Adn

Estructura y replicacin
del material gentico

Dr. Antonio Barbadilla
Tema 6: Estructura y replicacin del

material gentico
1
1
Objetivos tema 6:
Estructura y replicacin del material
gentico
Debern
Debern quedar
quedar bien
bien claros
claros los
los siguientes
siguientes puntos:
puntos:
Cmo se
Cmo se descubri
descubri lala naturaleza
naturaleza qumica
qumica del
del
material
material hereditario
hereditario
La composicin
La composicin qumica
qumica dede los
los cidos
cidos nucleicos
nucleicos
La estructura
La estructura 3D
3D del
del DNA:
DNA: naturaleza
naturaleza
complementaria
complementaria yy antiparalela
antiparalela dede la
la doble
doble cadena
cadena
del
del cido
cido desoxirribonucleico
desoxirribonucleico (DNA)
(DNA)
La extraordinaria
La extraordinaria capacidad
capacidad explicativa
explicativa del
del
modelo
modelo del
del DNA
DNA de de la
la funcin
funcin biolgica
biolgica
fundamental
fundamental dede esta
esta molcula
molcula
La replicacin
La replicacin semiconservativa
semiconservativa
Enzimologa de
Enzimologa de la
la replicacin
replicacin
Tema 6: Estructura y replicacin del 2

material gentico
2
La transformacin bacteriana en
Streptococcus pneumoniae (Griffith 1928)
Rugosa
Muerte por neumona Cepa resistente
Lisa
No muere Tema 6: Estructura

Muere y replicacin del 3
material gentico
3
Cul es el Principio transformante?
Principio
Rugosa Lisa

material gentico
4
Colin MacLeod
El elemento transformante Maclyn McCarty
es el DNA (1944)
Oswald
Avery
Ver animacin
experimento
tranformacin
bacteriana
Slo DNA produce transformacin

material gentico
5
Experimento de Alfred Hershey y Martha
Chase con fagos (1952)
Bacterifago T4
El DNA es el
material
infeccioso

material gentico
6
Componentes de los cidos nucleicos
adenina
timina
guanina
citosina

material gentico
7
Reglas de Chargaff
1. Proporcin de purinas = Proporcin de pirimidinas
A+G=C+T
2. A=T
3. G=C

material gentico
8
1953. Ao culminante:
J. Watson y F. Crick resuelven la
estructura tridimensional del DNA
(Nature 171: 737-738)
Watson y yo hemos
encontrado el
secreto de la vida

material gentico
9
1953. Ao culminante:
Dos lneas de evidencia:
Reglas de Chargaff
Fotografas de difraccin de rayos X

material gentico
10
Significado reglas de Chargaff
Complementariedad de las basesy replicacin del

Tema 6: Estructura 11
material gentico
11
Difraccin de rayos X
Hemoglobina
Linus Pauling

material gentico
12
Interpretacin del patrn difraccin de rayos X del DNA
Rosalind E.
Franklin
Crick del
Tema 6: Estructura y replicacin 13
material gentico
13
Modelo en metal
del DNA
J. Watson y F. Crick
Concluyen: La estructura del DNA es una
doble hlice, formada por cadenas orientadas
en direcciones opuestas (antiparalelas). La
estructura se mantiene gracias a enlaces de
hidrgeno entre las bases nitrogenadas que se
encuentran orientadas hacia
el interior de 14las
Tema 6: Estructura y replicacin del
14 cadenas
material gentico
Doble hlice, formada La estructura se mantiene gracias
por cadenas orientadas a enlaces de hidrgeno entre las
bases nitrogenadas que se
en direcciones opuestas
encuentran orientadas hacia el
(antiparalelas).
interior
Tema 6: Estructura de las cadenas
y replicacin del 15
material gentico
15
Desnaturalizacin del DNA
Separacin de las dos hebras por calor

Una mayor proporcin G-C tiene una mayor
temperatura de desnaturalizacin (fusin)
100
Porcentaje G + C
80
60
40
20

70 80 90 100 110
Temperatura de fusin (desnaturalizacin)
material gentico
16
Hlices levgiras y dextrgiras
material gentico
17
DNA-B dextrgira

material gentico
18
Ver
Ver artculo
artculo
Nature
Nature
1953
1953

material gentico
19

material gentico
20
La estructura del DNA suministra una
explicacin asombrosamente
simple del fenmeno de la herencia
La estructura explica:
La naturaleza de la secuencia lineal de los genes

