Pruebas para el Diagnstico

de Sfilis

Jenny Zambrano Arteaga

Grupo de Microbiologa
Red Nacional de Laboratorios
Instituto Nacional de Salud
Colombia
 Las ITS, se encuentran entre las principales
causas de enfermedad en el mundo, con
consecuencias econmicas, sociales y sanitarias
de gran repercusin en muchos pases.

La OMS estima que cada ao hay ms de 12

millones de nuevas infecciones por Treponema
pallidum, de las cuales ms de 2 millones se
producen en mujeres embarazadas

El principio fundamental de la prevencin y

eliminacin de la sfilis congnita (SC) consiste en
detectar y tratar la infeccin en la gestante para
prevenir la transmisin vertical
 Treponema pallidum
Agente causal de la
sfilis
Familia de las
espiroquetas
Caracterzticas de
Gram negativo
Mvil: Endoflagelo
ubicado en el
periplasma.
 Caractersticas especiales

Intracelular obligado
Duplicacin lenta (30 a 33 horas)
Pared celular flexible
Movimiento tirabuzn
Delgado
Sensible a temperatura, oxgeno,
cambios de pH y desecacin
 Historia de la sfilis
Teora del nuevo mundo
Teora del viejo mundo
Teora unitaria

Girolamo Fracastoro
 Descripcin del
evento Se caracteriza clnicamente
por:

Sfilis primaria: una lesin

Enfermedad
primaria en forma de lcera
infecciosa, indolora e indurada
sistmica, de Penetra en (chancro).
transmisin la piel o
Sfilis secundaria: una
sexual, causada mucosas
lesionadas erupcin secundaria que
por la afecta la piel y las
espiroqueta membranas mucosas
llamada (rosela sifiltica y lesiones
Treponema papulosas).
pallidum Estado latente: Largos
periodos de latencia
(temprana, tarda o
indeterminada).
Sfilis terciaria: Lesiones
tardas en piel, huesos,
 Examen directo
Microscopio de campo oscuro
Inmunofluorescencia directa

Pruebas serolgicas
Pruebas no treponmicas:
VDRL, RPR, USR y TRUST
Pruebas treponmicas:
FTA- Abs, TPPA, TP-HA, Elisa.IgM IgG,
pruebas rpidas.
 VDRL
(Venereal Disease Research
Laboratory)

Fundamento

La prueba de VDRL es una prueba de microfloculacin la cual

detecta anticuerpos heterlogos (anticuerpos inespecficos) y
utiliza un antgeno de origen no treponmico. El antgeno al
unirse a los anticuerpos en el suero o lquido cefalorraqudeo de
pacientes con sfilis, produce el fenmeno de floculacin
 Interpretacin VDRL
cualitativa
Lectura Reporte
Grumos medianos y Reactivo (R)
grandes

Grumos pequeos Reactivo 1 dils

pero definidos Antes 0 dils
Ausencia de grumos No Reactivo
o (NR)
rugosidades mnimas
 Interpretacin VDRL
cuantitativa
Dilucin de suero Reporte
Suero no 1:2 1:4 1:8 1:16 1:32
diluido 1:1
R W N N N N Reactivo dilucin 1:1 o 1 dils.

R R W N N N Reactivo dilucin 1:2 o 2 dils.

R R R W N N Reactivo dilucin 1:4 o 4 dils.

W W R R W N Reactivo dilucin 1:8 o 8 dils.

N (rugoso) W R R R N Reactivo dilucin 1:16 o 16 dils.

 No informar

Reactivo 0 dils
Reactivo 3 dils
Reactivo 10 dils
Reactivo 12 dils
 RPR
(Rapid Plasma Reagent)

Fundamento
Es igual al VDRL pero el
antgeno contiene clorhidrato
de colina para eliminar la
inactivacin del suero por
calor, EDTA que favorece la
estabilidad de la suspensin y
partculas de carbn como
agente visualizante.
 Interpretacin RPR
cualitativa
Lectura Reporte
Grumos caractersticos y claros dentro del anillo Reactivo (R)
de prueba (intensamente reactivo) a grumos
delicados pero definidos (mnimamente o
moderadamente reactivos).

Rugosidades mnimas pero ausencia de grumos. No Reactivo (NR)

 Interpretacin RPR
cuantitativa
Dilucin de suero Reporte
Suero no 1:2 1:4 1:8 1:16
diluido 1:1
Rm N N N N Reactivo dilucin 1:1 o 1 dils.

