Anda di halaman 1dari 76

ANTIBODI

(FUNGSI, STRUKTUR, GENETIK)


Disulfide bond

Carbohydrate

CL
VL

CH2 CH3
CH1
Hinge Region
VH

Dr. Tetty Aman Nasution M.Med.Sc


Bagian Mikrobiologi FK-USU
Medan
The Non-specific &The
Specific Defense System

Battle against:
bacteria
viruses
fungi
parasitic worms
etc.
cancerous cells
toxins
whats a body do?
First line defenses: anatomical barriers,
secretions skin, saliva, tears
(lysozyme), mucus, stomach acid, fever
Second line defenses: inflammation

A nonspecific response triggered by


histamine (secreted by basophils)
Lines of Defense:
Body Surfaces
Intact skin
keratin layers, acidity (pH 3-5), antibacterial
sebum
Mucous membranes
acidic vaginal secretions, stomach (HCl &
proteases), saliva and tears (lysozyme),
mucous (trapping of pathogens,transport via
cilia)
Sequential Lines of Defense:
Cellular & Chemical Defenses
If surface barriers are breached:
Phagocytes (phagocytotic cells)
macrophages (develop from WBC [monocytes])
neutrophiles
eosinophiles
potential long term damage by DNA damage
through radicals! cancer
Sequential Lines of Defense:
Cellular & Chemical Defenses
Natural Killer Cells
large granular lymphocytes, attack abnormal
(cancerous), and virus-infected cells
non-specific attack, via non-self recognition of
cell surface carbohydrates
destroy cells via cytotoxic compounds,
induction
release of inflammatory compounds
Inflammation
Cell & tissue damage release of
inflammatory chemicals:
histamine, kinins, prostaglandins,
complement, and lymphokines
all cause local vasodilation
hyperemia - redness, heat
all increase vascular permeability
exudate formation - swelling, pain
pain enhanced by prostaglandins, kinins
Specific Immune Response
Absolutely antigen specific
Systemic (not restricted to any
tissue/organ)
Long lasting (permanent) memory
humoral immune response: antibodies
circulating in all body fluids (humors)
cellular immune response: orchestrated
activity of immune cells attacking antigen
both co-operate with each other
Cells of the Immune System
Overall Classification
Lymphocytes: carry specific antibodies on
cell surface
T-cells: Generated in bone marrow,
mature in thymus to immune competent
cells
negative selection destroys self-
reacting cells
B-cells: Generated and mature in bone
marrow
Antigen Presenting Cells: macrophages,
dendritic cells and activated B-cells
Humoral and cellular immunity
(antibody mediated or cellular)
Humoral Immunity
B cell response
If a circulating B cells receptors bind to
foreign antigens, the B cell becomes activated
Activated B cells divide into Memory B cells
and Plasma B cells
Plasma B cells rapidly produce and secrete
antibodies (immunoglobulins)
Clonal selection amplifies the production of
cells that produce effective antibodies
Clonal Selection

Figure from AccessExcellence.org


Produksi Antibodi
Akibat kontak dengan Antigen, Immunoglobulin
(Ig) dibentuk oleh sel plasma yang berasal dari
proliferasi sel B

Antibodi terbentuk secara spesifik ini akan


mengikat antigen baru lainnya yang sejenis
Humoral Immune Response
B cell response
Antigen exposure triggers selection of
matching antibody on B-cells
B-cell becomes activated
proliferation, differentiation
plasma cells - secreting antibodies (2,000
molecules/second for 4-5 days)
memory cells - long lived, ready for
repeated encounter with antigen (immunity)
Cell-Mediated Immune Response
T cell response
T-Cells
T4 or TH cells, CD4 surface protein, helper
T cells
Tc or CD8 cells, cytotoxic T-cells, killer cells
TDH cells, delayed hypersensitivity
Ts or suppressor T-cells
Memory T-cells
Can only recognize processed antigens,
presented on the surface of body cells
intracellular pathogen, cancer cells
The big pictureIntegration of innate and adaptive immunity
Antibodi

