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Zegarra Davila Gianina

Sistemas Automatizados en Microbiologa


que permiten determinar la
Identificacin de bacterias y levaduras
as como la Susceptibilidad
antimicrobiana .

VITEX System

MicroScan WalkAway

Phoenix

Sensitre ARIS

Mini API

Mtodo de
deteccin

Colorimetra

Equipo

Vitek

Fabricante

bioMerieux

Turdibimetria

MicrosCan
Unisept
Pasco
Sceptor
Phoenix

Fluorometria

Vitek 2

Dade
API
DIFCO
Becton Dickinson
Becton Dickinson

bioMerieux

El sistema VITEK es un sistema automatizado de


identificacin bacteriana y estudio de sensibilidad
antimicrobiana.
La identificacin de las bacterias se basa en la inoculacin
de una suspensin de microorganismos en tarjetas con
determinados paneles de reacciones bioqumicas.

La sensibilidad antimicrobiana se lleva a cabo en forma


similar a travs de tarjetas que contienen diluciones
estandarizadas de distintos antibiticos
correspondientes a los puntos de corte de sensibilidad
establecidos
por NCCLS

El sistema Vitek es un sistema automatizado, fabricado por bioMerieux,


Est basado en el principio bsico de fotometra.
Las bacterias utilizan un substrato que produce un cambio de color y
densidad ptica. Estos cambios son detectados por diodos emisores de luz y
detectores fototransistores.
Este sistema est compuesto por un mdulo de filtro-sello, una incubadora
con lector, un mdulo de computadora, una terminal de datos y una
impresora. Este sistema es capaz de identificar bacterias gram positivas y
gram negativas, anaerobios y levaduras. Tambin realiza pruebas de
susceptibilidad antimicrobiana.
Es capaz de realizar Tamizajes de orina con enumeracin e identifi
-cacin.
El sistema identificar Enterobacteriaceae en 4-6 horas y bacilos que no
fermentan en 6 a 18 horas.

Presenta base de datos con informacin que


incluye : Lista de 470 especies (Bacterias y
levaduras) lista para controles de calidad con
cepas ATCC y lista amplia de antibiticos.
Utiliza un panel, que es una placa de 96
pocillos que contiene en forma deshidratada
de 20 a 32 pruebas bioqumicas para la
Identificacin (ID) y 17 a 33 antibiticos
para MIC o BP

Estos instrumentos estn basados en un


principio de fotometra- fluorometra. Estn
disponibles tres sistemas:
TouchSCAN-SR:

Lector de panel semiautomatizado con


sistema de manejo de datos. El lector leer el panel
manualmente y el sistema proveer automticamente
una interpretacin.
AutoSCAN-4: Lector de panel automatizado con sistema
de manejo de datos. El usuario carga el panel y el
sistema leer e interpretar el panel automticamente
AutoSCAN- WA: Sistema completamente automatizado
con automatizacin
libre de supervisin y sistema de manejo de datos.

Tipos de paneles:
- Cromognicos Convencionales:(Gram

positivos y Gram negativos.( ID 18 a


24hr).
-Principio colorimtrico: Desarrolla colores
en la serie bioqumica y turbidez en el
antibiograma.

- Cromognicos rpidos:

Permite la
identificacin en 04 horas, mide la actividad
enzimtica formadas en el aislamiento
primario: Haemophilus y Neisseria,
levaduras, anaerobios.
Rpidos: fluoromtricas de 6 a 8 horas.

AutoScan-4

Equipo semiautomatizado para identificacin


bacteriana y susceptibilidad antimicrobiana
Utiliza metodologa colorimtrica
Espectrofotmetro modificado con 6
longitudes de onda y sistema de fibras
pticas para la lectura de los paneles en
apenas 5 segundos

Equipo automatizado para identificacin


bacteriana y susceptibilidad antimicrobiana
Presenta dos metodologas: colorimtrica
y fluoromtrica
Contiene incubadora, pipeta de reactivos ,
lectora fotomtrica e impresora.
Adems lectora de cdigo de barras que
identifican al panel en cualquier posicin.

