APLICADA AL LABORATORIO
DE MICROBIOLOGIA
CONTENIDOS
I. CONCEPTOS BASICOS INTRODUCTORIOS
A. Biosntesis de cidos nucleicos: replicacin, transcripcin.
B. Biosntesis de protenas: traduccin.
C. Marcos de lectura abiertos. Operones y regulones.
CRONOLOGA
Gentica AM
y DM
Mendel 1866
GENTICA AM
GENTICA DM
LA GENTICA Y
LOS GENES......
ADN o PROTENAS?
.en busca del material hereditario.
Que caractersticas debera presentar
el material hereditario?
Perpetuarse (replicarse)
Manifestarse (expresarse)
Cambiar (mutar)
Combinarse (recombinarse)
1865
1865
1865
Colonias Rugosas
Colonias Lisas
Transformacin de
Streptococcus pneumoniae
Clulas L
vivas
Bacteria
Inyeccin
Resultados
Clulas L
Clulas R muertas por
vivas
calor
cpsula
factor de
transformacin
1865
Oswald Avery
Colin MacLeod
Maclyn McCarty
1865
Bacterifagos
1865
AT
GC
1865
Rosalind Franklin
Film
fotogrfico
Fuente de rayos X
DNA cristalizado
Maurice Wilkins
1865
1865
1865
QUE ES EL ADN???
POLMERO LARGO,
NO RAMIFICADO,
COMPUESTO POR
CUATRO TIPOS
DE SUBUNIDADES
Bases nitrogenadas
Se combinan con
azcares y fosfatos
DESOXIRIBONUCLETIDOS
Nucletido=base+azcar+fosfato
Nuclesido=base+azcar
MONMERO
DIRECCIN
(5a 3)
5
Doble hebra
Antiparalela
3
ESTRUCTURA PRIMARIA
Apareamiento:
A-T
G-C
Polmero uniforme
10 bases por
vuelta
Surco menor
Surco mayor
ESTRUCTURA SECUNDARIA
REGION
REGULATORIA
Codn de iniciacin
Codn de terminacin
1865
ADN en Procariotas
ESTRUCTURA
TERCIARIA
Cromosoma bacteriano
ADN doble cadena (1mm long)
circular
cerrado
Condensado y ordenado (supercoiled o superenrollado)
1865
Plsmidos en Procariotas
Tamao de 1 a 400Kb
Cantidad variable de copias en una clula
Origen de replicacin propio
Pueden movilizarse a otros genomas
Puede integrarse al cromosoma bacteriano
1865
ADN en Eucariotas
1865
Semiconservativa:
dos hebras generan una copia cada
una
1865
Iniciacin
Iniciacin
1865
iniciador
Sntesis de primers de
ARN
Iniciacin de la
replicacin
Unin de
iniciador
Horquillas se mueven en
direccin opuesta
Formacin de
dos hebras de
replicacin
ADN circulares
(Procariotas)
Origen de replicacin (oriC)
ADN lineales
(Eucariotas)
Varios replicones
Elongacin
1865
ADN polimerasa
III
ADN primasa
ARN primer
ADN ligasa
Hebra
retrasada
Frag. de Okazaki
Hebra lder
Topoisomerasa
Proof-reading
DNA polimerasa comete un error cada 108 1010 bases
Incorporacin de G X A
Incorporacin de A
1865
Terminacin
Fragmentos de Okazaki
Ligasa
Cuando una ADN polimerasa hace contacto con el extremo de otro fragmento
de Okazaki contiguo, el ARN cebador de este es eliminado y otra enzima, la ADN ligasa,
conecta los dos fragmentos de Okazaki de ADN recin sintetizado, catalizando
las reacciones de condensacin que unen los grupos fosfato y azcar de los
nucletidos contiguos y as, una vez unidos todos los fragmentos de Okazaki
se completa la doble hlice de ADN.
1865
ARN
PROTEINAS
Transferencia de informacin
biolgica
1865
El ADN y el ARN
cidos nucleicos
Macromolculas
Polmeros (monmero de nucletidos)
Uniones fosfodister
Molculas ms grandes que se conocen.
1865
1865
1865
ARNr
(ribosomal)
1865
ARNt
(de transferencia)
aa
Encargados de transportar los aminocidos a los ribosomas
para incorporarlos a las protenas, durante el proceso de
sntesis proteica.