Protein yang mengandung bahan larut


tanpa sel, disebut globulin
Immunoglobulin (Ig)
Pemisahan secara elektroforesis, Ig
terbanyak gamma, juga ada alfa dan
beta
2 ciri yang penting adalah spesifisitas
dan aktivitas biologik
Spesifisitas dan Aktivitas Biologik
Spesifisitas (Specificity)
Struktur antibodi memiliki hypervariable region atau
complementary-determining region (CDR)
Berikatan secara khusus & terbatas pada struktur antigen tertentu

Aktivitas Biologik (Biological Activity)


Neutralization of toxins and viral activity
Immobilization of microorganisms
Agglutination (clumping) of microorganisms or particles
Binding with soluble Ag leading to precipitation (phagocytosis)
Activating complement system facilitate lysis, phagocytosis or
direct killing
Some classes of Ab cross the placenta to help fetus
The Immune Response - Overview
Antibody Structure

Molekul Imunoglobulin dibentuk dari 4 rantai


polipeptida, 2 rantai berat (heavy chain) dan
2 rantai ringan (light chain) yang identik,
dihubungkan satu sama lain oleh ikatan
disulfida (disulfid bond)
ANTIBODY STRUCTURE
Struktur Antibodi
Light chain dan heavy chain mempunyai variable region
dan constant region (disusun oleh amino acid
sequence)

110 amino acid variable region terletak pada amino-


terminal end dan membentuk antigen binding site
Pada variable regions terdapat 3 hypervariable region
(yg masing2 memiliki 5 10 asam amino)
Antibody Structure

CH
VH
CL
VL
Struktur Light & Heavy Chain
Analisa struktur
Pemecahan oleh enzim Papain (Porter,1959)
Enzim Papain memecah pd hinge region
3 fragments (MW = 150,000 Da), 45,000 Da/each
Fab fragments (Fragmen antigen binding)
Tetap memiliki sifat Antibodi, mengikat Ag
Bereaksi dengan determinan Antigen dan hapten
Univalent
2 fragmen yang identik
Fc fragment (fragment crystallizable)
Dapat dikristalkan dari larutan
Tidak dapat mengikat Ag
Menunjukkan fungsi biologis sesudah Ag diikat oleh Fab
Struktur Light & Heavy Chain
Pemecahan oleh enzim Pepsin
Memecah pada asam amino sebelum ikatan disulfid
Divalent fragment disebut sebagai F(ab)2
Terbentuk beberapa Fc subfragments

INTRA-chain disulfide bond membentuk


immunoglobulin-fold domains (loops in the chains)
Loops ini membentuk antiparallel b-pleated sheets yg
merupakan karakteristik molekul Ab dan member dari
immunoglobulin superfamily
Struktur Heavy & Light Chain
2 jenis rantai ringan (Light chain) tdd 230 aa
K and l chains (kappa dan lambda)

Setiap orang akan memproduksi kedua type L chain

Rasio K dan l chains bervariasi antar species


(mouse: 95% K; human: 60% K)

Pada tiap orang, L chains Ig molecule selalu

kedua2nya K atau l, ttp TIDAK PERNAH salah satu


Struktur Light & Heavy Chain
5 klas yang berbeda (isotypes) of Heavy chain
Berbeda secara serologis, dalam jumlah CHO dan
dari ukuran
Berhubungan dengan perbedaan fungsi biologik

Ig Class (isotype) H Chain


IgM m
IgD d
IgG g
IgA a
IgE e
Constant and Variable Regions
Mechanism of Antibody Function
Antibodies bind to
antigens & aggregate
pathogens removal by
macrophages