Capacidad de procesar simultneamente


40 paneles (Walkaway40) o 96 paneles
(Walkaway 96).

Los paneles conteniendo pocillos


mltiples son inoculados manualmente
con un dispositivo especial y luego
colocados en la incubadora, el sistema
dispensa reactivos y realiza lecturas
peridicas

Los equipos vienen acompaados de un


completo programa de Gerenciamiento
de datos denominado : LabPro

Realiza bsquedas
multparamtricas.

Informes epidemiolgicos
completos.

Flexibilidad

Supresin de antibiticos

Finalizacin automtica.

Copia de seguridad en disco

Normas CLSI

Para el Paciente:

Resultados rpidos: Esencial para pacientes de


enfermedades criticas, terapias mas precisas,
reducir el tiempo de estada

Alternativas de antibiticos .

Reducir combinacin de terapias.

Reducir la Infecciones Intrahospitalarias.

Automatizacin.
Una buena carga del trabajo (ID+ Susceptib)
lo realiza un solo equipo
Soporte cientfico y tcnico.
Utiliza un software experto que revisa los
datos generados , aplicandose reglas para
detectar fenotipos o patrones de resistencia
imposibles o inusuales y permite reconocer
errores tcnicos de los operadores.

Farmacia
Relaciona resultados microbiolgicos con el
record de farmacia del paciente.

Favorece la reduccin de gastos por


antibiticos.

Control de Infecciones Intrahospitalarias:


Datos epidemiolgicos con estadsticas.

Monitoreo de las IIH y de la resistencia


microbiana.

Hospital:

Mejorar calidad en el cuidado del paciente.

Reducir el gasto de antibiticos.

Reducir el tiempo de estada del paciente.

Reducir las infecciones adquiridas en el hospital.

Cuerpo Mdico:
Resultados precisos de Identificacin y

Antibiograma.

Recomendaciones para tratamiento


emprico basados en antibiogramas
especficos del hospital.

Muestra

Sistema
Automatizado
Softward
experto
Dato
s
Beneficios

Mdicos/Comit
de Infec IH

Paciente

Lab Microbiol
WA/96

Farmacia

Se debe todava aislar las bacterias y


preparar una suspensin bacteriana para
el inculo.

Puede ser ms caro el uso de insumos


descartables.

Utiliza baterias de sensiblidad con


antimicrobianos fijos, debiendo
obligadamente adoptarse algunos de los
paneles.

Incapacidad de testar todos los grupos


bacterianos clnicamente importantes.
Sobre los resultados de las pruebas de
susceptibilidad se han reportado diversos
problemas, los fabricantes deben incluir
sus limitaciones para algunas
combinaciones droga - microorganismo.
El control de calidad es dependiente del
uso de cepas ATCC especificadas por el
fabricante, adems NCCL no provee
estndares al respecto.

M ANUALES

S IM P L E S

C O N C E N T R A C IO N

M E D IO L IQ U ID O

L IS IS C O N C E N T R A C IO N

M E D IO B IF A S IC O S

L IS IS C E N T R IF U G A C IO N

IN D IC A D O R E S D E G A S

L E C T U R A D E C O 2 P R E S IO N D E G A S E S

R A D IO M E T R IC O S N O R A D IO M E T R IC O S
IN T E R M IT E N T E S

C O N T IN U O S

Aparecieron en USA hace tres dcadas.

BACTEC 460 (Becton Dickinson


Biosciences), el medio contena CH con
C14, al desarrollar el mcog, los
substratos eran utilizados con el C14 y
liberado como CO2, que se detectaba.

