Diferenciacin de Gneros

y Grupos Bacterianos de
Inters Mdico.

Criterios de Cowan y Steel,

Baron y Finegold.

M. en C. Alejandro Escamilla Gutirrez

Agosto - 2013
 Taxonoma o
Sistemtica

Es la ciencia que se encarga de

establecer la clasificacin, la
nomenclatura y la
identificacin de los
organismos.
 Taxonoma o
Sistemtica

La clasificacin, a su vez,
establece el arreglo ordenado
por grupos considerando los
niveles de subespecie, especie,
gnero, familia y ordenes
superiores.
 Primeras
clasificaciones
Las primeras clasificaciones
bacterianas se refirieron como
taxonoma numrica o taxonoma
fentica, ya que se
fundamentaron en el empleo de
50 a 200 caractersticas
bioqumicas, morfolgicas, de
cultivo, de susceptibilidad o
resistencia a agentes
antimicrobianos, que permitieron
Pruebas Bioqumicas
Morfologa
microscpica
Morfologa colonial
Sensibilidad o resistencia a los
antimicrobianos
 El Manual Bergey

La clasificacin y nomenclatura
ms confiable de las bacterias, se
integr en la obra Bergeys
Manual of Systematic
Bacteriology, la cual reuni los
diferentes grupos bacterianos en
4 volmenes publicados en los
80s.
 David Hendricks Bergey,
1923.

Determinativa
 El Manual Bergey,
80s.

Sistemtica
Clasificar a las especies a partir de
su historia evolutiva (filogenia).
 El avance tecnolgico

Como una consecuencia lgica del avance de

tcnicas a nivel molecular, en las que ahora se
suman criterios de anlisis de los cidos nucleicos de
las bacterias, se esta llevando a cabo una
reubicacin y ampliacin de la clasificacin,
llamndose en este caso taxonoma filogentica.
5 criterios:
Tamao del genoma
Contenido de guanina-citosina.
Ensayo de reasociacin del DNA en condiciones ptimas.
Ensayo de reasociacin del DNA en condiciones
subptimas.
Estabilidad trmica de secuencias relacionadas de DNA.
2001 Segunda edicin del Manual Bergey.
Taxonoma
Filogentica.
 Concepto:
Identificacin

Se refiere al uso prctico de los

criterios de clasificacin para
lograr la identidad de una
bacteria recuperada de una
muestra, lo cual implica la
aplicacin de una criterio
polifactico que combina criterios
fenotpicos y genotpicos.
Identificacin
Sistemas
Semiautomatizados o
automatizados
Medios cromognicos
Sistemas
Semiautomatizados o
automatizados
Video Vitek, Cmo
funciona?
 Propuestas

Diferentes autores han formulado

propuestas para lograr la
identificacin de bacterias en los
laboratorios clnicos, sin
embargo, no todos presentan un
esquema sencillo y rpido que
permita orientar a que grupo,
familia o gnero pertenecen.
 Criterios de Cowan y
Steel, Baron y Finegold.
Proponen una identificacin presuntiva a
partir de conformar dos grupos:
Bacterias Gram positivas Bacterias Gram negativas

Forma Forma
Acido resistencia Movilidad
Esporas Crecimiento aerobio
Movilidad Crecimiento anaerobio
Crecimiento aerobio Catalasa
Crecimiento anaerobio Oxidasa
Catalasa Prod. de cido de Glucosa
Oxidasa Va metablica de carbohidratos.
Prod. de cido de Glucosa
Va metablica de carbohidratos.
 Tincin de Gram

Cristal violeta
Iodo
Alcohol-Acetona
Safranina

Aplicacin del cristal Aplicacin del Iodo Decoloracin con el Aplicacin del colorante de
violeta (colorante (mordente) Alcohol-Acetona contraste; Safranina
morado)
Tincin de Ziehl-Neelsen

fucsina
Tincin de Shaeffer y
Fulton.
 Aplicando los Criterios:
Morfologa colonial

1. Sembrar por estra cruzada, en gelosa

simple e incubar en aerobiosis a 37C de
24 a 48 h.
- Capacidades Nutricionales.
2. Sembrar por estra cruzada, en gelosa
sangre de borrego (3-5%) e incubar en
aerobiosis a 37C de 24 a 48 h.
3. Sembrar por estra cruzada, en gelosa
sangre de borrego (3-5%) e incubar en
anaerobiosis a 37C de 24 a 48 h.
- Prueba de Aerotolerancia.
Prueba de Aerotolerancia.
Prueba de Aerotolerancia.
 Prueba de Aerotolerancia.

Aerobiosis Anaerobiosis

Aerobio Estricto

Anaerobio Estricto

Anaerobio Facultativo
 Pruebas Bioqumicas

Prueba de catalasa
Prueba en portaobjetos. Prueba
en placa.

Debido a la actividad de catalasa

contenida en los eritrocitos, se
recomienda que la prueba se
realice a partir de un cultivo en
Prueba de Catalasa

La catalasa es una enzima que descompone al

perxido de hidrgeno (3%) en oxgeno y agua,
esta enzima es similar a la estructura de la
hemoglobina.
 Pruebas Bioqumicas

Prueba de oxidasa
Prueba en papel filtro. Prueba en
placa O 2

Citocromo C

Es la deteccin de la enzima oxidasa. Se debe a la

presencia del sistema de citocromo-oxidasa, la cual
activa citocromos reducidos por oxgeno molecular, por
la transferencia de un aceptor al estado terminal del
 Prueba de Oxidasa.

Tetrametil-p-fenilendiamina al 1%; prpura

Dimetil-p-fenilendiamina al 1%; rosa
 Prueba de movilidad.

Se siembra el medio hasta unos

5 mm antes del fondo del tubo,
incubar en aerobiosis a 37C
de 24 a 48 h y observar el
crecimiento.
Semislido 0.4-0.5% Agar; Slidos 1.5%

reductasa
Prueba de movilidad.
 cido a partir de Glucosa

Incubar en aerobiosis a 37C 24

a 48 h y observar la utilizacin
del la Glucosa manifiesta por el
cambio del indicador a color
amarillo.
Caldo rojo de Fenol

7.2
Fundamentos
 Va Metablica

Prueba para demostrar la va

metablica de los carbohidratos.

Sembrar por picadura el medio O/F

(Hugh-Leifson) de Glucosa con
sello y sin sello de aceite mineral
en aerobiosis a 37 C de 24 a 48
h.
 medio O/F (Hugh-Leifson)

Sin Inocular Oxidativo Fermentador Asacaroitico

 medio O/F (Hugh-Leifson)

Fermentacin fosforilacin inicial; Oxidacin no compuestos inorgnicos

oxidacin directa
medio O/F (Hugh-Leifson)
Bacterias Gram
positivas
Bacterias Gram
negativas