Biotecnologa
MICROBIOLOGA
Concepto de microorganismo:
Clsico: Microscopio (no solo unicelulares)
Actual: Autnomos para funciones
vitales
Clasificacin: (Whittaker 1969):
Reinos:
Monera, Protoctista, Fungi,
(microorganismos)
Metafitas y Metazoos ( no microorganismos)
REINOS
MICROBIOLOGA
Acelulares Virus
Hetertrofos
respiradores
Archaea (Arqueobacterias)
Reino Monera aerobios o
Procariotas
anaerobios
Hetertrofos
Levaduras Reino Fungi
Eucariotas fermentadores
HELICOIDALES
LOS VIRUS
ICOSAEDRICO
LOS VIRUS
COMPLEJOS
(bacteriofagos)
LOS VIRUS
MTODOS DE
ESTUDIO
Cultivos celulares
apropiados (segn el
hospedador) placas
petri
Tipos (ejemplos)
LOS VIRUS
(bacteriofagos)
C. LTICO: (bacteriofagos ej. fago T4)
1 Adsorcin: fijacin especfica (fibras caudales)
2 Penetreacin (lisozima y ATP) inyeccin del
ADN
3 Eclipse: Expresin de ARNm vrico:
a) endonucleasas vricas digestin de ADN bacteriano
b) replicacin (con aparato enzimtico bacteriano)
ADN vrico
c) transcripcin y traduccn de prot. vricas
(capsmeros , lisozima y endolisina)
4 Acoplamiento o maduracin (autoemsamblaje)
Nuevos fagos
5 Liberacin y Lisis bacteriana (endolisina)
LOS VIRUS
(bacteriofagos)
C. LISOGNICO: (fagos atenuados ej. fago )
1 y 2 Adsorcin y Penetracin similar a c. ltico
3 Insercin del ADN vrico en genoma bacteriano
profago (latente, no expresable y heredable)
4 Induccin (agentes fsicos o qumicos)
respuesta ltica
Respuesta ltica:
3Eclipse: Expresin de ARNm vrico:
4 Acoplamiento o maduracin (autoemsamblaje)
Nuevos fagos
5 Liberacin y Lisis bacteriana (endolisina)
Liberacin de nuevos fagos
LOS VIRUS
(bacteriofagos)
5 Liberacin
y Lisis bacteriana 1 Adsorcin
2 Penetracin
3 Insercin del
3 Eclipse ADN vrico profago
4 Acoplamiento 4 Induccin :
(autoemsamblaje) Respuesta ltica
LOS VIRUS
(bacteriofagos)
LOS VIRUS
VIRUS DEL SIDA
Familia de RETROVIRUS VIRUS CON
ARN Y TRANSCRIPTASA INVERSA
ESTRUCTURA
ESTRUCTURA:
Envoltura
Espculas vricas:
gp120, 41
Matriz: p 17,18
Bicapa:
hospedador
Capside ext.:
P 24, 25
Nucleocapside:
ARN +p 6, 7
Enzimas
vricas:
Integrasa
Retrotranscriptas
a
Proteasa
Ciclo
vital
del VIH
Ciclo vital del V.I.H.
1 Adsorcin:
Interaccin especifica gp 120 y gp 41 (receptores de endocitosis) de membrana de
Linfocitos T4
2 Penetracin: endocitosis
(fusin de membranas)
3 Liberacin de ARN vrico y retrotranscriptasa
sntesis de hebra hibrida ARN-ADN (retrotranscripcin)
replicacin de la hebra de ADN ADN2c Vrico
insercin en ADN celular (integrasa) lisognica (provirus fase de
latencia, individuos portadores, seropositivos)
4 transcripcin y traduccin
copias de ARN y protenas vricas (cpside, envoltura y enzimas)
5 Autoensamblaje y emigracin de gp de membrana en regin
exoctica
6 Liberacin y maduracin:
Exocitosis envoltura vrica (proteasa, fragmenta cadenas
polipeptdicas autoensamblaje definitivo)
LOS VIRUS
ORIGEN Y EVOLUCIN DE LOS VIRUS
Postcelulas:
Adaptacin al parasitismo, tb plsmidos y viroides
Preclulas:
Plsmidos, viroides y transposones intercelulares
ASPECTOS PERJUDICIALES
Patogeneidad enfermedades
Virus oncognicos cncer (lisogenia)
ASPECTOS BENEFICIOSOS
Procariotas: Fuente de variabilidad en Bacterias (transduccin
en c. Lisognico)
Eucariotas: Fuente de variabilidad, Biotecnologa y Terapia
gentica: vectores gentico
R. MONERA
Clasificacin
Segn nutricin
Segn fuente de C
Auttrofas
Hetertrofas
Fotoauttrofos facultativos
Segn fuente de energa :
Fototrofos
Quimiotrofos
Quimiolitotrofos
Quimiorganotrofos fermentadores
Quimiorganotrofos respiradores:
aerobios
anaerbios
R. MONERA
Clasificacin (algunos ejemplos)
Hetertrofos:
Aerobios estrictos: Mycobacterium tuberculosis
Anaerobios estrictos: Clostridium tetani
Anaerobios aereotolerantes: Bacterias lcticas (Lactobacillus bulgricus)
Anaerobios facultativos: Escherichia coli
Fotohetertrofos: Bacterias purpureas no sulfreas
Auttrofos:
Fotoauttrofos oxignicos: cianofceas (Nostoc)
Fotoauttrofos anooxignicos: bacterias sulfreas verdes y purpuras
Quimiolitotrficos: Bacterias nitrificantes (Nitosomonas)
R. MONERA
Clasificacin (cont.)
