FASES PREANALITICAS DE LOS

LABORATORIOS CLINICOS.

LIC. EGLYS J. SNCHEZ A.

CAUSAS DE LA VARIABILIDAD
DE LAS MAGNITUDES

Las magnitudes biolgicas estn sometidas a

dos tipos de variabilidad:

La variabilidad biolgica
La variabilidad analtica

Estas son las responsables de que los valores

de un determinado parmetro sean diferentes
entre diferentes individuos y de que incluso en
una misma persona difieran en el tiempo.
Variacin Biolgica Intraindividual

Describe el fenmeno por el cual los resultados de las

magnitudes biolgicas varan en un individuo de un
momento a otro.

La variacin puede suceder: a corto o largo plazo, y su

origen puede ser:

Sistemtico: fundamentalmente relacionados con los

ritmos biolgicos o con la edad debido a las modificaciones
que comporta el crecimiento o el envejecimiento.
Variacin Biolgica Intraindividual

Aleatorio: causado por las variaciones

metablicas relacionadas con la homeostasis. La
variacin es tanto menor cuanto ms estrecho
sea el control o la regulacin metablica del
analito. Tambin forman parte del componente
aleatorio las variaciones introducidas por la dieta,
clima, estados emocionales
Variacin Biolgica Interindividual

Los factores que con ms frecuencia causan este

tipo de variacin en las magnitudes de laboratorio
son:
La edad La menopausia
La raza La alimentacin
El sexo El ejercicio fsico
El ciclo menstrual La masa muscular
La gestacin La obesidad
La lactancia La localizacin
geogrfica
Variacin Biolgica Interindividual

En general cuando la variacin biolgica

intraindividual sea mayor que la interindividual,
los valores de referencia poblacionales son de
utilidad, mientras que en el caso contrario son de
uso limitado y pueden llevar a errores de
interpretacin.
Variabilidad analtica

La variabilidad analtica engloba a todos aquellos

factores que pueden afectar la muestra durante
todo el proceso analtico.

Proceso Analtico

Al conjunto de procedimientos que tienen lugar

desde la solicitud del anlisis y preparacin del
paciente hasta que el informe llega al mdico que
lo solicit.
Fases de la Variabilidad Analtica

Preanaltica: comprende la fase desde la preparacin del

paciente y toma de muestra hasta la preparacin de sta para su
anlisis

Analtica: abarca todos los procedimientos relacionados con la

medida de la magnitud que se estudia.

Postanaltica: incluye la elaboracin del informe analtico y

entrega del resultado al solicitante.