R R N N N Reactivo dilucin 1:2 o 2 dils.

R R R N N Reactivo dilucin 1:4 o 4 dils.
R R R Rm N Reactivo dilucin 1:8 o 8 dils.

R= reactivo Rm= mnima reactividad N= no

reactivo
 Factores que alteran el resultado
de las pruebas no treponmicas
Temperatura (ptima 23-29 C)
Fenmeno de prozona
Dimetro del rea de reaccin
No guardar la proporcin antgeno-muestra
No seguir las indicaciones del fabricante
Inadecuado almacenamiento de los
reactivos
Mezclar la reaccin
Error tcnico
 FTA-ABS
(fluorescent treponemal
antibody-absorption)
Fundamento
Los anticuerpos dirigidos
contra T. pallidum
presentes en suero
humano se unen con con
el Treponema pallidum
(cepa Nichols) adherida a
la lmina. Los anticuerpos
fijados se revelan con
inmunoglobulinas de
cabra anti-
inmunoglobulinas
humanas marcadas con
fluoresceina.
 TPHA
(T. pallidum
haemagglutination assay)

Fundamento

Los anticuerpos dirigidos

contra T. pallidum presentes
en suero humano provocan
la aglutinacin de los
hemates de ave en
suspensin, sensibilizados
con antgenos de T.pallidum
 TPPA
(T. pallidum passive
aglutination)
Fundamento

Se utilizan partculas de
gelatina como soporte,
sensibilizadas con T. pallidum
antgeno purificado (cepa
Nichols). Esta prueba se basa
en que en presencia de
anticuerpos de T. palidum en
suero o plasma humano se
presenta aglutinacin de las
partculas sensibilizadas.
 Pruebas treponmicas ELISA

Es una ELISA usada como prueba

confirmatoria en el diagnostico de
sfilis. Detecta IgG e IgM.

Consiste en micropozos
sensibilizados con T. pallidum, que
al adicionar suero del paciente
con anticuerpos especficos
reaccionan revelando un color
detectable por absorbancia.
 Prueba rpida para sfilis
Fundamento:
Las pruebas rpidas para la determinacin de sfilis son un
ensayo inmunocromatogrfico en fase slida para
deteccin cualitativa de anticuerpos tipo IgG, IgM e IgA
contra Treponema pallidum.

5'~20' Negative

Positive

Put 20ul of WB(10ul of Add 3~4 drops of assay Interpret test result
S,P) diluent at
into the sample hole into the sample hole 5~20minutes.
Standard Diagnostic, Inc.www.themegallery.com
Utilidad prueba rpida para
sfilis
Tamizaje:
-Lugares donde no se dispone de
otras pruebas
-Dificultades de acceso para el
retorno de pacientes por los
resultados

Confirmacin:
-Diagnstico y tratamiento
oportunos
-Cuando resultan negativas se
evitan tratamientos innecesarios.
Recomendaciones para el uso de las pruebas
rpidas en gestantes solamente en las
siguientes situaciones:
Recomendaciones para el uso de las pruebas
rpidas en gestantes solamente en las
siguientes situaciones:
 Accelerating worldwide syphilis
screening through rapid testing: a
systematic review

Lancet Infect Dis 2010;10: 381

86
Novel Treponema pallidum Serologic
Tests:A Paradigm Shift in Syphilis
Screening for the 21st Century

Clinical Infectious Diseases 2010; 51(6):7

 Estudio de
evaluacin
diagnstica
OMS

UNDP/ World Bank / WHO Special Programme for Research and Training in Tropical Diseases (TDR) The Sexually Transmitted Diseases Diagnostics Initiative (SDI).
Diagnostics Evaluation Series; Laboratory-based evaluation of rapid syphilis diagnostics Results from 8 SDI Sites. Disponible en:
http://www.who.int/std_diagnostics/publications/meetings/SDI_Report.pdf
 Algoritmo sugerido por OMS
No se cuenta con la prueba de RPR VDRL

