Gentica Microbiana

Es la ciencia que define y

analiza la herencia o la
constancia y cambio de las
funciones fisiolgicas que
constituyen las propiedades de
los organismos.

Gentica microbiana
Introduccin.
Estructura del DNA.
Replicacin del DNA
Mutacin.
Recombinacin.
Transformacin
Conjugacin
Transduccin.

Gentica Microbiana
La unidad de la herencia es el
gen, segmento de ADN que
contiene en su secuencia de
nucletidos, informacin para
una propiedad bioqumica o
fisiolgica especfica.
Las dos funciones esenciales
del material gentico son: La
replicacin y la expresin.

Gentica Microbiana

 Las base qumica para la variacin en el

fenotipo es un cambio en el genotipo, o una
alteracin en la secuencia del ADN dentro de un
gen, o en la organizacin de los genes.
Mutacin: es un cambio permanente en la
secuencia de nucletidos de la molcula de
ADN que se transmite a la descendencia.
La variacin fenotpica se ha estudiado basada
en la capacidad de un gen para permitir la
proliferacin en condiciones de seleccin. ( gen
de resistencia a la ampicilina)

Gentica microbiana
Introduccin.
Estructura del DNA.
Replicacin del DNA
Mutacin.
Recombinacin.
Transformacin
Conjugacin
Transduccin.

 El cromosoma bacteriano es una molcula

circular de ADN que funciona como un elemento
gentico auto replicable (replicn).
Algunas cepas bacterianas tienen replicones
adicionales (plsmidos y bacterifagos).
Transposones.

Estructura del cido nucleico.

Los cidos nucleicos son
grandes polmeros constituidos
por unidades nucleotdicas que
se repiten.
Cada nucletido contiene:
Un grupo fosfato
Un azcar (pentosa o
desoxipentosa).
Un par de bases pricas o
pirimidnicas

Estructura del cido nucleico

Ribonucletido

Desoxiribonuletido

Bases Nitrogenadas

Dogma de la Biologa Molecular

Genoma eucaritico.
Mas de un cromosoma lineal.
Separados por una membrana nuclear del
citoplasma
Diploides.
Tiene mucho ADN no codificante.
ADN: cromosmico, mitocondrias,
cloroplastos.

Genoma procaritico
No tienen membrana nuclear.
Los genes bacterianos son
haploides y presentan un nico
cromosoma constituido por una
molcula circular de ADN de doble
cadena.
Cromosoma E.Coli (1,35mm)
Circular
Muchas bacterias contienen genes
adicionales en PLSMIDOS.
TRANSPOSONES: elementos
genticos mviles.

Gentica microbiana
Introduccin.
Estructura del DNA.
Replicacin del DNA
Mutacin.
Recombinacin.
Transformacin
Conjugacin
Transduccin.

Replicacin del DNA

Cromosoma Bacteriano
Transposones
Plsmidos
Bacterifagos.

Replicacin del DNA

Cromosoma Bacteriano
Transposones
Plsmidos
Bacterifagos.

Replicacin del DNA

Durante la replicacin cada banda
helicoidal del ADN sirve como un molde
para la sntesis de una nueva banda
complementaria.
Cada molcula de doble cadena de ADN
hija contiene una banda de poli nucletido
vieja y una banda nueva sintetizada.
Este tipo de replicacin del ADN se
denomina semiconservativa.

Replicacin del DNA

El DNA que se copia

para formar uno
complementario se
llama molde.

Replicacin del DNA

La reaplicacin del ADN
cromosmico en las
bacterias comienza en un
sitio especfico del
cromosoma llamado locus
ori, una regin del DNA
unida a la membrana
celular.
La replicacin es
bidireccional.

ENZIMAS
1) Helicasas.( separa las dos hebras)
2)RNA pol DNA dependiente.(primer)
3)DNA pol. (adicionan nucletidos).Tipo III
4) DNA pol I ( con actividad exonucleasa).
5) DNA ligasa (une los fragmentos de DNA)
6) Topoisomerasa. Relaja DNA superenrollado.

