AMMONIA II

ANNISA RAHMADINI
(411115019)

S T I K E S J E N D R A L A C H M A D YA N I
LATAR BELAKANG

Amonia memasuki tubuh dalam makanan yang mengandung nitrogen

melalui saluran gastrointestinal dan diekskresikan sebagian besar sebagai
urea dalam urin dan sebagai protein bakteri pada feses. Ammonia, produk
akhir metabolisme nitrogen diserap ke dalam darah vena portal dan,
setelah melewati hati Memasuki sirkulasi sistemik. Biasanya sekitar
setengah amonia diekstraksi dari tubuh oleh kerangka dan sekitar 16% oleh
hati dan otak. Secara klinis, ekstraksi amonia oleh organ individu memiliki
implikasi yang berbeda. Konversi hati amonia oleh otak mengakibatkan
keracunan amonia, peningkatan tekanan intrakranial dan ensefalopati
hepatik. Hiperamonia pada bayi mungkin disebabkan oleh defisiensi enzim
siklus urea yang diturunkan atau didapat melalui sindroma akut (seperti
pada sindrom reye) atau penyakit hati kronis (seperti pada sirosis).
 TUJUAN
Diagnostik spektrum amonia 2 pereaksi adalah yang
dibutuhkan untuk invitro kuantitatif, penentuan diagnostik
amonia dalam plasma manusia pada sistem otomatis dan
manual.
METODE
Kinetik enzimatik dengan glutamate dehydrogenase
REAGENTS

Standar ammonia (ST)

521 g/dl 307 mol/L
Reagent R1a Buffer
tris buffer (ph 8.0) 50 mmol/L
GLDH >6 kU/L
LDH >2 kU/L
EDTA 5.3 mmol/L
Reagent R1b
coenzyme (NADH) 0.18 mmol/L
Reagent R2
ketoglutarate 18 mmol/L
HAL YANG HARUS DIPERHATIKAN
Jangan menelan atau menghirup Jika kena mata atau kulit, segera bilas
dengan banyak sabun dan air. Dalam kasus luka parah; segera dapatkan
bantuan medis.

PERSIAPAN REAGENT
Ditambahkan 2 ml dari reagent R1b ke botol reagent R1a, dihomogenkan
dan siapkan larutan kerja berdasarkan dari nomer dari test yang
dibutuhkan dengan mencampurkan 9 volume dari reagent 1a (R1a) and
1volume of reagent 1b (R1b): eg. 900 ml R1a + 100 l R1b

PENYIMPANAN REAGENT & STABILITAS

Semua regent stabil sampai tanggal kaldaluarsa yang tertera pada label
saat dimasukkan kedalam lemari pendingin pada 2-8oC
Campuran R1 stabil Selma 1 bulan pada 2-8oC
KERUSAKAN
Jangan menggunakan reagen ammonia II jika bersifat keruh atau jika
absorbans reagen yang bekerja kurang dari 1,0 pada 340 nm. Kegagalan
untuk memulihkan nilai kontrol dalam kisaran yang ditetapkan mungkin
merupakan indikasi kerusakan reagen

PENGUMPULAN SAMPEL & PENANGANAN

EDTA adalah satu-satunya antikoagulan yang dapat diterima karena mengurangi
produksi amoniak sel darah merah. Antikoagulan lainnya menghasilkan hasil spontan
tinggi. Kumpulkan darah dari vena bebas stasis pasien puasa. Perokok harus dihindari
sebelum sampel. Tabung harus diisi sepenuhnya dan dipegang erat-erat setiap saat.
Tempatkan segera di atas es dan centrifuge, lebih disukai pada suhu 4 oC. Lakukan
analisis dalam waktu 30 menit setelah venipuncture.

Catatan: hindari kontaminasi sampel dengan amonia dari merokok atau lalu lintas di
laboratorium atau kamar pasien, barang pecah belah, atau air. Satu sumber yang
diketahui pembentukan amonia spontan adalah peningkatan aktivitas glutamilase-
transferase yang menyebabkan dekomposisi glutamin
SISTEM PARAMETER
Panjang gelombang 340 nm
Jalur optical 1 cm
Jenis uji fixed rate
Arah menurun
Waktu pembacaan pertama 2 detik
Waktu tunda 300 detik
Waktu pembacaan akhir 5 menit
Temperatur 37 oC
Zero adjustment reagen blank
Reagent blank limits rendah 1.00 AU
tinggi 2.0 AU
Sensitifitas 9 g/dl (5.3 mol/L)
Linear 1700 g/dl (1000 mol/L)
 CARA KERJA
Standar Specimen Reagent blank
R1 mixture 1ml 1ml 1ml
Standard 100 l - -
Specimen - 100l -
Dist H2O - - 100l
Inkubasi Selama 3
menit
pada 37 oc, lalu
tambahkan
R2 100l 100l 100l

Dihomogenkan, Segera baca absorbansi a.1 dari standar atau spesimen

terhadap reagen blank. Tepat 5 menit kemudian, baca absorbansi a2 dari
standar atau spesimen .
KALKULASI
A1 A2= A spesimen atau A standar
Konsentrasi dari ammonia dalam plasma:
Ammonia (g/dl) = A spesimen
521
A standar

QUALITY KONTROL
Kontrol komersial normal & abnormal dari konsentrasi yang diketahui harus
dianalisis dengan masing-masing pengerjaan
 KARAKTERISTIK & PRESISI
Tanpa run
(pengulangan)
Level 1 Level2
n 20 20
Mean (g/dl) 1.8 3.5
SD 0.04 0.06
CV% 2.3 1.3

Run to run
(Reproduktifitas)
Level 1 Level2
n 20 20
Mean (g/dl) 1.8 3.5
SD 0.07 0.14
CV% 3.4 4.1
PERBANDINGAN METODE
Perbandingan antara diagnostik spektrum reagen amonia dan
reagen komersial dengan metodologi yang sama dilakukan pada
20 plasma manusia. Sebuah korelasi diperoleh sebesar 0,976

SENSITIFITAS
Bila dijalankan seperti yang direkomendasikan, batas
deteksi minimum dari pengujian ini adalah 9.0 g/dl

LINEARITAS
Reaksinya linier sampai konsentrasi amonia 1700 g/dl
ZAT PLASMA PENGGANGU
Hemolisis
Hindari spesimen hemolitik karena RBC mengandung tiga kali kadar amonia plasma.
Icterus
Tingkat bilirubin lebih tinggi dari 30 mg / dl meningkatkan konsentrasi amonia secara signifikan.
Globulin.
Tingkat globulin yang meningkat (lebih dari 3 g/dl) dapat meningkatkan nilai konsentrasi amonia yang nyata.
Lipemia
Sampel lipemic harus disentrifugasi dan analisis dilakukan pada supernatan.
Antikoagulan
Fluoride, sitrat, dan heparin tidak boleh digunakan.
Obat-obatan
Sodium cefoxitin menyebabkan nilai amonia tinggi artifisial pada tingkat obat yang diuji

NILAI NORMAL ANALYTICAL RANGE

EDTA plasma
9 1700 g/dL
Dewasa
Wanita 19- 87 g/dl (11-51 mol/L)
Pria 27-102 g/dl (16-60 mol/L)
Anak-anak <81.5 g/dl (<48 mol/L)
Neonatus (1-6 hari) <228 g/dL (<134 mol/dl)
TERIMA KASIH