(informacin digital cuaternaria en secuencias
unidimensionales de monmeros A,T,G,C)
El mecanismo de replicacin exacta de los
genes
La naturaleza qumica de las mutaciones
Por qu la mutacin, la recombinacin y la
expresin gnica son fenmenos separables a
nivel molecular

material gentico
21
Esencial a la relacin
ntima entre estructura
molecular y funcin
gentica del DNA es el
concepto de molde
La complementariedad de las
bases nitrogenadas permite que
la secuencia de una cadena
sencilla de DNA acte como un
molde para la formacin de una
copia complementaria de DNA
(replicacin) o de mRNA
(transcripcin)

material gentico
22
Y ahora las declaraciones de Watson y
Crick sobre el ADN. Esto es para m la
prueba verdadera de la existencia de Dios
Salvador Dal
Antes pensbamos que nuestro futuro

estaba en las estrellas. Ahora sabemos que
est en nuestros genes.
James Watson

material gentico
23
Una estructura
tan bonita tena,
por fuerza, que
existir

24
material gentico J. Watson
Una estructura
tan bonita tena,
por fuerza, que
existir
Tema 6: Estructura y replicacin del J. Watson

25
material gentico
25
El DNA
contiene informacin
digital cuaternaria en
secuencias unidimensionales
de monmeros A,T,G,C
(cristal
26
aperidico) Tema 6: Estructura y replicacin del
material gentico
26
Hay grandeza en esta concepcin de la
vida,... que mientras este planeta ha ido
girando segn la constante ley de la
Hay grandeza
gravitacin, seen
hanesta concepciny de
desarrollado se la
estn
vida,... que mientras
desarrollando, este
a partir deplaneta ha ido
una molcula
girando segn
helicoidal la constante
asombrosa, ley de
infinidad delaformas
gravitacin,
cada vez mssebellas
han desarrollado y se estn
y maravillosas
desarrollando, a partir de un comienzo
Charles Darwintan
sencillo, infinidad de formas cada vez ms
bellas y maravillosas
Charles Darwin

material gentico
27

material gentico
28
Replicacin del DNA

material gentico
29
25 de Abril 1953
It has not escaped our notice that the

specific pairing we have postulated
immediately suggests a possible
copying mechanism for the genetic
material.

material gentico
30
Posibles modelos de replicacin

material gentico
31
Replicacin del DNA
Semiconservativa: una cadena sirve de molde para una
nueva cadena
El experimento de M. Meselson y F. Stahl (1958)
demuestra que la replicacin es semiconservativa
Mathew Meselson Frank Stahl


material gentico
32

material gentico
33
Replicacin del DNA
Enzimas que sintetizan (replican) el DNA
E. coli
DNA polimerasa I (rellena huecos y repara)
DNA polimerasa II y III (funcin principal en
la sntesis)
Aade bases en ambas cadenas en la
direccin 5 3
Requiere un 3 OH final
Eucariotas
5 polimerasas
y principal en replicacin
, y exonucleasas
Correccin de pruebas: actividad 3 5
exonucleotdica. Sustituye bases mal emparejadas
(10-5) por correctas (10-7); mecanismos de reparacin
adicionales la reducen hasta 10-10 Tema 6: Estructura y replicacin del 34
material gentico
34
3 5
Las polimerasas
conocidas aaden
nucletidos
solamente en la
direccin 5 3

material gentico
35

material gentico
36
Por qu no hay una enzima que
polimerice en la direccin 3-> 5?
No funcionara la correccin de errores por

falta de un trifosfato que suministre la
energa de enlace covalente azcar-fosfato

material gentico
37
Adicin 53

material gentico
38
P
P
P
P
OH
OH
P
P
PP
OH
3
P
5
PP + H2O
P
P
OH
PP
OH
P
OH

P
material gentico
39
Adicin 35
(hipottica)

material gentico
40
P
OH
OH
P PP
PP
OH
3 5
P
PP + H2O
P
OH
PP
P
OH
Adicin 35
OH
(hipottica)
P
PP

P
material gentico
41
Correccin de errores

material gentico
42
P
P
P
P
OH
POH
P
P
PP
OH
3
P
5
PP + H2O
P
P
OH
Adicin 53
OH

P
material gentico
43
P
OH
OH
POH
PP
3 5
P
Adicin 35
(hipottica)

material gentico
44
Replicacin del DNA (2)
Replicacin: continua (cadena adelantada, cebador
slo inicio) y discontinua (cadena retrasada)
Discontinua
Cebador (pequeo RNA 2-60 nucletidos
aadido por enzima primasa o RNA pol que
provee 3 OH.
Fragmento de Okazaki por DNA pol III
(1500 bp en procariotas y 150 en eucariotas)
Pol I elimina cebador 3 -> 5 y llena huecos
(gap)
Ligacin (DNA ligasa, enlace fosfodister)

material gentico
45

material gentico
46

material gentico
47
Polimerasa III
Polimerasa I

material gentico
48
Por qu el cebador es RNA?
El cebador es ms proclive al error, por

lo que debera eliminarse y el RNA
puede detectarse y eliminarse
fcilmente por la DNApol I

