UNIVERSIDAD NACIONAL SAN LUIS GONZAGA DE ICA

FACULTAD DE INGENIERIA AMBIENTAL Y SANITARIA

Escuela Profesional de ingeniera

ambiental y sanitaria

ESTERILIZACIN

DOCENTE:

Ing. Julia Torres

CURSO:
Biotecnologa

CICLO:
IX ciclo

ALUMNA:

Ramos Suarez Diana Medaly

 ANTECEDENTES
Dennys Papin (1680). Ideo un equipo
llamado digestor de vapor, antecesor de
las autoclaves de vapor actuales.
Lzzaro Spallanzani, naturista italiano (1765).
Dise un esterilizador.
William Henri, qumico ingls (1832), Sellado
de calor seco (aire caliente)
Louis Pasteur (1866), Inici el procedimiento
de pasteurizacin.
Charles Chamberland (1880).Hizo la primera
autoclave de vapor a presin.
Kurt Schimmelbusch (1885) Primero en
utilizar el esterilizador para la esterilizacin
de campos quirrgicos.
J. J. Kinyoun (1888), bacterilogo
 GENERALIDADES

ESTERILIZACIN:eliminacin o muerte de todos los

microorganismos que contiene un objeto o sustancia, y que
se encuentran acondicionados de tal forma que no pueden
contaminarse nuevamente.
SANITIZANTE:agente que disminuye la carga microbiana
total a un nivel el cual es seguro para la salud de la
poblacin. Slo es aplicable sobre objetos inanimados.
DESINFECTANTE:agente que elimina la carga microbiana
total en superficies inanimadas tales como habitaciones.
QU ES LA ESTERILIZACIN?

Es la eliminacin o muerte de todos los

microorganismos que contiene un objeto o
sustancia, y que se encuentran
acondicionados de tal forma que no pueden
contaminarse nuevamente.
Es un proceso cuyo objetivo consiste en
destruir o eliminar microorganismos presentes
en un objeto o en una preparacin (Gennaro,
2003).
En las fermentaciones comerciales se
necesitan generalmente miles de litros de
 AGENTES ANTIBACTERIANOS ESTERILIZANTES Y/O DESINFECTANTES

1.Provocanprdida de la viabilidad en los

microorganismos
Fsicos(calor, radiaciones)
Qumicos(xido de etileno, formaldehdo, agentes
2.Provocan una separacin
oxidantes, soluciones de los
antispticas.)
microorganismos de la sustancia lquida
Filtracin(se eliminan los microorganismos
presentes en un fluido).
 MTODOS DE ESTERILIZACIN

Los microbios se eliminan, inhiben o matan

por medio de agentes fsicos o agentes
qumicos, otros incluyen los agentes
mecnicos.
Los mtodos de esterilizacin comprenden
entonces, todos los procedimientos fsicos,
mecnicos y qumicos que se emplean para
destruir grmenes patgenos.
MTODOS DE ESTERILIZACIN
Los mas utilizados en la actualidad son los
mtodos fsicos (calor, radiaciones, filtracin,
centrifugacin) y los mtodos qumicos
(agente qumico).
MTODOS FISICOS DE
ESTERILIZACIN
A. ESTERILIZACIN POR CALOR
Todos los microorganismos son
susceptibles, en distinto grado, a la accin
del calor. El calor provoca desnaturalizacin
de protenas, fusin y desorganizacin de
las membranas y/o procesos oxidativos
irreversibles en los microorganismos.
La efectividad del calor como mtodo de
esterilizacin depende de:
Temperatura
Tiempo de exposicin
 CALOR HMEDO
El calor hmedo produce desnaturalizacin y coagulacin de
protenas. Estos efectos se deben principalmente a dos razones:
1) El agua es una especie qumica muy reactiva y muchas
estructuras biolgicas son producidas por reacciones que
eliminan agua. Por lo tanto, reacciones inversas podran daar
a la clula a causa de la produccin de productos txicos.
2) El vapor de agua posee un coeficiente de transferencia de
calor mucho ms
Elautoclavees elevadoms
el aparato quecomnmente
el aire. utilizado
en los laboratorios para esterilizar cultivos y
soluciones que no formen emulsiones con el agua y
que no se desnaturalicen a temperaturas mayores a
100 C. Una temperatura de 121 C (una atmsfera
de sobrepresin) con un tiempo de exposicin mayor
TABLA N 2: VENTAJAS Y DEL CALOR HMEDO
 CALOR SECO
El calor seco produce desecacin de la clula, efectos txicos
por niveles elevados de electrolitos, procesos oxidativos y fusin
de membranas. Estos efectos se deben a la transferencia de
calor desde los materiales a los microorganismos que estn en
contacto con stos. El aire es mal conductor del calor, y el aire
caliente penetra ms lentamente que el vapor de agua en
materiales
Laestufa de esterilizacines el artefacto utilizado en
porosos.
los laboratorios para esterilizar por calor seco. Se
requiere mayor temperatura y tiempo de exposicin
que el autoclave. La temperatura vara entre 120 y
180C, requirindose distintos tiempos de exposicin.
A 140C se necesitan por lo menos 5 horas de
exposicin, mientras que a 160C se requieren al
TABLA N 3: VENTAJAS Y DESVENTAJAS
Mtodos que utilizan:

Flameado: Consiste en la exposicin

directa del instrumento a una flama
en forma directa.
Incineracin: Consiste en someter el
material contaminado a altas
temperaturas en hornos especiales .
Estufa (Horno Pasteur de aire
caliente).
B. ESTERILIZACIN POR
RADIACIONES
RADIACIONES IONIZANTES: Producen iones y radicales
libres que alteran las bases de los cidos nucleicos.
Gran penetrabilidad y se las utiliza para esterilizar
materiales termolbiles(termosensibles)
RAYOS GAMMA: Puede esterilizar antibiticos, vacunas,
alimentos, etc.
RAYOS X: Penetran bien, pero requieren mucha energa.
RAYOS ULTRAVIOLETAS: Afectan a las molculas de DNA
de los microorganismos, debido a que forman dmeros
de pirimidinas adyacentes que inducen errores en la
duplicacin y por lo tanto la prdida de la viabilidad
de las clulas. Son escasamente penetrantes.
B. ESTERILIZACIN POR
FILTRACIN
Se usan membranas filtrantes con poros de un tamao determinado. El
tamao del poro depender del uso al que se va a someter la muestra.
Existen tres tipos bsicos de filtros:
Filtros profundos o Filtros de profundidad:consisten de un material fibroso o
granular prensado, plegado, activado, o pegado dentro de los canales de
flujo. En este tipo de filtros la retencin de las partculas se produce por
una combinacin de absorcin y de retencin mecnica en la matriz..
Membranas filtrantes:tienen una estructura continua, y la retencin se debe
principalmente al tamao de la partcula. Partculas ms pequeas al
tamao del poro quedan retenidas en la matriz del filtro debido a efectos
electrostticos.
Filtros de huella de nucleacin (Nucleoporo):son pelculas muy delgadas de
policarbonato que son perforadas por un tratamiento conjunto con radiacin
y sustancias qumicas.
APLICACIONES DE LA ESTERILIZARON POR
FILTRACIN
MTODOS QUMICOS DE
ESTERILIZACIN
 MTODOS QUMICOS
Dentro de los compuestos qumicos podemos encontrar agentes esterilizantes,
desinfectantes y antispticos
La efectividad de estos agentes depende de las condiciones bajo las que actan.
Concentracin:vara con el tipo de agente y de microorganismo, pues una misma
concentracin del agente puede producir un efecto diferente en distintos
microorganismos.
Tiempo:los microorganismos no son susceptibles a un agente en la misma forma, por
lo que no todos los microorganismos mueren al mismo tiempo.
pH:afecta tanto a los microorganismos como a los agentes qumicos. El aumento de
pH por encima de 7 incrementa la carga negativa de los microorganismos afectando la
concentracin del agente sobre la clula. El pH determina el grado de disociacin y la
efectividad del agente qumico, pues a menor disociacin mayor permeabilidad y mayor
efectividad.
.
MTODOS QUMICOS
A. ANTISPTICO
S
ALCOHOLES

Lesionan la membrana celular de los microorganismos y

desnaturalizan protenas celulares. Desorganizan la
estructura fosfolipdica.
Se utilizan en concentraciones del 50 al 70%. Los ms
utilizados
IODO

son el etanol e isoproplico.
Es un agente oxidante que modifica grupos funcionales de
protenas y cidos nucleicos. Inactiva protenas y enzimas
por oxidacin de los grupos -SH a S-S, pudiendo atacar
tambin grupos amino, indoles, etc.
Es efectivo contra esporas en una concentracin de 1600
ppm de iodo libre.
RGANOS MERCURIALES
Estos tipos de compuestos se combinan con los grupos -SH

de las protenas, inactivando enzimas. Dentro de los

mercuriales orgnicos se encuentran elmetafeny elmertiolate.