Segn modo de vida
No dependiente de hospedador:
Auttrofas : Quimio y fotoauttrofas
Hetertrofas: Saprfitas (descomponedoras)
Foto o quimiohetertrofas
Dependiente de hospedador:
Hetertrofas :
Simbiticas (Biota normal)
Parsitas (patgenos)
R. MONERA
Sistemtica
Eubacterias: bacterias verdaderas
Con Pared:
Gram + : quimioorganotrficas Ej. Streptomyces
Gram -: De todo, ej. Escherichia coli y Cianobacterias
Micoplasmas: No pared celular, parsitos obligados.
ej. Micoplasma pneumoniae.
Arqueobacterias (Tronco evolutivo diferente.
Condiciones extremas)
Halfitas:
medios salinos.
Termoacidfilas: pH, T. Ej. Thermus aquaticus
Metangenas
R. MONERA
Sistemtica
Eubacterias: bacterias verdaderas
Con Pared:
Gram + : quimioorganotrficas Ej. Streptomyces
Gram -: De todo, ej. Escherichia coli y Cianobacterias
Micoplasmas: No pared celular, parsitos obligados.
ej. Micoplasma pneumoniae.
Arqueobacterias (Tronco evolutivo diferente.
Condiciones extremas)
Halfitas:
medios salinos.
Termoacidfilas: pH, T. Ej. Thermus aquaticus
Metangenas
R. MONERA
Reproduccin
Biparticin
R. MONERA
Fuentes de variabilidad
Mutaciones
Fenmenos parasexuales
R. MONERA
Recordatorio
R. PROTOCTISTA
R. PROTOCTISTA (Uni y pluricelulares)
Concepto: Eucariotas. Sin tejidos
Clasificacin:
Protistas (protoctistas unicelulares)
Algas unicelulares:
FOTOAUTTROFAS .
Flagelados
Esporozoos
Sarcodinos
R. FUNGI
Concepto:
Hetertrofos.
Descomponedores (saprofitos)
Reciclador
Clasificacin:
Mohos: Pluricelulares (hifas y cuerpos fructferos
esporas) ej. Penicillium notatum
R. FUNGI
Clasificacin:
Mohos: Pluricelulares (hifas y cuerpos fructferos
esporas) ej. Penicillium notatum
Levaduras: Unicelulares gemacin
ej. Saccharomyces cerevisiae.
Mohos
Levaduras
Bacterias Algas Protozoos Hongos
INDUSTRIAS ALIMENTARIAS
Ferment. alcoholica (S. Cerevisae)
C6H12O6 2 CH3-CH2OH + 2CO2 + 2ATP
1.- Pan :
C6H12O6 (Hidrlisis de almidn) 2 CH3-CH2OH
Variedades
Tambin Fermentacin heterolctica:
lactosa 2 Etanol + 2 Lactato + 2CO2 (quesos con
agujeros)
2.- Productos lcticos : Bacterias lcticas + aditivos
BIOTECNOLOGA
INDUSTRIAS
ALIMENTARIAS
INDUSTRIA FARMACUTICA:
Vacunas:
Atenuacin:
Formaldehdo
pases
Antibiticos
Fermentadores (quimiostato)
Extraccin
Directa (insolubles)
Precipitacin (solubles)
Purificacin
BIOTECNOLOGA
Antibiticos
Fermentadores (quimiostato)
Permite mantener el
crecimiento
microbiano,
permanentemente en
fase exponencial.
INGENIERA GENTICA y
BIOTECNOLOGA MODERNA
Concepto: Tcnica de manipulacin de
un genoma
Tcnicas fundamentales
atm.
Calor seco: Estufa
Condiciones: Entre160 y 180C, de1.5 y 3hs
Radiaciones
Ionizantes: rayos X y Gamma
No ionizantes: U.V.
Procesos qumicos (oxidantes)
oxido de etileno (C2H4O)
aldehdos (formaldehdo)
agua oxigenada
ozono etc.
CMO PODEMOS OBSERVAR
LOS MICROORGANISMOS?
2 Medio de cultivo (genrico o especfico): lquido o slido
(agar)
Esterilizacin y conservacin del medio: autoclave y nevera 4C (sin
luz)
Clon
CMO PODEMOS OBSERVAR
LOS MICROORGANISMOS?
