M AYO R D E S A N M A R C O S
QUIMICA ORGANICA
DETERMINACIN
DE PROTEINAS
(Mtodo Kjeldahl)
Proteinas
Balanza analtica, sensibilidad 0.1 mg.
Equipo Kjeldahl
Manto calefactor
pHmetro
Equipo Kjeldahl
Manto calefactor
pHmetro
hidrxido
de
sodio al
15 %. incolora
cambiar
Calentar en manta calefactora y una vez que la
solucin est transparente, dejar en ebullicin 15 a 20
min. ms.
Si la muestra tiende a formar espuma agregar cido
esterico o gotas de silicona antiespumante y
comenzar el calentamiento lentamente.
muestra tiende
a formar espuma
cido esterico
Calentar lentamente
100 mL de NaOH al 30 %
Destilar no menos de 150 mL en un matraz que lleve
sumergido el extremo del refrigerante o tubo
colector en:
a) 50 mL de una solucin de cido sulfrico 0.1 N, 4 a 5 gotas
de rojo de metilo y 50 mL de agua destilada. Asegurar un
exceso de H2SO4 para que se pueda realizar la
retrotitulacin. Titular el exceso de cido con NaOH 0.1 N
hasta color amarillo
50 mL de 50 mL de
4 a 5 gotas
cido agua destilada
de rojo de metilo
sulfrico 0.1 N
Exceso
de H2SO4 NaOH
b) 50 mL de cido brico al 3 %. Titular con cido clorhdrico
0.1 N hasta pH 4.6 mediante un medidor de pH calibrado
con soluciones tampn pH 4 y pH 7, o en presencia del
indicador de Tashiro hasta pH 4.6
Titular
100 mL de 1 a 2 gotas de
10 mL de sulfato
agua destilada hidrxido de
de amonio 0.1 N
sodio al 30 %
Libera amoniaco
As como tambin verificar la recuperacin
destruyendo la materia orgnica de 0.25 g de
L(-)-Tirosina
CALCULO Y EXPRESIN DE RESULTADOS
14 x N x V x
100
% N = -----------------------
m x 1000
14 x N x V x 100 x
factor
% Protena
=---------------------------------
Donde: m x 1000