Replicacin del DNA

Replicacin del DNA

Cromosoma Bacteriano
Transposones
Plsmidos
Bacteriofagos.

Transposones
Son segmentos de DNA que pueden
moverse de un sitio a otro en una molcula
de DNA.(transposicin).
La insercin de un transposn a menudo
interrumpe la secuencia lineal de un gen y
lo inactiva.(mutacin)
Principal enz. Transposasa.
Dos tipos:
Transposicin no replicativa
Transposicin replicativa

Replicacin del DNA

Cromosoma Bacteriano
Transposones
Plsmidos
Bacteriofagos.

Plsmidos
Los plsmidos son replicones que se mantienen como
elementos genticos distintos, extracromosmico en las
bacterias.
La mayora son molculas doble cadena, circular.
Los plsmidos estrechamente relacionados no pueden
mantenerse de forma estable en la misma bacteria
hospedero (incompatibles).
Los plsmidos conjugativos codifican funciones que
promueven la transferencia de plsmido de una bacteria
donante a otra receptora.
Otorgan generalmente propiedades como resistencia a
antibiticos, produccin de toxinas.
La replicacin es semejante a la replicacin cromosmica.

Genetica microbiana
Introduccin.
Estructura del DNA.
Replicacin del DNA
Mutacin.
Recombinacin.
Transformacin
Conjugacin
Transduccin.

Mutacin
Es un cambio hereditario en la secuencia ADN
que constituye el genoma de un organismo.
Mutante.(ejemplo: His+ o His -)
Las mutaciones espontneas en las bacterias
son raras, ocurren con una frecuencias de 10-8
a 10-6 .
Las mutaciones pueden ocurrir por:

sustituciones (en la replicacin).

Supresiones
Inserciones (transposones o fagos)
Reordenamiento de bases.
Reversiones.

Mutacin
Sustituciones;
Pueden ser causadas
por apareamiento
errneo entre bases
complementarias
durante la replicacin.
Toda sustitucin
produce un cambio en
el fenotipo?

Supresiones e inserciones.
Supresiones o deleciones: son mutaciones en
las que se ha eliminado una regin del DNA.
Algunas deleciones son tan grandes que pueden
afectar a varios genes.
No son reversibles salvo por recombinacin gentica.
Puede ser causado por dao al DNA.

Inserciones: cuando se aaden nuevas bases al

DNA. Errores que ocurren en el proceso de
recombinacin. Son elementos transponibles.
Pueden ser micro o macro deleciones o
inserciones. Dependiendo del nmero de bases
afectadas.

Reversiones
Las mutaciones puntuales son reversibles.
Un revertiente se define operativamente
como una cepa en la que aparece
restaurado el fenotipo silvestre que se
perdi en el mutante.
Dos tipo:
Revertientes de un mismo sitio o verdaderas.
Revertientes de segundo sitio o supresoras.

Mutgenos
Agentes qumicos, fsicos o
biolgicos que pueden
inducir mutaciones.
Qumicos: Algunos son
anlogos de bases que se
parecen estructuralmente a
las bases pricas y
pirimidnicas. Pero muestran
propiedades de
apareamiento errneas.

Mutgenos
Biolgicos:
Transposones.
Bacterifagos

Fsicos:
Radiacin:
No ionizantes: Luz UV 260nm causa dmeros de pirimidina.
Ionizantes. Atravs de la accin de los radicales libres.

Mutagnesis dirigida:
No son al azar utilizan la tecnologa de DNA recombinante.

Gentica microbiana
Introduccin.
Estructura del DNA.
Replicacin del DNA
Mutacin.
Recombinacin.
Transformacin
Conjugacin
Transduccin.

