VIRUS OROPUCHE

NELSON DAVID MNDEZ LVAREZ

Maestra en Microbiologa Tropical

Universidad de Crdoba
 INTRODUCCIN

El virus Oropuche es un arbovirus que se transmite a vertebrados

hospederos por picaduras de mosquitos y/o culicoides flies(Bastos et al., 2012)

Responsable de la Fiebre de Oropuche

Familia Bunyaviridae
Hantavirus (24 spp) Tosposvirus (9 spp)
Nairovirus (7 spp) Orthobunyavirus (48 spp)
Phlebovirus (9 spp) Enfermedades febriles y encefalitis OROV
Encefalitis LACV
Fiebres hemorrgicas Ngari virus

Caractersticas
Antignicamente pertenece al grupo Simbu
El virus presenta hemaglutinacin activa en eritrocitos de gansos.
Se reproduce en numerosos cultivos celulares y causa efecto citoptico
Su manipulacin se restringe a laboratorios de nivel 3 (Saed et al., 2001)

http://www.ictvonline.org/virusTaxonomy.asp?msl_id=28 Journal of General Virology (2011), 92, 24672484

Textbook of pediatric infectious diseases , 2004
 Estructura

Dissertacao_Epidemiological Tese_Soroprevalencia
 PROTEINAS ESTRUCTURALES DEL GENOMA VIRAL
GLICOPROTEINAS DE SUPERFICIE
Gn y Gc forman un trmero de
heterodmeros que da lugar a las
espculas de la partcula viral
Cuando Gc es expresada sola, es
retenida en el retculo endoplas-
mtico, lo que sugiere que Gn
funciona como una chaperona para
el correcto trfico de Gc al complejo
de Golgi
PROTEINAS INTERNAS
Protena N
Encapsida los tres segmentos
de ARN para formar una
ribonucleoprotena compleja
que se asocia con la RNA
polimerasa viral dependiente de
ARN
Producida p/p por las clulas
infectadas
Altamente inmunognica
Forma anticuerpos fijadores de
complemento
Protena L
RNA polimerasa viral
dependiente de ARN
Responsable de la transcripcin
y replicacin del genoma viral
 PROTEINAS NO ESTRUCTURALES DEL GENOMA VIRAL

NSm NSs

Podria estar relaciona con el Altamente patognica

ensamblaje y empaquetamiento del Inhibe la traduccin del genoma de
genoma viral la clula husped durante la
replicacin viral

Se relaciona con mecanismos de

apoptosis

En algunos Bunyavirus esta

relacionada con mecanismos
antagnicos a la induccin del
interfern tipo I y a la inmunidad
innata

Induce el cese de protenas

Suprimen la interferencia del
RNA e inhiben la transcripcin
de INF.
 PATOGENESIS:
INTERACCIONES VIRUS-VECTOR-HOSPEDERO

Capacidad para adaptarse,

evadir los mecanismos
inmunolgicos y replicarse
en vectores y hospederos
Capacidad para almacenar y
transmitir el virus

Susceptibilidad para
permitir la infeccin

Anes et al., 2012

 PATOGENESIS EN VECTORES

INFECCIN REPLICACIN

El virus es adquirido por hembras El virus se replica en las clulas

hematfagas cuando se alimentan del intestino y posteriormente se
de hospederos infectados adhiere a las glndulas salivales
La infeccin persiste hasta la donde la infeccin es persistente
muerte

SINTOMAS TRANSMISIN

La infeccin ocurre de forma Transmisin horizontal

asintomtica o se muestran pocos Transmisin vertical
signos de la infeccin
 PATOGENESIS EN VERTEBRADOS
INICIO
Picadura de un vector infectado,
Inoculacin intradrmica, subcu-
tnea, intracerebral.
DIFUSIN
Musculo estriado ENTRADA
Extensiva replicacin Viremia
Difusin a tejidos diana
El virus puede alcanzar y penetrar
las barreras que regulan la
entrada de sangre al cerebro
Infeccin en el SNC (dependiente
de la edad) Encefalitis
Elliot, 2014. Nature reviews
 PATOGENESIS: MODELOS ANIMALES

Durante las fases tempranas de la

BALB/c infeccin, OROV se disemina por el
sistema nervioso central va cordn
espinal y subsecuentemente transita al
cerebro
Letalidad 85%
(22)

Deteccin de OROV en
cerebro y cordn
espinal

Mesocricetus auratus

Letalidad 30% (21)