Sangre

Prueba Rpida

Positiv Negati
a va

Tratamien
to
Cuando se cuenta con la prueba de RPR VDRL

Sangre

Prueba Rpida

Positiv Negati
a va

RPR VDRL

Negativ
Realizar otra
prueba en 6
Positiva
a semanas

Tratamiento Positiva

Tratamiento
 Algoritmo Nacional
Diagnstico de Sfilis
gestacional y
congnita
 Sfilis Gestacional *Realizar la notificacin

al SIVIGILA para sfilis

Anlisis de VDRL o RPR Realizar
gestacional
bsqueda de
No Reactiva < Reactiva >
la(s)
Reactiva Con 1:8 dils o = 1:8 dils
Con pareja(s),
Indagar prueba
prueba dar el mismo
factores de Realizar adecuada
Treponmi
riesgo, educar Treponmi anamnesis y examen fsico esquema
en auto ca .
ca Positiva que a la
cuidado y Interrogue
Negativa
factores gestante
protectores antecedente
Considere falsos Penicilina Benzatnica 2,4
de sfilis y si
positivos
millones de UI Intramuscular, por
Nueva prueba recibi
no 3 dosis, una cada semana
tratamiento
Treponmica
entre la adecuado
semana 28 a
SI NO
Siga el algoritmo
32 y al
momento de la Cicatriz para serologas
terminacin de
serolgica Reactivas > 1:8
la gestacin.
dils
En alergia a la Penicilina se debe realizar
desensibilizacin en una Institucin que cuente
con la capacidad de atender estos casos

Realizar seguimiento serolgico cada 3 meses y

evaluar criterios de curacin

Persistencia de los ttulos o

Cada en ms de 2 dils a los 3
Curacin aumento > 2 dils considere, Manejo por es
meses, que sea menor de 1:8 a los
reinfeccin o recada pecialista
6 meses o su negativizacin
 Sfilis Congnita
Gestante con Dx de sfilis
Gestacional

Atencin del parto

Revisar el resultado de la
Serologa de la madre (preparto) y
tomar al Recin Nacido
Evaluar al Recin Nacido en
bsqueda de signos clnicos de
sfilis congnita
Definir si se Trata de un caso de
sfilis Congnita Confirmado
Recin Nacido con examen
Recin Nacido con examen
fsico normal y ttulos no
fsico normal y ttulos no
treponmicos < o = a 4 Recin Nacido con examen
treponmicos < o = a 4 Recin Nacido
veces los maternos o no
veces los maternos o no
reactivos, madre recibi con examen fsico normal y ttulos no
reactivos, de madre tratada treponmicos < o = a 4 veces
tratamiento adecuado antes fsico anormal,
adecuadamente, antes de
del embarazo y los ttulos ttulos no los maternos o no reactivos,
las 4 ltimas semanas del
permanecieron bajos treponmicos pero con madre no tratada o
embarazo y sin evidencia de
durante el embarazo y el > a 4 veces los tratada de manera inadecuada.
re-infeccin o recada
parto (VDRL1:2; RPR1:4).
maternos

Sin Sfilis Congnita (no se debe hacer reporte al SIVIGILA)

Con Sfilis Congnita (no olvide reportar al SIVIGILA)

Penicilina Benzatnica 50.000UI/ Kg IM dosis nica

El Recin nacido debe recibir penicilina G acuosa 50.000 UI /

Kg IV cada 12 horas durante los 7 primeros das de edad y a
partir del octavo da cada 8 horas hasta completar 10 das.

Serologa cada 3 meses (3, 6, 9 y 12 meses), para evaluar cumplimiento

de criterios de curacin
Persisten Reactivas o
aumentan > 2 dl: tomar
puncin lumbar
Control de LCR cada 6 Si estudio de LCR es Retratamiento con
meses hasta que sea no Reactivo: Dar Penicilina G acuosa por
reactiva tratamiento por 14 das 10 das
Quin norma el actuar de la Red Nacional
de Laboratorios (RNL)?
Decreto nmero 2323 de 2006

Capitulo II, artculo 9 competencias de los

Laboratorios Nacionales de Referencia.
Capitulo II, artculo 16 Competencias de los
laboratorios de salud pblica departamentales y del
distrito.
Capitulo II artculo 18 Competencias de los
laboratorios nivel municipal Municipio
Naci Departamento
Red n
Nacional de Laboratorios de Laboratorios Clnicos
Laboratorios. Salud Pblicos y privados
INS Pblica Nivel: I II III
 Competencias de los
Laboratorios de la red

Nivel Actividades
Realizar la prueba de idoneidad y el
control de calidad indirecto en serologa
Nacional de sfilis a los LSP.
INS -RNL
Grupo de Participar en el control de calidad externo
Microbiolog internacional.
a Transferencia de conocimientos.
 Competencias de los
Laboratorios de la red