Bactec 460 (Becton Dickinson) radiomtrico fue el primer


sistema comercial de Hemocultivos automtico. Utiliza substratos
marcados con 14C que al ser metabolizado por los microrganismos
libera 14CO2al medio, que difunde a la atmsfera del frasco. En
esta atmsfera se mide peridicamente el nivel de 14CO2 y se
expresa como un ndice de crecimiento cuando se compara con los
niveles de CO2 en frascos de control.
- La lectura est totalmente automatizada y se realiza por medio de
una cabeza mvil provista de dos agujas que perforan los tapones
de goma de los frascos. Su principal inconveniente es el manejo y
posterior eliminacin de los residuos radiactivos. En la actualidad
ha sido superado por otros sistemas y slo se utiliza para el cultivo
de micobacterias.

DETECCION DE C02 POR METODO


RADIOMETRICO Y NO RADIOMETRICO.

LECTURAS DIARIAS POR 7 DIAS


SUBCULTIVOS EN NEGATIVOS
INNECESARIOS.

DETECCION PRECOZ.

MONITOREO CONTINUO.

AGITACION E INCUBACION CONTINUAS.

AUTOMATIZADO

PROTOCOLOS DE 4-5 DIAS.

MENOR MANO DE OBRA

RECUPERACION MAS RAPIDA.

A partir de 1990 aparecen los Sistemas de


Monitoreo Continuo de Hemocultivos.
El sistema Bact/Alert (bio Mriux) con
capacidad para 240 frascos y detecta CO2 de
manera colorimtrica.
El sistema ESP (Trek Diagnostic Systems),
monitorea los cambios de presin en el frasco
para gases como: O2, H2, N y CO2, producidos
o consumidos por los microorganismos.

Presenta tres formatos el : 9240 (240


fcos), 9120 (120 fcos) y 9050 (50fcos).
En la base de cada frasco existe un sensor
de CO2 y mediante un mecanismo de
sensibilidad fluorescente detecta el
crecimiento del microorganismo al generar
CO2.
Tiene varios medios :
- Aerbico y Anaerbico: caldo de caseina
soya con resinas removedoras de antibiticos

- Medios peditricos con resinas


removedoras de antibiticos.
-Medio Myco/ F- lytic diseado para
mejorar la deteccin de hongos y
mycobacterias pero tambin soporta el
desarrollo de bacterias patgenas.
- El sistema realiza lecturas cada 10 min.
-Alarmas de positividad luminosa y
sonora

Fundamento:
- Presenta 240 fcos.
Cuando
los
microorganismos
estn
presentes, metabolizan los nutrientes del
medio de cultivo, produciendo CO2. Un tinte
en el sensor reacciona con el CO2. Este
mide la cantidad de luz que es absorbida
por un material fluorescente en el sensor. El
fotodetector del instrumento mide el nivel
de fluorescencia, lo cual corresponde a la
cantidad de CO2 producido . Esta medicin
es interpretada por el sistema de acuerdo a

+ -

a) Falso Positivo: Se refiere a las botellas que


el instrumento llama positivas, pero que no
muestran microorganismos en el frotis ni en el
subcultivo.
b) Falso Negativo: Ocurre cuando el
instrumento no detecta crecimiento, pero el
organismo crece en el subcultivo.

Fundamento: El sistema utiliza un sensor colorimtrico y


una luz reflejada para monitorear la presencia y produccin
de CO2 disuelto en el medio de cultivo. Si existen
microorganismos en la muestra, se genera CO2 producto de
que los microorganismos metabolizan los substratos del
medio de cultivo. Debido a esto, el sensor gas-permeable
instalado en el fondo de cada frasco de cultivo cambia de
verde a amarillo, indicando que est positivo. Esta
positividad es captada por el sensor del instrumento, que
activa una alarma y se enciende una luz en la celda del
frasco respectivo.

1. La act metabolica de
los organismos producen
C02.
2.El CO2 reacciona con el
tinte del sensor.
3.LED , modula la act
fluorescente del sensor .
El fotodetector mide el
nivel de flourescencia.
La informacion es
emitida a la
computadora ,en la

cual se aprecia cual


se desarrollo.