ENTRADA DEL VIRUS A LA CLULA
 PATOGENESIS EN HUMANOS

INCUBACIN POST-INCUBACIN

Periodo de incubacin de 4-8 das Desarrollo de los sntomas

Viremia
2 das ttulos virales 105 a
105.3 DL50/0.02 mL
3 da disminuye a un72%
4 da 44%
5 da 23%
(pinheiro et al., 1981)
Duracin: una semana
Recidivas: 1 a 2 semanas de
desaparecer los sntomas
iniciales
Fenmenos hemorrgicos:
Petequias
Epistaxis
Sangrado gingival

Secuelas encefalitis (menos del

5% de los casos)
OROV aislado del liquido
cerebroespinal de algunos
pacientes
meningoencefalitis

NO SE HAN CONFIRMADO CASOS DE MORTALIDAD

 TEJIDOS DIANA

Cerebro

OROV
Hgado Culicoides

Fibroblastos

Fase sangunea
SINTOMAS

Artralgias
Mialgias
Rash Cutneo
Congestin conjuntival
Dolor retro-ocular
Lancet, 1961; 10(4):574-8

Primeros reportes

Trinidad y Tobago (1955)

Vegas de Oropuche

Paciente febril
Mosquito Coquillettidia venezuelensis
EPIDEMIOLOGIA
Am. J. Trop Med. Hyg., 30(1), 1981, pp. 149-160
Am. J. Trop Med. Hyg., 30(1), 1981, pp. 149-160
Oropouche virus: lsolations and antibody determinations in wild and domestic vertebrates during epidemics

Am. J. Trop Med. Hyg., 30(1), 1981, pp. 149-160

Am. J. Trop Med. Hyg., 30(1), 1981, pp. 149-160
Am. J. Trop Med. Hyg., 30(1), 1981, pp. 149-160
Revista da Sociedade Brasileira de Medicina Tropical, 1996;29:537-541,.

: Resultados

Muestras Seroprevalenci
Muestras
positivas a
296 245 82.7%

: 6 seroconversiones

Taxa de ataque
infeco de cerca de
83% 5000 pessoas

Isolamento e identificao do vrus

O vrus Oropouche foi isolado do sangue de

dez (18,5%) do 54 pacientes febris.
Pruebas serolgicas
Nenhuma cepa do vrus Oropouche foi
HI e MAC ELISA contra a cepa isolada de 79 lotes de artrpodes (2400 C.
BEAN 19991 (topotipo no Brasil) do pareaensis e 1036 C. quinquefasciatus)
vrus Oropouche inoculados em camundongos recm-nascidos.
Revista da Sociedade Brasileira de Medicina Tropical, 2004; 37(6):476-479

RESULTADOS

No perodo de maro de 1998 a dezembro de

1999, foram testadas 8.557 amostras, das quais
40% foram positivas para dengue

Pruebas serolgicas
teste MAC-ELISA: anticorpos IgM para dengue,
mayaro e oropouche
kits ELISA comerciais (Rubenostika IgM II ,
Enzygnost IgM, Parvovirus B19 IgM EIA)
Emerging Infectious Diseases, 2007; 13(6):915-912

Serological tests
109 (5.45%) HI and immunoglobulin MELISA

Virus isolation
125 (12.8%) Samples: 54 and 11 serum samples from
Parauapebas and Porto de Moz

By intracranial injection of newborn mice

Identification of isolates: performed by
complement fixation

RTPCR
Viral RNA was extracted from Vero cells
infected with human samples, and S RNA was
amplified

Figure 1. Map of Brazil showing locations where Oropouche

fever outbreaks were identified up to 20032004.
 Results
Serological tests

Muestras positivas Seroprevalencia

localidades Muestras
HI ELISA HI ELISA
Parauapebas 125 26 30 20.8% 24%
Porto do Moz 117 56 61 46.7 52.1%

Virus isolation

Two OROV strains were isolated from patients in Parauapebas (Brazil 2003a
and Brazil 2003b), and 2 strains were isolated from patients in Porto de Moz
(Brazil 2004a and Brazil 2004b).

Nucleotide sequencing of 2 OROV isolates from each location indicated

genotypes I (Parauapebas) and II (Porto de Moz) in Brazil.

Emerging Infectious Diseases, 2007; 13(6):915-912

Emerging Infectious Diseases, 2009; 15(2):348-350

Sporadic Oropouche Virus Infection, Acre, Brazil

Ana Carolina Bernardes Terzian, Roberta Vieira de Moraes Bronzoni, Betnia Paiva
Drumond, Mnica Da Silva-Nunes, Natal Santos da Silva, Marcelo Urbano Ferreira,
Mrcia Aparecida Sperana, and Maurcio Lacerda Nogueira

The Study
Screened for malarial, for flaviviruses and
alphaviruses.