Estas fases son de gran importancia, ya que un error en

cualquiera de ellas puede llegar a invalidar el resultado final.
 Factores Fisiolgicos
- Edad: algunas magnitudes presentan diferentes valores
segn la edad, por lo que es importante conocer la edad
del paciente para poder interpretar correctamente un
resultado.
- Sexo: algunas magnitudes como CK, mioglobina,
creatinina, cido rico., presentan diferencias segn el
sexo del paciente.
- Embarazo: diversas magnitudes se ven afectadas por
un efecto de dilucin producido por el aumento del
volumen plasmtico, aumenta el aclaramiento de
creatinina. Se Produce un incremento de los niveles
sricos de lpidos (colesterol, triglicridos.).
 Factores Fisiolgicos
- Ciclos biolgicos: es importante informar sobre el
momento del ciclo en que se extrae la muestra ya que
ciertos parmetros pueden variar siguiendo ritmos
biolgicos. As, las hormonas sexuales varan a lo largo del
ciclo menstrual (FSH, LH, estradiol.), hormonas como el
cortisol se ven afectadas por el ritmo circadiano,
presentando un pico mximo a las 8 h y un pico mnimo a las
20 h.
- Altura: algunos parmetros como la hemoglobina aumenta
con la altura.
- Estilo de vida: el tipo de dieta, consumo de caf, alcohol,
tabaco, etc. tambin son variables fisiolgicas a tener en
cuenta.
Factores que influyen en la toma de
la muestra.
- Ayuno: como norma general se recomienda un ayuno de 8
horas previo a la extraccin. Adems, hay determinaciones
que exigen una dieta especial en los das previos. En estos
casos se proporcionar al paciente instrucciones claras.
- Tiempo de aplicacin del torniquete: si se mantiene
ms tiempo de lo recomendable (1-2 minutos) puede
producirse una hemoconcentracin, con el consiguiente
aumento de determinados parmetros.
-Pacientes con sueros teraputicos: se recomienda, en la
medida de lo posible, que se extraiga la muestra del brazo
opuesto al que se tiene la infusin. Si la muestra ha de
obtenerse a travs de un catter se recomienda que se
deseche previamente la cantidad de sangre equivalente a
dos veces el volumen de ste.
Factores que influyen en la toma de
la muestra.
- Ejercicio intenso: realizar ejercicio intenso en los das
previos a la toma de muestra puede alterar ciertos
parmetros como los niveles de CK, Lactato.
-Anticoagulantes: es importante el uso del anticoagulante
adecuado segn la prueba a determinar (EDTA para
hematimetra, citrato para coagulacin bsica, Heparina litio
para determinaciones bioqumicas). Adems se debe
conocer la sal en la que se presenta el anticoagulante
(sdica, potsica.) y las interferencias que puede presentar
en ciertos parmetros.
-Relacin Anticoagulante sangre: Es fundamental
mantener la proporcin adecuada de la cantidad de sangre y
el anticoagulante, ya que si no se mantiene se invalida la
muestra.
 Interferencias en las
determinaciones analticas

-Hemlisis: salida de los componentes de las

clulas sanguneas al plasma o suero, lo que da
lugar a un color ms o menos rojizo en funcin del
grado de hemlisis. Algunos analitos tales como
LDH, GOT(AST) y K se encuentran en mayor
concentracin dentro del hemate, luego se ven
incrementados con la hemlisis. La presencia de
hemlisis, segn el grado de sta, o bien invalida la
muestra o bien hay que informar de su presencia.
 Interferencias en las
determinaciones analticas
Lipemia: presencia de turbidez en suero o plasma por
incremento de la concentracin de lipoprotenas, debido a
que no se ha guardado el ayuno recomendado o a
enfermedades metablicas. Puede producir interferencias
pticas en la determinaciones analticas.

Ictericia: originada por elevada concentracin de bilirrubina

en suero o plasma.

Anticuerpos heterfilos: pueden originar interferencias

sobre el analito o sobre el proceso de medicin (reaccin
antgeno-anticuerpo).

- Frmacos: pueden producir interferencias en la medida de

diversos analitos.
 ETAPAS DE LA FASE
PREANALTICA
Solicitud de anlisis por parte del Clnico
Identificacin de la peticin: a sta se le asigna un cdigo
de identificacin (nmero de peticin, nmero de volante) que la
identifica inequvocamente en el sistema del que procede.
Tipo de peticin: ordinaria o urgente. Normalmente el tipo
de peticin condiciona una logstica diferente.
Datos de filiacin del paciente: son los que identifican
inequvocamente al paciente y lo relacionan con otros datos.
Ejemplo: nombre, apellidos, nmero historia, nmero de cedula
de identidad.
Datos clnicos y demogrficos: son necesarios para la
correcta interpretacin de los resultados, para llevar a cabo
estudios complementarios, revisar la congruencia de los
resultados y realizar recomendaciones desde el laboratorio.
Ejemplo: fecha de nacimiento, sexo, diagnstico y otras
informaciones en funcin de las pruebas solicitadas.
 Datos administrativos de la solicitud: indican de qu persona
y organizacin procede la solicitud, a dnde se enva el informe y
quin se hace cargo administrativamente de la peticin (mdico,
procedencia, destino.).

Pruebas o estudios solicitados: aqu se indica qu pruebas o

grupos de pruebas se desea realizar y sobre qu muestras; por
ejemplo: glucosa en suero, amilasa en orina. Tambin es frecuente
la peticin por perfiles, por ejemplo perfil cardaco o perfil
bsico.
En estos casos existen acuerdos entre el laboratorio y los mdicos
para definir estos perfiles y protocolos.

