III. La ruta de reciclaje.

Algunos componentes de membrana se internalizan, pero una vez

liberada la carga de unin son devueltos a la membrana
plasmtica para volver a ejercer su funcin.
Esta ruta la emplean la mayora de los receptores de membrana
Es una combinacin de la ruta endoctica (internalizacin) y de la
secretora (vuelta a la superficie celular).
El trfico secretor y endoctico estn muy equilibrados en cuanto a
la cantidad de membrana intracelular. Cualquier alteracin en este
equilibrio comporta anomalas que comprometen la supervivencia
de la clula.

Destino de las protenas

endocitadas
reciclado de receptores
reciclado de receptores y sus ligandos
desensibilizacin y reciclado de receptores
degradacin en lisosomas
La diferencia en los receptores incorporados en la clula mediante
el proceso de endocitosis mediada por receptor es que una vez
que liberan las molculas que transportaron y que abandonan el
endosoma pueden dirigirse a diferentes destinos. No como ocurre
durante la fagocitosis en donde todo el material que entra a la
clula termina en los lisosomas para su degradacin

Reciclado de receptores
Un ejemplo de endocitosis mediada por receptor es la
incorporacin de colesterol en clulas de mamferos.
Este descubrimiento fue realizado por Michael Brown y
Joseph Goldstein, quienes estudiaban la internalizacin
del colesterol en clulas del torrente sanguneo. Dicho
estudio fue galardonado con el Premio Nobel en
Medicina en el ao 1985.

El colesterol sanguneo es transportado en

complejos lipoproteicos = partculas de LDL
(low density lipoprotein)

Cuando las clulas necesitan colesterol para la sntesis de

membrana, sintetizan el receptor de LDL que es una protena de
transmembrana. Estos receptores se localizan en las
invaginaciones (pits) de clatrina y al unir LDL comienza la
endocitosis.
Una fraccin de la membrana endocitada retorna a la superficie (reciclado). El
receptor de LDL es reciclado mas de 100 veces antes de ser degradado. Cada ciclo
dura ~10-20 min.

Reciclado de receptores

Las partculas de colesterol LDL se unen a

receptores de LDL en la superficie de las
clulas y son endocitadas en vesculas de
clatrina. El receptor LDL posee la seal de
endocitosis NPXY la cual es reconocida por
partculas AP2 y clatrina.
Los receptores endocitados se disocian de
las partculas LDL en el medio cido de los
endosomas tardos y son reciclados a la
superficie.

N: Asn
P: Pro

Y: Tyr

Las partculas de LDL son transportadas al lisosoma en

donde enzimas digestivas las degradan en aminocidos,
colesterol y cidos grasos. Luego el colesterol es liberado al
citoplasma donde es utilizado para la sntesis de membrana
nueva.
Cuando se acumula colesterol en la clula se apaga la
sntesis del receptor LDL dentro de la clula.

Reciclado de
receptores y ligandos

Las clulas incorporan hierro a travs

de la endocitosis mediada por receptor
de ferro-transferrina. En el medio cido
de los endosomas tardos el hierro se
disocia y se exporta al citosol.
La apotransferrina y su receptor
permanecen unidos y son reciclados a
la superficie, donde se disocian.

Desensibilizacin y reciclado
de receptores

EGF

auto
phosphorylation

Los receptores unidos al EGF se

dephosphorylation
autofosforilan y activan vas de sealizacin
intracelulares.
Los receptores se endocitan en vesculas
con clatrina.
En los endosomas tempranos una fraccin
de los receptores son defosforilados y
reciclados a la superficie.

EGF: epidermal growth factor

Transporte de receptores y ligandos a lisosomas

Endosomas tempranos que transportan protenas endocitadas (azul) y vesculas que transportan
protenas lisosomales desde el trans-Golgi (rojo y verde) se fusionan con endosomas tardos. Las
protenas a ser degradadas se internalizan por invaginacin formando cuerpos multivesiculares.
Eventualmente, los cuerpos multivesiculares se fusionan con lisosomas.

la internalizacin de receptores
tirosina kinasas (EGFR) en los
cuerpos multivesiculares impide
su reciclado y termina la
sealizacin.

citosol

La mono-ubiquitinilacin acta como una seal

de direccionamiento al lisosoma
Receptores tirosina kinasa activados (ej. EGFR), E-caderinas, etc. pueden ser monoubiquitinados por E3ubiquitina ligasas (ej. Cbl). Esto constituye una seal que es reconocida por protenas adaptadoras (ej. Eps15,
Hrs, STAM) que contribuyen a concentrar los receptores en cuerpos multivesiculares (MVB) y a su degradacin
en lisosomas.