Negative samples were further tested for OROV with

primers targeting the S segment of the OROV genome
in a seminested RT-PCR strategy and for OROV with
primers (GenBank, accession no. EU561644) targeting
the S segment of the OROV genome in a seminested
RT-PCR strategy.

The sample also was isolated in Vero cells, and the RT-
PCR was used for confirmation.

Results

One (1.4%) of 69 samples tested for OROV by

From march 2004 through October heminested PCR was positive.
2006 we prospectively
investigated
69 febrile episodes
Emerging Infectious Diseases, 2009; 15(12):2063-064

Tests

Blood samples were tested for OROV

immunoglobulin (Ig) M antibodies by ELISA

: Resultados

Muestras Seroprevalenci
Muestras
positivas a
631 128 20.3%

Symptom or sign N %
Fever 128 100%
Headache 93 72.7%
Myalgia 90 70.3%
Arthralgia 74 57.8%
Rash 54 42.2%
Rev Soc Bras Med Trop, 2013;46(6):684-690.

Primates
13 Sapajus spp. and 3
(n=1) Alouatta caraya

Serological tests
(n=2)
hemagglutination inhibition test (HI)

: Resultados
Muestras Seroprevalenci
Muestras
positivas a
13 1 7.69%

(n=1)

(n=4)
(n=8)
Rev. Peru. Epidemiol. 2013; 17 (3):1-6.

ELISA de captura de IgM e IgG para dengue

Anlisis de
ELISA de captura IgM Oropuche
laboratorio
RT-PCR

: Resultados
Muestras Seroprevalenci
Muestras
positivas a
26 17 65.3%
EPIDEMIOLOGIA MOLECULAR
 TRANSMISIN

T RE NO
V ES BA
SIL Coquilletidia venezuelenzis UR
L O I CLO Culicoides paraensis
CIC Aedes serratus C Culex quinquefasciatus ?
Culicoides paraensis ?

Bradypus tridactiyus Periodo de incubacin de

Saguinus spp, Saimiri spp, y OROV: De 4 a 8 das en
Primates Alouatta belzebul, Callithrix humanos, y de 5 o ms
spp. das en Culicoides
Roedores Seroprevalencia baja
Transmision en laboratorio
Aves Familia xxxx Aedes albopictus
Culex Quinquefasciatus
Infeccin accidental

International Society of Blood Transfusion, 2012

Textbook of pediatric infectious diseases, 2004
Science, 215:1251-1253
 Culicoides paraensis
(Diptera: Ceratopogonidae)

Larval hbitat:

Flight range
Unknown, but probably less
than 1 km.
Culicoides suarezi
Am. J. Trop Med. Hyg., 30(1), 1981, pp. 149-160
Emerging Infectious Diseases, 2005; 11(10): 1610-1613

Oropouche Virus Isolation, Southeast Brazil

Mrcio Roberto Teixeira Nunes,* Lvia Carcio Martins,* Sueli Guerreiro Rodrigues,* Jannifer
Oliveira Chiang,* Raimunda do Socorro da Silva Azevedo,* Amelia P.A. Travassos da Rosa, and
Pedro Fernando da Costa Vasconcelos*

The Study

Suspensions of viscera injected suckling mice by

(liver, spleen, and kidney) the intracerebral route

The virus was identified by using

the complement fixation test

RT-PCR

Results
An Oropouche virus strain was isolated
from a novel host (Callithrix sp.)
 Natural Host Range
Vertebrate (species and No. Isolations No. with antibody Country and region
organ) and arthropod /No. tested /No. Tested. Test used
Man 1/2.800 3/69 NT Trinidad
Man 98/507 NT Belem, Brazil (3)
Man 127 Para, Brazil (3,4)
Cebus (Monkey) 0/26 8/26 NT Trinidad
Alouatta (monkey) 0/79 9/26 NT
Callithix (Monkey) Brazil

Bradypus tridactylus 1/45 Brasilia Highway, Brazil (4)

Manzonia venezuelensis 1 Bush Bush Forest, Trinidad
Aedes serratus 1 Brasilia Highway, Brazil (4)
Culex quinquefasciatus 3 Para, Brazil (4)
Culicoides Paraensis 2 Brazil (10)
Birds, Domestic 12/206 HI
Birds, wild 34/681 HI
Rodents 1/80 HI

HI: Hemaglutination inhibition, NT: Neutralization tet, * Suspected (Antibody only detected)
 Susceptibility to Experimental Infection (include viremia)
Experimental host Passage history Inoculation Evidence of infection AST Titer
and age and strain Route-Dose (days) log 10/ml
(ml)

