Nutrition
Oleh :
Andang Syarifudin
Denny Muhammad F.
Dwiana Muflihah Y.
Nur Siti Kurniasih
Tanjung Ardo
Pendahulua
n
Tanaman transgenik (GMO) berkembang pesat
Sejak tahun 1996 tercatat 1,7 juta hektar lahan digunakan untuk menanam
tanaman transgenik => thn 2009, menjadi 134 juta hektar yang melibatkan
14 juta petani di 25 negara termasuk 16 negara berkembang.
Mayoritas tujuan awal dari tanaman transgenik generasi 1 =>
toleransi terhadap herbisida dan resistensi terhadap hama
serangga
Tanaman transgenik generasi 2 => Tanaman yang diperkaya dengan
mikronutrien (mis. Beta karoten/vitamin A).
Defisiensi vitamin A merupakan salah satu masalah kekurangan mikronutrien
yang dialami oleh 250 juta penduduk dunia dan merupakan defisiensi nutrisi
yang paling sering ditemukan di negara berkembang. => tanaman transgenik
dengan kadar provitamin A tinggi untuk memenuhi kebutuhan vitamin A yang
disebut Golden Crops, antara lain golden rice, golden maize dan golden
banana.
Padi Emas
(Golden Rice)
= Geranylgeranyl diphosphate
GGDP
Oleh :
Phytoene
desaturase
Beta-karoten
desaturase
phytoene synthase
lycopene-cyclase.
Penghambatan fungsi
enzim phytoene
synthase (PHY)
menghambat
pengubahan
phytoene dari GGDP
(precursor langsung
dari karoten pada
tumbuhan )
pengkode oleh gen phy
Katalis
pembawa 2
ikatan rangkap
Padi Emas
(Golden Rice)
Padi Emas
(Golden Rice)
Padi emas 2 menggunakan gen
yang sama pada padi emas 1,
begitu juga enzim pengkode yang
memiliki aktivitas yang sama.
Asal isolasi gen pengkode phytoene
synthase : -padi emas 2 diisolasi
dari sejenis jagung,
-padi emas 1 diisolasi dari daffodil
(Narcissus pseudonareissus)
Padi Emas
(Golden Rice)
Padi Emas
(Golden Rice)
Padi Emas
(Golden Rice)
Keluaran
dari
penelitian
ini
adalah
endosperm padi emas dengan 3 gen yaitu
yang memproduksi beta-karoten, sehingga
berwarna kuning, lebih kuning daripada padi
konvensional.
teknik
rekayasa
genetika
yang
memanfaatkan sambungan DNA dari bakteri
tanah (Erwinia uredovora) dan tumbuhan
Bakung daffodil (Narcissus pseudonarcissus)
ke dalam padi Oryza sativa.
Padi Emas
(Golden Rice)
Padi emas 2 merupakan tahapan lebih tinggi dari padi emas 1, secara
nama bulir padi tersebut mengandung precursor vitamin A yang lebih
tinggi. analisa fotometrik dengan menggunakan HPLC (highperformance liquid chromatography) yang menunjukkan adanya
karotenoid, termasuk beta-karoten, Proyek padi emas 2 menghasilkan
kenaikan karoteniod total yang lebih tinggi sekitar 80% (10 to 40
g/g berat kering) dibandingkan dengan padi konvensional ataupun
padi emas 1.
Padi biasa
Padi emas 1
Padi emas 2
Jagung Emas
(Gold Maize)
Cara???
mengekspresikangen gen crtB dan rctL Erwinia
herbicola pada tanaman jagung.
metode
Jagung Emas
(Gold Maize)
Konstruksi plasmid
rekombinan
Jagung Emas
(Gold Maize)
Jagung Emas
(Gold Maize)
Regenerasi tanaman
jagung
Jagung Emas
(Gold Maize)
T1
Korotenoid
??
Analisis
Biji tanaman T1 diekstraksi dan dianalisis dengan HPLC
mengggunakan Empower Pro software Version 1.
Tahapan penelitian
1.Kontruksi Vektor
Pisang Emas
(Golden Banana)
Segmen pengkode :
Phytoene synthase 2a dari Musa
troglodytarum x acuminata kultivar
Asupina (MtPsy2a),
Phytoene synthase 1 dari Zea mays
kultivar B73 (ZmPsy1)
Phytoene desaturase dari Pantoea
ananatis (PaCrtl),
Fungsi :
Sebagai gen yang
memfasilitasi peningkatan
kandungan provitamin A pada
pisang
Tahapan penelitian
1.Kontruksi Vektor
Pisang Emas
(Golden Banana)
Fungsi :
untuk menguji kinerja promoter
Tahapan penelitian
Pisang Emas
(Golden Banana)
1.Kontruksi Vektor
Segmen pengkode :
Phytoene synthase 2a
(MtPsy2a)
Phytoene synthase 1(ZmPsy1)
Phytoene desaturase (PaCrtl)
Gen uidA
Difusik
an
Oleh :
noplaline synthase
(Nos)
urutan pengatur
terminasi transkripsi dari
Agrobacterium
tumefaciens.
Tahapan penelitian
1.Kontruksi Vektor
Pisang Emas
(Golden Banana)
constitutive maize
polyubiquitin
promoter (Ubi)
Diuji
dengan
gen uidA
Expansin 1
promoter (Exp1)
(dari Pisang)
ACC oxidase
promoter (ACO)
( dari Pisang)
Tahapan penelitian
1.Kontruksi Vektor
Pisang Emas
(Golden Banana)
constitutive maize
polyubiquitin
promoter (Ubi)
Expansin 1
promoter (Exp1)
(dari Pisang)
ACC oxidase
promoter (ACO)
( dari Pisang)
Tahapan penelitian
1.Kontruksi Vektor
Pisang Emas
(Golden Banana)
Tahapan penelitian
2.Transformasi dan
regenerasi tumbuhan
Pisang Emas
(Golden Banana)
Tahapan penelitian
Pisang Emas
(Golden Banana)
Tahapan penelitian
4. Pengambilan dan
pemrosesan sampel
Pisang Emas
(Golden Banana)
Tahapan penelitian
4. Pengambilan dan
pemrosesan sampel
Pisang Emas
(Golden Banana)
5. Isolasi
DNA
dihomogenisa
si untuk PCR
Analisis analisis
Southern blot
melalui metode
modifikasi CTAB
Tahapan penelitian
5.Isolasi DNA
Pisang Emas
(Golden Banana)
6.Perlakuan
dengan DNAase & sintesis
cDNA
dihomogenisasi sesuai
dengan deskripsi
Valderrama-Chairez et
al.(2002).
Tahapan penelitian
7. PCR & RTPCR
Pisang Emas
(Golden Banana)
Tahapan penelitian
8. Quantitative real time
PCR
aktivasi polymerase pada suhu
95 oC selama 2 menit
Pisang Emas
(Golden Banana)
s denaturasi pada suhu
yang sama
annealing dan ekstensi
pada suhu 60 oC
Tahapan penelitian
9. Southern Blot
Pisang Emas
(Golden Banana)
Keterangan :
** = Enzim restriksi yang dipilih hanya
mampu memotong DNA pada segmen
yang tidak berhibridisasi dengan probe.
Probe didesain untuk menarget gen
MtPsy2a dan ZmPsy1
Tahapan penelitian
10.Kuantifikasi
kandungan
karotenoid
Pisang Emas
(Golden Banana)
11.Pengukuran aktivitas
promoter
Hasil penelitian
Pisang Emas
(Golden Banana)
TERIMA KASIH