La solicitud en papel resulta relativamente sencilla desde el punto

de vista del mdico, pero necesita una transcripcin de la
informacin al SIL (sistema informtico de laboratorio)
producindose, en ocasiones, errores de transcripcin.

La peticin electrnica permitira al clnico realizar la solicitud desde

su puesto de trabajo, mediante un acceso directo al SIL si dispone
de un cliente de la aplicacin del laboratorio o el laboratorio tiene la
opcin de peticin a travs de la web.
 Extraccin de muestras por parte de
enfermera

Una vez obtenidas las correspondientes

muestras, se les colocan etiquetas con el nmero
de identificacin que corresponde a la solicitud.
Las etiquetas contienen nmeros o cdigos de
barras.
La contribucin de los sistemas informticos a la
obtencin e identificacin de muestras es cada
vez mayor.
LA MUESTRA PARA LAS PRUEBAS
BIOQUIMICAS

Tubo seco (sin aditivos o con gelosa):

se usan para determinaciones en suero.
No llevan ningn tipo de anticoagulante,
aunque s pueden tener gel separador
que acte facilitando la retraccin del cogulo
y separndolo del suero definitivamente. O
usar Tapn rojo para pruebas: Bioqumica,
Serologa, Inmunologa.
COMO OBTENER EL SUERO PARA LAS
PRUEBAS BIOQUIMICAS

Suero: se obtiene dejando coagular la

sangre sobre tubo seco sin anticoagulante.
La sangre se deja reposar 10 minutos a
Temperatura ambiente para que se forme el
coagulo y posteriormente se centrifuga
obteniendo el suero en el sobrenadante. Es
la muestra utilizada en el laboratorio de
bioqumica, serologa e inmunologa.
Transporte de muestras
Una vez realizada la extraccin, los diferentes
especmenes deben ser organizados por cdigos de
procedencia para facilitar un reconocimiento rpido y
efectivo durante el transporte y posterior recepcin de
estos.

Asimismo, deben efectuarse comprobaciones previas al

transporte de los especmenes concernientes sobre todo a
una identificacin correcta de los mismos, del impreso de
peticin y del paciente. Esta buena identificacin puede
llevarse a cabo de diferentes formas: identificacin
manual, cdigos de barras.
 Existen una serie de normas generales
establecidas para cada tipo de muestra

-Sangre: las muestras de sangre deben ser recibidos por el

personal del laboratorio en 1-2 horas como mximo desde la
extraccin. Durante su transporte, ha de evitarse la agitacin
(por la posible hemlisis) y se deben proteger de la
exposicin directa a la luz (debido a la degradacin de
algunos constituyentes, como la bilirrubina). Para la
determinacin de algunos parmetros inestables (lactato,
amonio, renina plasmtica, fosfatasa cida.) las muestras
deben mantenerse refrigeradas a 4 C, inmediatamente
despus de la extraccin, y deben transportarse en hielo.

- Los tubos de sangre deben estar en posicin vertical

durante su transporte, con el tapn hacia arriba, lo que
favorece la formacin completa del cogulo y reduce la
agitacin del contenido del tubo.
Registro de datos

La entrada de datos al Sistema Informatico de

Laboratorio es otro paso crtico. Cualquier error a
este nivel va a repercutir directamente en la
veracidad del resultado y por otro lado la propia
velocidad de entrada de estos datos va a
condicionar toda la logstica del laboratorio, ya
que hoy en da no se puede comenzar ningn
procesamiento de las muestras hasta que los
datos no estn en el SIL. Por estos motivos se
tiende a utilizar sistemas cada vez ms rpidos y
fiables.
 Recepcin y distribucin de muestras

