo detecta antgenos se induce una
respuesta

inmunitaria

con

la

formacin

anticuerpos, como forma de defensa.

de

ENSAYO DE INMUNOABSORCIN
LIGADO A ENZIMAS

es una tcnica de laboratorio que

identifica pequeas partculas
antgenos, y grmenes que
causan enfermedades.

TCNICA DE ELISA

es un ensayo inmunoenzimtico.
empleado en el rea mdica para la
cuantificacin de molculas especialmente
de aquellas que experimentan cambios en
diferentes estados como:
infecciones por bacterias,
virus,
Hongos.
Parsitos.
fases
activas
de
enfermedades
autoinmunes.

CUANDO SE HACE UN ELISA

Diagnstico de
VIH
Diagnstico de
hepatitis B

Deteccin de
anticuerpos
contra
microorganism
os
Deteccin de
grmenes en
heces

Deteccin de
antgenos en
orina

COMO SE HACE UNA TECNICA ELISA

Para realizar la prueba se toma primero la muestra
sobre la que se realizara el Elisa .
Se deposita la muestra recogida en bandejas con
pequeos pozos .
Una ves depositada la muestra se aaden
anticuerpos que detectan los antgenos si los hay.

los

Se realiza un lavado de los pocillos, as se eliminaran

los anticuerpos que no estn unido al antgeno.

COMPLICACIONES DE UN ELISA
Las complicaciones de una Elisa son prcticamente
inexistentes.
El nico riesgo es aceptar resultados falsos positivos o
negativos y tomar medidas equivocadas.

CUESTIONES
QUE SE DEBEN
TOMAR EN
CUENTA:

Duracin: la recogida de la
muestra suele durar muy poco
tiempo, lo mismo que tarda en
realizarse
una
analtica sangunea .
Los
resultados
tardan
bastante ms, habitualmente
varios das. En situaciones de
urgencia se puede realizar un
ELISA y obtener los resultados
en
una
hora
aproximadamente.

Es

necesario

ir

acompaado?:no,tansloserecibe
un pinchazo cuandolamuestraquese
tienequetomarseasangre,ynosuele
sermuydoloroso.

Medicamentos: no es necesario
tomar ningn medicamento previo.
Hay que decirle al mdico todos los
medicamentos

que

se

estn

tomando en ese momento. Algunos

medicamentes pueden dar falsos
negativos de la prueba, por ejemplo

Ingreso: nunca requiere

ingreso. La recogida de la
muestra se realizar en el
momento.

si

tomas antibiticos y

quieren

detectar el germen que produce la

infeccin.

 Comida: puedes comer con normalidad, no

hace falta ir en ayunas. Pero si la muestra es
sangunea es frecuente que aprovechen el
pinchazo de la analtica para medirte otros
parmetros

en

sangre

(azcar,

colesterol,

etctera), as que lo mejor es que te informes o

directamente te mantengas en ayunas si la
analtica es temprano.
Ropa:puedesvestirconropadecallenormal.

Documentos: es recomendable llevar

tu tarjeta sanitaria, aunque la mayor
parte de las veces es suficiente que
lleveselvolante con el que el mdico
te mand la prueba.

 Embarazo

lactancia: se

puederealizar esta pruebacon

normalidadencualquieradelas
dos situaciones. De hecho, es
una

prueba

realizarse

que
en

suele
los

controlesperidicosdeembara
zo
establecidos.

Contraindicaciones:

no

existen

contraindicaciones. Tan solo hay que

valorar si realmente merece la pena
realizar la prueba y si los resultados
serviran de algo.

ENSAYOS DE ENLACE
COMPETITIVO

Los ELISA en fase

slida,
no
competitivos
se
utilizan
para
determinar
antgenos, haptenos
o anticuerpos.
ENSAYOS DE
ENLACE NO
COMPETITIVO
Son denominados
tambin, tcnicas
del emparedado y
son los mtodos
ms utilizados
paradeterminar
antgenos.

1.COMO SE
HACE UN
ELISA
El

anlisis

porELISAlo pedir el
mdico cuando sea
necesario y sea la
mejor

arma

diagnstica

para

estudiar

tu

enfermedad.
tomara
muestra.

primero

Se
la

EL ENSAYO ELISA TIPO

SNDWICH ES UN ENSAYO
DE CAPTURA DE ANTGENO
Y DETECCIN MEDIANTE
INMUNOCOMPLEJOS.
recubre el pocillo con un
primer anticuerpo antiantgeno.
lavar el exceso de
anticuerpo se aplica la
muestra problema en la que
se encuentra el antgeno,
que
lavado
que
eliminaenelel
ser
retenido
material
pocillo
al no
serretenido
por el primer
Ac.
se aplica una solucin
con un segundo
anticuerpo anti-antgeno
marcado. As pues cada
molcula de antgeno
estar unido a un
anticuerpo en la base que
lo retiene y un segundo
anticuerpo, al menos, que
lo marca.
Este ensayo tiene una

Prueba ELISPOt:
Una variante de la prueba ELISA, llamadaELISPOT, es
capaz de detectar cuantitativamente el nmero de clulas
en una poblacin productora de anticuerpos especficos
contra un antgeno determinado o un antgeno contra el
que se dispone de un anticuerpo especfico.

ELISA COMPETITIVO

En este mtodo, el anticuerpo de la

muestra va a competir con el
conjugado por un nmero limitado de
sitios de unin del antgeno.

Habr ausencia
muestra positiva.

de

color

en

una

EQUIPO
S

Consta de los sgtes equipos:

1. Un analizador de Elisa
2. Un lavador de Elisa
3. Un sistema dispensador de lquidos.
4. Una incubadora especializada para
las placas.

ANALIZADOR DE ELISA
Es un espectrofotmetro especializado,
que lee los resultados de una tcnica
que se utiliza para determinar
la
presencia de anticuerpos o antgenos
especficos.

 El

PRINCIPIO

sistema ptico utiliza la fibra

ptica para llevar luz hasta los
pozos de la placa, la luz que
atraviesa la muestra tiene un
dimetro entre 1 y 3 mm.
Tiene un sistema de deteccin
que recibe la energa lumnica
proveniente de la muestra, la
amplifica determina la
absorbancia y permite una
lectura que la convierte en
datos para interpretar.

LAVADOR DE
ELISA
Es el encargado de efectuar las
operaciones de lavado de los pozos,
durante
las
diferentes
etapas,
proporciona de forma controlada los
buffers
de
limpieza
y
retirar
sustancias que no participen en la
reaccin, participa entre 1 y 4 veces.

PRINCIPIO
DE
OPERACIO
N

Tiene 4 subsistemas:
Subsistema de control

Subsistema de
suministro

Subsistema de
extraccin

Subsistema de avance

FUNCIONAMIENTO
ENSAYO DE ELISA
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.

DEL

Acondicionamiento de la muestra
Pasar al lavador de elisa 1er lavado
Mediante el dispensador de lquidos se llenan
los pozos de las placas
Incubadora
Se saca la placa y se voltea sobre papel filtro
Agregar el conjugado
Realizar el 2do lavado x 5 veces

8. Agregar el revelador o TMB x 15

minutos y se coloca en la oscuridad.
9. Llevar al lector de Elisa.