Recombinacin gentica
Se define por recombinacin al proceso
en que tenga lugar la formacin de un
nuevo ADN a partir de molculas
destruidas, de manera que la informacin
gentica procedente de cada molcula de
ADN original estar presente en las
nuevas.
Implica un intercambio fsico de material
gentico entre elementos genticos.

 1) Ruptura del DNA (enz

nucleasa)
2) Protena de unin al DNA
(SSB)
3) Rec A: se una al fragmento
monocatenario y facilita la
formacin del complejo).Invasin
de cadena.
4) Formacin de un
heteroduplex. Cada cadena esta
formado por un cromosoma
diferente.
Tambin participan enz:
nucleasas, ligasas y
polimerasas.

Recombinacin gentica
La recombinacin gentica en procariotas
puede observarse a travs de 3 procesos
diferentes:
Transformacin. (DNA libre)
Transduccin. (virus)
Conjugacin. (Plsmidos)

Recombinacin Gentica

Gentica microbiana
Introduccin.
Estructura del DNA.
Replicacin del DNA
Mutacin.
Recombinacin.
Transformacin
Conjugacin
Transduccin.

Transformacin gentica.
Es un proceso por el que el DNA libre se
incorpora en una clula receptora y lleva a
cabo un cambio gentico.
De los tres procesos, de recombinacin
gentica, fue el mas importante ya que
suministr la primera evidencia de que el
ADN es el material gentico.(Griffith 1920)

Transformacin gentica
Competentes: una clula capaz de tomar una
molcula de DNA y ser transformada.
Solo algunas cepas son competentes y esta
capacidad es heredable y regulada por distintas
protenas.
Hay diferentes formas de incorporar DNA.
Algunas Gram slo incorporan DNA doble
cadena (Haemophilus).
Gram +, slo DNA simple cadena.
(Streptococcus y Bacillus).

 Pasos:
1) El DNA se una a la
superficie celular por una
protena de unin a DNA.
2) Acta una nucleasa.
3) Se asocia a protenas
especficas de
competencia.
4) Acta la Rec A.

Transformacin gentica
Si las bacterias son transformadas con
ADN extrado de un virus bacteriano, este
proceso se conoce como transfeccin.
Competencia inducida.
Altas concentraciones de iones calcio y luego
se mantiene en fro.
Electroporacin.

Gentica microbiana
Introduccin.
Estructura del DNA.
Replicacin del DNA
Mutacin.
Recombinacin.
Transformacin
Conjugacin
Transduccin.

Conjugacin
Plsmidos:
Son elementos genticos que se
replican independientemente del
cromosoma del hospedador.
No tienen una forma extracelular.
Mayora DNA bicatenario.
Se replican de manera similar al
cromosoma.
Pueden estar desde 1 o 3 copias
hasta mas de 100 en una misma
clula.
Los plsmidos relacionados son
incompatibles.
Una de las principales caracterstica
es la de otorgar resistencias a
distintos tipos de antibiticos.

Conjugacin
Es un proceso de transferencia gentica que
requiera contacto clula a clula.
Hay una clula donadora (macho) que contiene
el plsmido conjugativo, y una clula receptora
(hembra) que carece de el.
En E.coli el plsmido F codifica para pelos F.
Se conjuga por replicacin circulo rodante.
El DNA se replica simple cadena y forma la
segunda cadena en la cepa receptora.

Conjugacin con Cepas Hfr.

Gentica microbiana
Introduccin.
Estructura del DNA.
Replicacin del DNA
Mutacin.
Recombinacin.
Transformacin
Conjugacin
Transduccin.

Transduccin
En la transduccin el DNA se transfiere el DNA
de una clula a otra por medio de virus.
2 tipos:
Transduccin generalizada.
Transduccin especializada.
La partcula vrica transductora, en ambas formas, es
normalmente defectiva como virus, ya que algunos
genes vricos necesarios estn reemplazados por
otros.

Fin