Una vez que las muestras llegan al laboratorio es necesaria una

serie de acciones para prepararlas convenientemente antes de ser
enviadas a cada una de las reas que van a llevar a cabo el anlisis
propiamente dicho.
En primer lugar se hace una recepcin que supone la aceptacin de
la solicitud y las muestras. Para ello debe hacerse una inspeccin
fsica de las muestras y su identificacin, se controla el tiempo
transcurrido desde la extraccin y la temperatura a la que han
permanecido las muestras. Aqu se registran las incidencias
detectadas, las horas de llegada, el registro de la presencia de la
muestra, peticiones incongruentes o redundantes, protocolos
inadecuados.
Una vez aceptadas las muestras y solicitudes, las muestras deben
ser clasificadas, centrifugadas en caso necesario, destaponadas, y
si es necesario alicuotadas (subfraccionadas en varios
contenedores).
 Distribucin del trabajo

Una vez que se dispone de la muestra preparada

adecuadamente en el rea o laboratorio que va a
realizar los anlisis, el SIL puede emitir listas u
hojas de trabajo que indiquen qu pruebas se
van a realizar en esa rea o equipo.
Cuando se trata de equipos analizadores con
conexin bidireccional al SIL existen otras formas
de distribucin del trabajo sin papel normalmente
basadas en la presencia de muestra o alcuota a
pie de equipo. La muestra se coloca en el equipo
que slo realiza aquellas pruebas que el SIL le
solicita.
 ERRORES EN LA FASE PREANALTICA

El error preanaltico es el ms frecuente. En distintos

estudios se estima su frecuencia en 75% e incluso hay
autores que llegan a encontrar un 84%. Debido a que en la
fase preanaltica inciden aspectos muy diversos. No
obstante, los errores descritos en la literatura con mayor
frecuencia son los que se refieren a la calidad de la muestra
recibida en el laboratorio: muestra hemolizada, lipmica,
insuficiente, incorrecta o coagulada.

En la fase preanaltica pueden diferenciarse dos etapas; una

primera extra-laboratorio y la segunda dentro del
laboratorio. Los errores que pueden generarse son de
significacin distinta y su medida es difcil ya que algunos
de ellos se ponen de manifiesto en la fase analtica y otros
no se evidenciarn.
Errores en la fase preanaltica extra-laboratorio:

- Solicitud de anlisis por parte del mdico clnico:

eleccin de la magnitud,informacin precisa.
- Caractersticas y condiciones previas del paciente:
edad, sexo, biorritmo, estado fsico, ayuno, reposo, hbitos
alimentarios y txicos, medicacin.
- Obtencin del espcimen: identificacin del espcimen
y del paciente, tubos y contenedores apropiados, orden
correcto de llenado de los tubos, evitar la contaminacin de
las infusiones intravenosas.
- Transporte al laboratorio.
Errores en la fase preanaltica intra-laboratorio:

- Registro administrativo: entrada de datos del paciente y

peticiones.
- Almacenamiento: tiempo de espera de las muestras hasta su
manipulacin.
- Centrifugacin.
- Distribucin y alicuotado.
- Preparacin de la muestra.
-Eleccin de la muestra correcto.

Demostrar la causa que puede generar una interferencia y conocer el

nmero de errores de laboratorio procedentes de la fase preanaltica que la
provocan es una tarea difcil, pero si se analiza paso a paso todo el
proceso, se comprueba que muchas de ellas tienen su origen en esta fase.
 Entre las posibles causas de error se
pueden citar:
- La medicacin administrada al paciente y una mala preparacin
del mismo para la magnitud a medir.
- La extraccin incorrecta de la muestra: estasis venoso, toma
de una va, higiene defectuosa.
- La recogida en recipiente inadecuado, conservante incorrecto,
contaminacin por arrastre en el llenado de los tubos.
- El transporte y almacenamiento sin las condiciones adecuadas
o de duracin prolongada, que puede alterar las condiciones
fsico-qumicas de las muestras o deteriorarlas.
- La centrifugacin insuficiente o excesiva.
- La demora en la medida de la magnitud o la mala preparacin
de la muestra.
Trazabilidad de las muestras