Decodificacin mediante apareamiento con el codn del
ARNm
anticodn
1865
ARNnc o ARN no codificante: ARN funcional que no codifica para sntesis proteica
(ARNr y ARNt)
ARN corto de interferencia (siARN: del ingls: small interfering RNA ): son
componentes de una gran respuesta antiviral denominada interferencia del ARN
involucrados en la regulacin.
Ribo-llaves (ribo-switches): son formas de ARN que actan como llaves "encendidoapagado" de gran precisin.
ARN catalticos o ribozimas: ARN con estructura secundaria que le confiere a la
molcula propiedades catalticas como corte de ARN o ADN y ligacin.
El ARN posiblemente
fue el primer biopolmero
que apareci en la corteza terrestre
durante el transcurso de la evolucin.
UUUUUUUU
AAAAAAAA
CCCCCCCC
GGGGGGG
fenilalanina
lisina
prolina
glicina
El cdigo gentico
43=64
ARNm
1865
TRANSCRIPCIN
ADN
ARN
PROTEINAS
Requerimientos:
Cadena de ADN
como matriz
ARN polimerasa
Ribonuclesidos
trifosfatos
Regin promotora
TRANSCRIPCION
ARN polimerasa
Principio de un gen
ADN
Iniciacin
La ARN polimerasa junto a factores de transcripcin se une a sitio donde
va a iniciar la transcripcin
Promotor
En bacterias
Dos regiones conservadas en el ADN (-10 y -35) que son
reconocidas por factor sigma.
ARN polimerasa luego se une y sintetiza ARN de 5 a 3
Un promotor expresa varios genes (OPERN)
Promotor en Eucariotas
Regin promotora
Involucra varios
factores de
transcripcin
(protenas)
Cada gen tiene su
promotor
TRANSCRIPCION
Hebra antisentido
Direccin de la transcripcin
3del gen
5del gen
5del ARNm
3 del ARNm
Hebra sentido:
contiene la informacin
gentica
Hebra antisentido:
provee el molde para
la sntesis del ARNm
ARNm
Elongacin
Una cadena de ARN se une por apareamiento de bases a la cadena de ADN
y la ARN polimerasa es la encargada del enlace fosfodister.
TRANSCRIPCIN
La ARN polimerasa
deja el ADN
ARN mensajero liberado
Terminacin
Desestabilizacin del
complejo
ARN-ADN
1865
TRANSDUCCIN
ADN
ARN
PROTENAS
Las protenas son macromolculas
formadas por aminocidos
TRADUCCION
ARNt
Sitio de unin
al aminocido
Iniciacin
La iniciacin procaritica es el resultado de la asociacin de las subunidades pequea
y grande del ribosoma y el acoplamiento del primer aminoacil-ARNt (fmet-ARNt)
con el codn de iniciacin mediante el emparejamiento de bases anticodn-codn.
TRADUCCION
Elongacin
La elongacin de la cadena polipeptdica
consiste en la adicin de aminocidos al extremo carboxilo de la cadena.
TRADUCCION
Continua la elongacin
Polipptido
Creciente
TRADUCCION
Carboxilo terminal
Amino terminal
Terminacin
La terminacin ocurre cuando se llega a uno de los tres codones de terminacin
del ARNm, que no son reconocidos por ningn ARNt.
QU ES UN GEN ?
Un segmento de ADN que contribuye a un
fenotipo/funcin. En ausencia de una funcin
demostrable, un gen puede ser caracterizado por
secuencia, transcripcin u homologa.
Human Gene Nomenclature Committee
En Procariotas.....
Opern
Transcripcin policistrnica (ARNm de varios genes)
En Eucariontes...
REGION
REGULATORIA
+1
EXONES
FIN
TRANSCRIPCION
INTRONES
LA DECADA DE LOS
70
1865
Daniel Nathans
Utiliz HindII para hacer el
primer mapa de restriccin del
SV40
1865
Extremos
pegajosos
DNA
recombinante
SV40 DNA
DNA ligasa
1865
Gen resistente a
la tetraciclina
E. coli
transformada con
plsmidos
recombinantes
Herbert Boyer
1865
LA DECADA DE LOS
80
1865
1980
La suprema corte de U.S. permite patentar formas de
vida
1985
Se prueban plantas modificadas genticamente
Margaret Dayhoff
LA DECADA DE LOS
90
1865
1995
primer genoma: Haemophilus influenzae.
1996
Genoma de Saccharomyces cerevisiae
1997
Se clona Dolly
1998
Genoma de C. elegans
EL
FUTURO......
Genmica y sociedad
Genmica y salud
Genmica biolgica
MUCHAS GRACIAS!!!!!!!!!!!
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