Mice (neonato) SMB 11 ic 0.02 Illness,death 2-6 7.0

Mice (neonato) ip 0.03 Illness,death 2-7 5.0
Mice (neonato) sc
Mice (neonato) ic 0.03 Illness,death 2-6 6.0
Mice (neonato) ip 0.2 No Illness
Chick emb (7 day) ys 0.5 Death 3-5 7.0
Chick emb (10 day) SBM 9 am.s. 0.1 No death; virus persists for
several days
Cebus albifrons, ip 1.000 LD 50 viremia
Sanguinus sp

Guinea pigs (ad) SBM 7 ic 0.05 Paralysis (virus in brain)

Guinea pigs (ad) ip 0.05 No illness
Hamsters (ad) ic 0.05 Death (virus in brain) 3-4 4.6
Hamsters ip 0.5 Death 3-4
Distribucin de los vectores
 RESPUESTA INMUNE EN MODELOS ANIMALES

PRRs Reconocimiento de PAMPs

RECEPTORES DE MEMBRANA RECEPTORES CITOPLASMATICOS

TLR (TLR3 y TLR7) Receptores tipo RIG-I
(RIG-I y MDA5)
Inducen la localizacin nuclear de los factores de transcripcin IRF 3, IRF 7
y NF-kB para inducir la expresin de centenares de genes estimulantes de
IFN (ISGs)

La produccin de IFN I bloquea entrada, replicacin traduccin y

ensamblaje viral
Modula la inflamacin y la inmunidad adaptativa
Se cree que la produccin de IFN tipo I protege contra otros
orthobunyavirus
 DIAGNOSTICO

AISLAMIENTO VIRAL TCNICAS SEROLOGICAS TCNICAS MOLECULARES

Inoculacin Prueba de fijacin RT-PCR

ratones/hamsters de complemento
Cultivos celulares Pruebas de
neutralizacin
Inhibicin de la
hemaglutincion
ELISA de captura
IgM e IgG

Textbook of pediatric infectious diseases, 2004

International Society of Blood Transfusion, 2012 Biomdica 2012; 32: 286-302
 DIAGNOSTICO DIFERENCIAL

Enfermedades febriles con/sin rash cutneo

Tiende a confundirse con otras enfermedades

febriles agudas causadas por Dengue, chikungunya,
Mayaro y otras arbovirosis
Los cuadros clnicos que se acompaan de
exantemas deben diferenciarse de otros cuadros
febriles exantmicos causados por rubeola,
enterovirus o alergias a medicamentos
 virus Geographical Presenting symptoms Rash Timing
Distribution to rash

Bunyaviridae
Oropouche South and Central Fever, arthralgia, myalgia, On rare occasions an itching rash may 1
(OROV) America headache. appear (-5% of cases) but this has
been interpreted as an alIergic
reaction to drugs used for treatment

Togaviridae
Chikungunya Africa, India, South-east Fever, arthralgia, artritis, Erythematous macules and papules on 3-5 days 1
(CHIK) Asia, South America myalgia, headache, the trunk and extremities with islands
encephalitis, Hemorrhagic of sparing. Petechiae. Face spared.
manifestations, vomiting, Burning sensation in pinna.
diarrhea

Mayaro South and Central Fever, headache, myalgia, Erythematous macules and papules 35 days 1, 2,
(MAYV) America arthralgia, artritis with some areas of confluence. 3
Extremities and trunk hand
involvement. Relative sparing of face.
Rash more common in children (89%)
than adults (53%).

Flaviviridae
Dengue Asia, America, the Fever, headache, retro-orbital Exanthem of dengue fever is 3-5 days 1
(DEN) Caribbean and Pacific pain, fatigue, severe myalgias, estimated to occur in 50% to 82% of
Types 14 Islands, China, Taiwan, arthralgias, Hemorrhagic patients with dengue fever.. skin
Indonesia, Australia manifestations erythema is common, mainly on the
face and chest, often with white
dermatographism.

J Am Acad Dermatol. 2008 February ; 58(2): 308316

 TRATAMIENTO

Actualmente no se encuentran vacunas disponibles para el tratamiento

antiviral (Anes et al., 2012)

Tratamiento de los sntomas

Reposo, incluso despus de desaparecer los sntomas

Ingesta de jugos de fruta o soluciones de glucosa

Tratamientos intravenosos en casos de deshidratacin

Textbook of pediatric infectious diseases , 2004

 PREVENCIN Y CONTROL

La forma mas efectiva de prevenir, aislar y frenar el impacto de epidemias de fiebre

Oropuche es combatir su vector, tanto en las formas adultas, como larvales.

Educacin en las comunidades afectadas y las que estn en riesgo, principalmente.

Aislamiento de las personas afectadas

Utilizacin de repelentes

Textbook of pediatric infectious diseases , 2004

GRACIAS