Las normas legales y administrativas y los

sistemas de calidad nos obligan a que todo el
proceso de laboratorio sea rastreable, de tal
manera que el sistema permita reconstruir todo
lo acontecido desde que se realiza la solicitud
hasta que se recibe o se ve el informe.
 Esquema tubos de extraccin sangre laboratorio

PRUEBA COLOR DE TAPN VOLUMEN EN ml ADITIVO DETERMINACIONES

EN EL TUBO

BIOQUIMICA ROJO 8 GELOSA AMILASA, CIDO RICO, ALBUMINA, APO A, APO

SERICA B,
BILIRRUBINA TOTAL Y DIRECTA, CALCIO, CK,
CKMMB, CLORO, COLESTEROL, CORTISOL,
CREATININA, DIGOXINA, FOSFATASA CIDA,
FOSFATASA ALCALINA, FERRITINA, FOSFORO,
GGT,
GLUCOSA, GOT(AST), GPT(ALT), HDL, HIERRO,
LDH,
LDL, LITIO, MAGNESIO, PCR, BUN, POTASIO,
PROTENAS
TOTALES, SODIO, COLESTEROL TRIGLICRIDOS

MORADO 4 EDTA-K3 HEMOGLOBINA GLICOSILADA

BIOQUIMICA VERDE 4 HEPARINA LITIO AMILASA, CIDO RICO, BILIRRUBINA TOTAL,

URGENCIA BILIRRUBINA DIRECTA, CALCIO, CK , CKMMB,
CLORO, CREATININA, DIGOXINA, GLUCOSA, GOT
(AST), LDH ,MIOGLOBINA, PARACETAMOL, PCR,
POTASIO, PROTENAS TOTALES, PROTENAS LCR,
SODIO, TROPONINA

ROJO 0,8 GELOSA AMILASA, CIDO RICO, BILIRRUBINA TOTAL,

PEDIATRICO BILIRRUBINA DIRECTA, CALCIO, CK , CKMMB,
CLORO, CREATININA, DIGOXINA, GLUCOSA, GOT
(AST), LDH ,MIOGLOBINA, PARACETAMOL, PCR,
POTASIO, PROTENAS TOTALES, PROTENAS LCR,
SODIO, TROPONINA

GRIS 2 FLUORURO LACTATO, ALCOHOLEMIA

OXALATO

MORADO 4 EDTA-K3 BNP

ROJO 8 GELOSA BHCG, VIH

 MARCADORES: PSA, AFP, BHCG, CEA, CA125, CA
19.9,
8 GELOSA CA15.3
SEROLOGIA ROJO HORMONAS: TSH, T4, FSH, LH, ESTRADIOL,
PROGESTERONA, PROLACTINA, TESTOSTERONA,
INMUNO: C3, C4, IgG, IgA, IgM, IgD, IgE, ANA, ENA
ALERGIAS: IgE, IgEs, Fx5, phadiatop, phadiatop infantil
INFECCIOSO: CMV, HEPATITIS A, B, C, RUBEOLA,
TOXOPLASMA, RPR, TPHA, VIH, BORRELIA,
HELICOBACTER PYLORI

MORADO 4 EDTA-K3 HEMOGRAMA, FROTIS, RETICULOCITOS, GRUPO

ABO, RH, COOMBS DIRECTO E INDIRECTO

MORADO 1 EDTA-K3 HEMOGRAMA, FROTIS, RETICULOCITOS, GRUPO

PEDIATRICO ABO, RH, COOMBS DIRECTO E INDIRECTO

ROJO 8 GELOSA GRUPO RH, COOMBS INDIRECTO

HEMATOLOGIA
AZUL 3,6 CITRATO DE SADIO COAGULACIN (PT, APTT, FIBRINGENO, INR,
AL 3,8 % DIMERO D, A. LPICO, AT III

AZUL 2 CITRATO DE SADIO COAGULACIN (PT, APTT, FIBRINGENO, INR,

AL 3,8 % DIMERO D, A. LPICO, AT III

NEGRO 2 CITRATO DE SADIO VSG ( VELOCIDAD DE SEDIMENTACIN

AL 3,8 % GLOBULAR)
GRACIAS POR SU
ATENCION