Pembekuan Semen

Faktor Utama dalam proses Pembekuan :

1. Prosessing semen segera koleksi
2. Makromolekul yang melindungi sperma
terhadap kejutan dingin sebelum
pembekuan
3. Tingkat Pendinginan dan waktu pra
pembekuan
4. Krioprotektan khusus
5. Tingkat Pembekuan
6. Temperatur Penyimpanan
7. Kecepatan Thawing

Faktor pertimbangan Pembekuan

Pemilihan pengencer yang tepat
Tingkat pengenceran
Tingkat pendinginan
Tingkat Thawing
Maksimal recovery rate setelah thawing
Fertilitas spermatozoa

Syarat Umum dan Zat yang

Digunakan segera setelah Koleksi
Buffer kuning telur atau susu yang

dipanaskan
Pendinginan selama 1 2 jam
Waktu pra pembekuan berbeda beda
tergantung spesies
Biasanya glycerol bervariasi lebih kurang 10
menit
dari mulai + 5 derajat C s/d -100 derajat
Celcius
Penyimpanan pd 196 derajat Celcius dalam
kontainer berisi Nitrogen cair

Prosedur Pembekuan
Semen kucing
Konsentrasi sperma 50 juta s/d 60 juta
Semen dimasukkan ke dalam straw 0,25 ml.
Equiblirasi selama 60 menit di dalam refrigerator

terprogram pd 5 derjat Celcius

(rata-rata kecepatanan pendinginan 3,4 derajat
Celcius/menit)
Kemudian ditempatkan di atas uap Nitrogen cair dg jarak 6
cm selama 15 menit(rata-rata pembekuan 0-5 menit pada
14 derajat Celcius/menit, 5-10 menit menit pada 4,6 derajat
C/menit, 10-15 menit pada 14 derajat Celcius/menit)
Straw kmdn ditenggalamkan ke dalam cairan nitrogen cair
dan disimpan pada temperatur -196 derajat Celcius.

 Semen yang diencerkan dg pengencer tris-citric acid pada

temperatur 37 C
Dengan konsentrasi 50 juta/ml
Didinginkan pd Temp 4 C selama 2 jam
Equlibrasi pada 4 C selama 4 jam
Packaging dalam straw 0,5 ml
Diuapkan di atas N2 Cair selama 10 menit
Dtitenggelamkan dalam N2 Cair (-196 C)