Nivel Actividades

Apoyar diagnstico pruebas confirmatorias

Realizar el control de calidad indirecto a los

Departament laboratorios clnicos de su red.
al
laboratorios Participar en el control de calidad del Grupo
de Microbiologa (Prueba de idoneidad y
de control indirecto)
salud publica
Capacitar a los laboratorios del nivel
municipal.
 Competencias de los
Laboratorios de la red

Nivel Actividades
Diagnosticar
Participar en el control de calidad
Municipal indirecto con LSP
laboratorios Prueba de idoneidad
clnicos Enviar informes mensuales al LSP.
Reportar casos a SIVIGILA
Prueba de Idoneidad en Serologa de Sfilis
(Control de calidad directo)
Objetivo
Evaluar la calidad del diagnstico
serolgico de sfilis en los
laboratorios participantes en la
prueba.
Dirigido a

Laboratorios de Salud Pblica,

laboratorios de la red pblica y
laboratorios particulares.
Prueba de Idoneidad en Serologa de Sfilis
Pruebas evaluadas

No treponmicas

VDR RPR
L
Treponmicas o confirmatorias

TPH TPPA Inmunocromatogrficas

A
 Prueba de Idoneidad en
Serologa de Sfilis
Plasmas recolectados:
Procedentes del Hemocentro y Fundacin
Hematolgica
Definicin del ttulo:
Controla durante el proceso y se confirma antes de
enviarlo
 Prueba de Idoneidad en
Serologa de Sfilis
Envo
Nmero de sueros: 5 por envo, 2 pareados y 1
individual
Frecuencia: 2 por ao
 Parmetros a evaluar

Concordancia
Los resultados del laboratorio participante con el
promedio entre INS, LSP Bogot y LSP Antioquia

Reproducibilidad
Los resultados de los laboratorios participantes en
sueros pareados

Calificacin ptima:
80%
Fuente: CDC
Inscripciones PISS
Control de calidad indirecto

Envo de 16 sueros al Grupo de Microbiologa

del INS de acuerdo al cronograma de
actividades (80% reactivos y 20% no
reactivos).

Remitir los sueros al Grupo de Microbiologa

en los crioviales enviados a inicio de ao, los
cuales contienen antimicrobiano Timerosal.
 Cobertura
2010
Para el ao 2010, logramos
una cobertura del 100% de los
LSP, principal objetivo del
programa
2011
Laboratorios de la Red Pblica
(LSP) 313
Laboratorios privados
25
2012participantes
Total
Laboratorios
338 de la Red Pblica
(LSP) 342
Laboratorios privados
26
2013
Total participantes
Laboratorios de la Red Pblica
368
(LSP) 382
Laboratorios privados
45
 Respuesta de los
laboratorios

199 199 199 200 200 200 200 200 200 200 200 200 200 201 201 201 201
Ao 7 8 9 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 0 1 2 3
Laboratori
os
participan
tes 262 281 290 294 285 283 294 281 255 310 323 337 341 335 338 342 427
Contestar
on 219 224 244 251 254 258 261 269 249 279 304 307 300 284 293 317 342

%Respuesta 83,5 79,7 84,1 85,3 89,1 91,1 88,7 95,7 97,6 90 94,1 91 88 84,7 87,5 92,7 80,1
% No
Respuesta 16,4 20,2 15,8 14,6 10,8 8,8 11,2 4,2 2,3 10 5,8 9 12 15,3 12,5 7,30 19,9
 Recomendacio
Unificar conceptos nes
entre los profesionales del
laboratorio

Capacitacin obligatoria antes de comenzar el

rural.

No
usar reactivos
Capacitacin vencidos para
obligatoria , controlar las condiciones
personal nuevo.
de almacenamiento.

Usar controles internos para cada lote de muestras

Seguir las indicaciones del fabricante para el

desarrollo de cada prueba.
Gracias
Direccin Redes en Salud Publica
Subdireccin Laboratorio Nacional de Referencia
Grupo Microbiologa

Jenny Zambrano Arteaga

jzambrano@ins.gov.co

Instituto Nacional de Salud

Correo electrnico: jzambrano@ins.gov.co

Telfono (57-1) 220 77 00 Extensin 1421/23/30

Bogot, COLOMBIA
www.ins.gov.co
Lnea gratuita nacional: 01 8000 113 400