8 Pruebas bioqumicas
diferenciales:
Gram +
(ej. catalasa, Indol, ) Ej. Lactobacillus
Ej. E. coli (Indol +)
Enterobacter (Indol -)
Ej. Staphilococcus
(catalasa +)
Ej. Streptococcus
(catalasa -)
Gram
Ej. E. coli
9 Tincin
(ej. tincin de Gram)
CMO PODEMOS OBSERVAR
LOS MICROORGANISMOS?
10. Observacin con microscopio (mnimo 1000x)
TEMA 13
TEST DE REPASO
Qu tienen en comn un hongo, una bacteria y un protozoo para que los tres
se estudien bajo el epgrafe de microorganismos?. A nivel nutricional qu
diferencias o similitudes presentan entre s?. Cita un ejemplo de parasitismo y
otro de simbiosis que conozcas en la naturaleza y en la que intervengan
respectivamente, cada uno de los tres tipos de organismos citados.
a) Vida (funciones vitales) a partir de estructura unicelular o
agrupacin multicelular simple.
b)
1. Hongo: hetertrofo fermentador (anaerobio: levaduras) o hetertrofo
aerobio (mohos)
2. Protozoo: hetertrofo aerobios (respiradores)
3. Bacterias: Todos los metabolismos posibles (auttrofos,
hetertrofos)
c)
Parasitismo:
1. Hongo :Candida albicans candidiasis
2. Protozoo: Plasmodium falciparum Malaria
3. Bacteria: Treponema palidum Sfilis
Simbiosis:
1. Hongo: lquenes, Cndida.
2. Protozoo: alga intracelular, flagelados + termitas,+ espiroquetas, etc.
3. Bactria: E. coli+ humano, Rhizobium + leguminosa, etc.
Teniendo en cuenta los diferentes tipos de bacterias, segn su tipo de nutricin y
estilo de vida, indicar de donde obtienen en cada caso los siguientes elementos:
N,C,P. Razona la respuesta.
5 Liberacin
y Lisis bacteriana 1 Adsorcin
2 Penetracin
3 Insercin del
3 Eclipse ADN vrico profago
4 Acoplamiento 4 Induccin :
(autoemsamblaje) Respuesta ltica
Dibuja la estructura del virus del SIDA sealando las partes ms importantes
del mismo, indicando en cada caso qu tipo de biomolculas (protenas,
lpidos, glicoprotenas, etc) componen cada una de ellas.
Envoltura
Espculas vricas: gp120,
41
Matriz: p 17,18
Bicapa: hospedador (prot
+ lpidos) de membrana
Capside ext.:
P 24, 25
Nucleocapside:
ARN + p 6, 7
Enzimas vricas
(proteicas):
Integrasa
Retrotranscriptasa
Explica brevemente (no ms de 10 lneas) la relacin existente entre
microorganismos, ingeniera gentica , transgnico y biotecnologa.
1 Esterilizacin
a) Toma y tcnicas
de muestras, aspticas
cultivo esteril y genrico., observacin de
2 Medio de macro
estructuras cultivo(colonias)
(genrico oy especfico):
microscpica lquido o slido
(tinciones) (agar)
y pruebas
3 Esterilizacin
bioqumicas y conservacin
especficas deletc.).
(catalasa, medio: autoclave y nevera 4C (sin luz)
4 Toma de muestras (ej. bastoncillo) y siembra (asa de siembra)
Colonia monoclonal
b) Diferentes cultivos selectivos (condiciones especficas):
5 Incubacin
Bacterias: (estufa),
medios durante
genricos. periodos
Para de tiempo
identificar determinados
bacterias especficas: 6
Aislamiento (toma de muestra
medios y condiciones monoclonal,
selectivas + pruebas de una colonia
bioqumicas nicamente)
(catalasa,
7 Resiembra
indol, etc.) en medio genrico o selectivo (ej. Lactosa, 45 C para E. coli)
8 Pruebas
Hongos: bioqumicas
medios cultivo diferenciales
para hongos:(ej. catalasa,indol,
lquido ) +
o slido (agar)
9 Tincin (ej.
nutrientes tincin +devitaminas,
orgnicos Gram) oligoelementos, etc) + pH cido +
10. Observacin
antibiticos con microscopio
antibacterianos. El pH (mnimo
ha de ser1000x)
ligeramente cido para
facilitar el crecimiento de los hongos e inhibir al mismo tiempo el
desarrollo de otros microorganismos. Se aadirn antibiticos
antibacterianos para inhibir el crecimiento de las bacterias
saprofitas que suelen contaminar las muestras. Los ms usados
son el Cloranfenicol y la Gentamicina.
Virus: Parsitos obligados, solo crecern si el medio contiene
cultivos celulares. Si se observan calvas de crecimiento en los
mismos, es indicativo de presencia de virus.