material gentico
49
El replisoma: complejo enzimtico de la
replicacin que coordina la sntesis de las
dos cadenas, maquinaria molecular
Dmero de la DNA pol III (ncleos
catalticos)
Primosoma: formado por dos enzimas
Primasa
Helicasa (desenrolla el DNA)
Protena de unin a cadena sencilla, ssb
(Unin Y, estabiliza el DNA de cadena
sencilla)
Topoisomerasas tipo I (rotura una cadena)
y II (rotura de dos cadenas) junto a DNA
ligasa -> Relajacin del superenrollamiento

material gentico
50
El replisoma: una maquinaria de replicacin extraordinaria

material gentico
51

material gentico
52
DNA pol III + abrazadera beta -> Enzima procesiva

material gentico
53

material gentico
54
Topoisomerasas

material gentico
55
Origen de replicacin:
Secuencia reconocida (Ori C en E. coli) por
protenas iniciadoras. Varios orgenes en
eucariotas
La replicacin es bidireccional
Horquilla
replicacin

material gentico
56
En el DNA nuclear de eucariotas hay muchos orgenes de
replicacin (~500 en levaduras y 60000 en mamferos). Cada
unidad de replicacin es un replicn. La replicacin es
bidireccional

material gentico
57
En el DNA nuclear de eucariotas hay muchos orgenes de
replicacin (~500 en levaduras y 60000 en mamferos). Cada
unidad de replicacin es un replicn. La replicacin es
bidireccional

material gentico
58
Links de inters
Watson-Crick original paper (1953 Nature)
Trabajos estelares del descubrimiento de la doble h
lice
DNA: el secreto de la vida (Animacin)

Celebracin 50 aniversario descubrimiento de la dobl
e hlice en la UAB
DNA Structure
The Search for DNA - The Birth of Molecular Biolog
y
Image Library of Biological Macromolecules - DNA

DNA berkeley
DNA Learning Center
Beginner's guide to Molecular Biology
Glosario de Gentica molecular
Dr. Antonio Barbadilla DNA Replication
Animacin de la replicacin Tema 6: Estructura y replicacin del 59
material gentico
59

Adn

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Judul Asli

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

Adn

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

Estructura y replicacin

del material gentico

Tema 6: Estructura y replicacin del

Tema 6: Estructura y replicacin del 2

Muerte por neumona Cepa resistente

Dr. Antonio Barbadilla

No muere Tema 6: Estructura

Dr. Antonio Barbadilla

Tema 6: Estructura y replicacin del 4

El elemento transformante Maclyn McCarty

Slo DNA produce transformacin

Tema 6: Estructura y replicacin del 6

Dr. Antonio Barbadilla

Tema 6: Estructura y replicacin del 7

1. Proporcin de purinas = Proporcin de pirimidinas

Tema 6: Estructura y replicacin del 8

Dr. Antonio Barbadilla

Tema 6: Estructura y replicacin del 9

Dos lneas de evidencia:

Fotografas de difraccin de rayos X

Dr. Antonio Barbadilla

Tema 6: Estructura y replicacin del 10

Complementariedad de las basesy replicacin del

Tema 6: Estructura y replicacin del 12

Dr. Antonio Barbadilla

Separacin de las dos hebras por calor

Dr. Antonio Barbadilla

Tema 6: Estructura y replicacin del 18

Tema 6: Estructura y replicacin del 19

Tema 6: Estructura y replicacin del 20

La naturaleza de la secuencia lineal de los genes

Tema 6: Estructura y replicacin del 21

Tema 6: Estructura y replicacin del 22

Antes pensbamos que nuestro futuro

Dr. Antonio Barbadilla

Tema 6: Estructura y replicacin del 23

Tema 6: Estructura y replicacin del 24

Tema 6: Estructura y replicacin del J. Watson

Tema 6: Estructura y replicacin del 27

Tema 6: Estructura y replicacin del 28

Dr. Antonio Barbadilla

Tema 6: Estructura y replicacin del 29

It has not escaped our notice that the

Dr. Antonio Barbadilla

Tema 6: Estructura y replicacin del 30

Dr. Antonio Barbadilla

Tema 6: Estructura y replicacin del 31

Mathew Meselson Frank Stahl

Tema 6: Estructura y replicacin del 32

Tema 6: Estructura y replicacin del 33

Dr. Antonio Barbadilla

Tema 6: Estructura y replicacin del 35

Tema 6: Estructura y replicacin del 36

No funcionara la correccin de errores por

Dr. Antonio Barbadilla

Tema 6: Estructura y replicacin del 37

Dr. Antonio Barbadilla

Tema 6: Estructura y replicacin del 38

Dr. Antonio Barbadilla

Tema 6: Estructura y replicacin del 39

Dr. Antonio Barbadilla

Tema 6: Estructura y replicacin del 40

Dr. Antonio Barbadilla