SISTEMA

INDICADOR DEL
CRECIMIENTO

MECANISMO
DE DETECCION

MONITORIZA CION CONTINUA

BACTEC 460

Produccin de
CO2

Radiomtrico

NO

BACTEC 660

Produccin de
CO2

Infrarrojos

NO

BACTEC 9240

Produccin de
CO2

Fluorescencia

SI

Bact/Alert

Produccin de
CO2

Colormetro

SI

Vital

Produccin de
CO2
Cambio de pH,
potencial Redox.

Fluorescencia

SI

Sistema

Nro de
Frascos :

Max.
unidades
de frascos

Frecuencia
de lectura
(minutos)

Tipo de
agitacin/ve
locidad

Bactec 9240

240

5(1200)

10

Balanceo/30a

Bactec 9050

50

Bac/Alert

120-240

6(1440)

10

Balanceo/34a

Vital

200-400

3(1200)

15

Sinusoidal/15
0a

ESP

128-384

5(1920)

10

12(aerobios) Rotacin/160
24(anaerobi
os)

CALDO
DE
CULTIVO

VOLUM.
DEL
CALDO
(ml)

Volum.de
sangre
recomendado
(ml)

SCD
SCD
SCD
SCD
SCD
SCD

40
40
25
25
40
40

SCD
SCD
BHI
BHI
BHI

SCP
SCP

SISTEMA

Aerobio/F
Anaerobio
Plus aerobio
PLUS
anaerobio
Litic/
Anaerobio F

Bact /alert
AEROBIO
ANAEROBIO
PEDIC/BAC
FAN/aerobio
FAN
/ANAEROBI
O

Vital
AEROBIO
Anaerobio

0.025%/SPS
0.025%/SPS
0.050%/SPS
0.O50%/SPS
0.020%/SPS
0.035%/SPS

Atmsfera

5
5
10
10
0.5-3
10

1:8
1.8
1:2-5
1:2-5
1:80-1:13,3
1:4

CO2aire
CO2N2
CO2aire
CO2N2
CO2+aire
CO2+N2

No
No
No
No
No

40
40
20
40
40

10
10
4
10
10

1:4
1:4
1:5
1:4
1:4

CO2aire
CO2N2
CO2N2

Si
No
Si
Si
No

40
40

10
10

CO2+aire
CO2+N2

CO2+mezcla
O2
cerebro-corazn;Co2+
SCP:mezclaN
Caldo

1:4
1:4

: SCD: Caldo soja-casena; BHIno: Caldo


2
casena; PP: Proteosa-peptona.
b
: SPS: Polianetol sulfonato sdico; TSC: Citrato trisdico
a

Concentr
acin/
anticoagu
lanteb.

DILUCION

Bactec
9240

Ventil
a
-cin
reque
ri-da.

No
No

0.035%/SPS
0.020 %SPS
0.050%/SPS

0.025%SP
S
peptona 0.O25%SP
sojaS

POSITIVOS
Se realiza el frotis por
Gram y transplante a Agar
sangre y agar chocolate.
Si el frotis
del frasco de
hemocultivo
revela
la
presencia de microorganismo
se hace un informe escrito en
el que se indica la morfologa
y
reaccin al Gram del
microorganismo, anotando que se
continuar con la identificion
etiolgica y el antibiograma.

NEGATIVOS
El formulario de
hemocultivo se reporta
y enva a la sala como
Negativo en 96 o No
hubo crecimiento en
96h, si se cumple sta
condicin.

Mayor sensibilidad que los mtodos


convencionales.

Rapidez en el diagnstico
( 5 das)

Disminucin de riesgo biolgico


para el operador.

Disminucin de la contaminacin
Ahorro de trabajo (cdigo de barras)

Costo mayor que las botellas


convencionales.

Pueden suceder falsas alarmas,


como positivos.

Grmenes especiales , a
determinadas temperaturas.

Muchas
Gracias.
.!