Acoplamiento entre exocitosis y endocitosis en el terminal pre-sinptico

1. Los neurotransmisores (rojo) son almacenados en vesculas sinpticas que se acumulan ancladas a la membrana.
La fusin de membranas es prevenida por la protena sinaptotagmina.
2. En respuesta a potenciales de accin, se abren canales de calcio, sinaptotagmina une calcio y altera su conformacin,
permitiendo la fusin de las vesculas y la liberacin de los neurotransmisores al espacio sinptico.
3. Endocitosis acoplada recicla los transportadores de neurotransmisores.
4. Recarga de las vesculas con neurotransmisores.
Lodish et al, MCB2004

Coordinacin de eventos de endocitosis y exocitosis

La unin de insulina a su receptor genera seales intracelulares que promueven la translocacin
de endosomas especializados conteniendo GLUT4 a la membrana plasmtica. La expresin del
GLUT4 en la superficie promueve la captacin de glucosa.
adipocito o clula muscular

GLUT4

GLUT4

endosoma de
reciclado

II. Ruta endoctica

3. La internalizacin mediada por caveolas.
Es una ruta de internalizacin que emplea unas
vesculas que contienen mayoritariamente una
protena denominada caveolina. A travs de estas
vesculas se captan las molculas de pequeo
tamao y de naturaleza hidrofbica como el
colesterol y el cido flico y parecen estar
implicadas en la sealizacin intracelular.

Introduccin
al., 2004; Nixon et al., 2005; Hernandez-Deviez et al., 2006). La explicacin que proponen Parton et al. (2007) es que en ausencia de
caveolina-1 no se modifica la ruta de sntesis no caveolar, sin embargo los mutantes que quedan retenidos en el complejo de Golgi,
alteran ambas rutas de transporte a la membrana plasmtica ya que retienen los componentes de ambas vas.

2.4

Funcin de las caveolas y caveolinas

La funcin de las caveolas ha sido un gran punto de debate. Se les ha implicado en numerosos procesos celulares como el
trfico de membranas, la transduccin de seales, el transporte de sustratos y la homeostasis lipdica.
A partir de estudios realizados con ratones KO de caveolina-1, se ha observado que estos ratones tienen afectados el sistema
cardiovascular y pulmonar, y presentan algunas alteraciones metablicas (Razani et al., 2001a; Razani and Lisanti, 2001b; Razani et al.,
2002a; Razani et al., 2002c), aunque son totalmente viables. As, algunos autores afirman que las caveolas no son esenciales, y ms
que tener una funcin especfica, podran ser consideradas como orgnulos multifuncionales con un papel fisiolgico que vara segn el
tipo celular y de los requerimientos celulares (van Deurs et al., 2003).
2.4.1

Papel de las caveolas en el trfico de membranas

2.4.1.1 Endocitosis mediada por caveolas

Las caveolas de la superficie celular forman unidades funcionales altamente estables generadas por la oligomerizacin de
caveolina y su asociacin con protenas y lpidos ,caveolina y las caveolas son relativamente inmviles ,aunque esta movilidad aumenta
considerablemente tras la oxidacin o la reduccin de colesterol de las membranas
Sin embargo, a las caveolas se les ha asignado un papel en la endocitosis (. As, se ha visto que protenas unidas a GPI cuando
son tratadas con anticuerpos
La dinamina, una GTPasa reguladora implicada en la endocitosis, es reclutada transitoriamente en las caveolas cargadas con el
virus SV40 y participan en la internalizacin de estas estructuras (Henley et al., 1998; Oh et al., 1998; Pelkmans et al., 2002a). Este
proceso de internalizacin requiere el reclutamiento de citoesqueleto de actina en la regin que se va a internalizar, as como de la
activacin de tirosina quinasas Src, y la activacin de PKC.
Una vez internalizadas, las vesculas caveolares, que mantienen su estructura tras la endocitosis, pueden dirigirse a unos
orgnulos llamados caveosomas y fusionarse a ellos de una manera Rab5 independiente o bien dirigirse a los endosomas tempranos
de manera dependiente de Rab5. Los caveosomas son

13

Introduccin
unas estructuras citoplasmticas preexistentes que tienen pH neutro a diferencia de los endosomas tempranos, tardos y los lisosomas
que tienen pH cido, estn enriquecidos en caveolina-1, y carecen de marcadores de otros orgnulos endocticos (EEA1 o el receptor
de transferrina, caractersticos de la endocitosis mediada por clatrinas) o biosintticos.
Desde los caveosomas las partculas endocitadas se dirigen al retculo endoplasmtico (SV40) o al complejo de Golgi (toxina
colrica), o bien pueden pasar a los endosomas y seguir la ruta de degradacin de los lisosomas, mientras que las vesculas caveolares
portadoras se reciclan y vuelven a la membrana plasmtica. Estas vesculas caveolares tambin pueden reciclarse y fusionarse de
nuevo con la membrana plasmtica sin pasar por ningn orgnulo intermediario en un proceso altamente regulado
Aunque, como hemos visto, hay muchos agentes que pueden causar la internalizacin de las caveolas, hay mecanismos
comunes implicados en este proceso donde participan la dinamina, Src quinasas, la protena quinasa C (PKC) y el reclutamiento de
actina.
As, la internalizacin de las caveolas est facilitada por la desestructuracin del citoesqueleto de actina, inhibida por inhibidores
de PKC y tirosina quinasas como la estaurosporina y genistena, y activada por inhibidores de fosfatasas como el cido ocadaico y el
vanadato.
Como hemos mencionado anteriormente las caveolas son altamente inmviles y aunque se puede inducir su endocitosis, no
estn implicadas en la endocitosis constitutiva de la clula .

14

Introduccin

Figura 7
Modelo de trfico intracelular. Endocitosis dependiente de vesculas de
Adaptado de (Rajendran and Simons, 2005) y (Parton et al., 2007).

clatrina y endocitosis dependiente de caveolas.