PERXIDO DE HIDRGENO
Es un antisptico dbil, con capacidad oxidante y
formadora de radicales libre. Actualmente, el perxido
de hidrgeno gaseoso se est utilizando como
desinfectante de superficies o descontaminante de
gabinetes biolgicos debido a que no posee las
propiedades txicas y cancergenas del xido de etileno
B. DESINFECTANTES Y/O
ESTERILIZANTES
CLORO
El cloro, los hipocloritos y las cloraminas son desinfectantes

que actan sobre protenas y cidos nucleicos de los

microorganismos. Oxidan grupos -SH, y atacan grupos
aminos,
ALDEHDOSindoles y al hidroxifenol de la tirosina.
Son agentes alquilantes que actan sobre protenas, lo que
provoca modificacin irreversible de enzimas e inhibicin de la
actividad enzimtica (Adicin nucleoflica de grupos -NH2 y
-SH).
El glutaraldehdo es el nico esterilizante efectivo en fro. El
formaldehdo como gas se utiliza para descontaminar edificios,
COMPUESTOS FENLICOS
Son desinfectantes que provocan lesiones en la membrana
citoplasmtica porque desordenan la disposicin de las protenas y
fosfolpidos. Esto causa filtracin de compuestos celulares,
inactivacin de enzimas y lisis.
El fenol no es usado a menudo como desinfectante por su olor
desagradable, por ser muy irritante y por el residuo que queda
luego de tratar las superficies.
XIDO DE ETILENO
Es un agente alquilante que se une a compuestos con hidrgenos
lbiles como los que tienen grupos carboxilos, amino, sulfhdricos,
hidroxilos, etc.
Es utilizado en la esterilizacin gaseosa, generalmente en la
industria farmacutica. Sirve para esterilizar material termo
sensibles como el descartable y plstico, equipos electrnicos,
bombas cardiorrespiratorias, etc. Es muy peligroso por ser
CONTROLES EN ESTERILIZACIN
CONTROLES DE ESTERILIZACIN
A.CONTROLES DE ESTERILIZACIN

Son controles que se realizan sobre el mtodo de esterilizacin .

Monitorean o controlan si el proceso de esterilizacin funciona

Controles Biolgicos
correctamente .

Utiliza indicadores biolgicos como controles del proceso de

esterilizacin. Estos indicadores son preparaciones

estandarizadas de microorganismos relativamente resistentes al
mtodo de esterilizacin que se emplea. Los indicadores se
procesan en forma conjunta con el material a esterilizar y el
nmero de microorganismos presentes en el indicador es mayor
que el que se encuentra en el material.

Una vez concluido el proceso de esterilizacin los indicadores son

inoculados en medios de cultivo adecuados e incubados durante
un determinado perodo de tiempo. Si el proceso de esterilizacin
fue correctamente empleado y funciona bien no debe observarse
desarrollo del indicador incubado.
B. CONTROLES DE ESTERILIDAD

Permite controlar en forma probabilstica si el material qued

completamente esterilizado pues se testea un porcentaje
representativo de todo el material.
|

Transferencia Directa a Medios de Cultivo

Se transfiere una parte de la muestra a medios de cultivos
apropiados que permitan el crecimiento de cualquier
contaminante.
Tioglicolatopara anaerobios y aerobios (37C)
Tripticasa-Sojapara aerobios (25C)
Test de Promocin del Crecimiento
Es un testigo del control de esterilidad. Son testigos que se utilizan para
los medios de crecimiento del control ya que estos medios tienen
capacidad de promover el crecimiento. Para estos testigos se utilizan
microorganismos con exigencias nutricionales. Los medios deben ser
inoculados con un bajo nmero de microorganismos, se incuban durante 7
Test de Bacteriostasis
Es un control que se realiza para determinar si la
muestra supuestamente estril no posee propiedades
bacteriostticas. De esta forma se previenen falsos
negativos pues no se produce crecimiento habiendo en
la muestra microorganismos viables. Para este test se
toman los medios de cultivo con microorganismos de
ensayo y se siembran en las muestras a testear. Se
incuban durante 7 das. Si se produce crecimiento esto
indica que el material no contena inhibidores.
Filtracin por Membranas
Se utiliza para determinar la esterilidad de medios de
cultivo, soluciones de antibiticos, etc. Se filtran los
medios y se procesa el filtro como en un control de
esterilidad para determinar si hay microorganismos
presentes.