Antibodies disrupt
function of pathogens
surface proteins

Antibody-antigen
complexes trigger the
Complement system,
that lyse invaders
Figure from AccessExcellence.org
Antigen Presentation
Antigen yg masuk melalui usus akan
dihancurkan oleh gut-associated lymphoid
tissues.
Antigen yg masuk melalui kulit atau
respiratory tract akan dihancurkan secara
local atau ditransport ke local lymph nodes.
Antigen yg memasuki darah akan disaring di
dalam spleen.
Immune Response-
Step by Step
1. Pathogen (carrying foreign antigens) enters
and survives the inflammatory response
2. Some pathogens remain exposed in tissues
where their antigens may be recognized
by circulating B cells
OR
3. Macrophages engulf pathogens and display
their antigens on MHC (major
histocompatibility complex) receptors.
Macrophage has now become an Antigen
Presenting Cell (APC)
Antigenic Determinants
(Epitopes)
Tempat spesifik dari antigen yang berikatan
dengan antibodi disebut antigenic
determinant atau epitope.
Kebanyakan antigen memiliki berbagai jenis
epitope yang merangsang antibodi yang
berbeda disebut sebagai polyclonal.
Immune respons tunggal terhadap suatu
antigen disebut sebagai monoclonal.
Monoclonal Antibodies
Laboratory produced antibodies

Fusion of B-cells (synthesize antibody) & tumor


cell (immortal) myeloma hybridoma cell

Unlimited production of antibodies

Use in Research: specifically label proteins for


cellular localization (immunofluorescence
microscopy), purification, etc.
Monoclonal Antibodies
Medical diagnostic: Pregnancy test, detection of
tumor markers (surveillance after removal of
tumor), diagnosis of infectious agents, STD,
AIDS, etc.

Drug Treatment: Attachment of drugs to


antibodies, target drugs to specific cells

Clinical Laboratories: Measurement of blood


hormone levels, etc.
Antigenic Determinants -
Epitopes
Small areas on the surface of antigens
e.g. on proteins 10 -14 amino acids long
Segment that contacts antibody and
provokes immune response
Large proteins - hundreds of overlapping
epitopes on their surface
provoke productions of hundreds of different
antibodies against specific antigen
Antibody Domains
Kedua rantai tersusun dari 110 amino acid
yang tersusun berupa segmen berulang
Segmen berulang fold independently utk
membentuk functional domains
Setiap domains bersambungan satu sama
lain oleh 1 intrachain disulfide bond
Tiap domains berkembang dari gene
duplications
Ig Structure
Domains
Intrachain disulfide bonds yg membentuk loops di
dalam chain
Berupa compact structure dan cleavage terbatas oleh
enzymes
Intrachain -SS- bonds memiliki regular intervals
masing-masing terdiri dari 100-110 aa
Membentuk compact globular domain
L chains
Masing-masing 2 domains
H chains
4-5 domains dipisahkan unfolded stretch yang pendek
Three-Dimensional Structure
Each domain folds into a very similar three-
dimensional structure
In the variable domain there are three
hypervariable loops that form the antigen
binding site
Changing the length and amino acid sequence
of the hypervariable loops does not disturb the
three-dimensional structure
IgG molecule

Used with permission from: Dr. Mike Clark, Immunology Division,


Department of Pathology Cambridge University, Cambridge, England
Immunological Memory
Primary immune response adalah paparan 1x
dari antigen terhadap immune system.

Secondary immune response terjadi pada saat


paparan berikut terhadap antigen yang sama.

Secondary response disebabkan oleh adanya


memory cells yg terbentuk pada paparan yang
pertama.
Dasar genetik dari Antibodi heterogeneity
Isotypic variation
Dimiliki oleh semua individu yang sehat
5 subklas dari Ig terdapat dlm gen manusia
Allotypic variation
Perbedaan genetik antara individu
Tdk semua individu sehat memiliki allotype yang khusus
Perbedaan allotypic dr locus yg diketahui biasanya melibatkan
perubahan pada 1 atau 2 aa di constant region dari heavy chain
Idiotypic variantion
Variasi pd variable domain, khususnya pd hypervariable region
Biasanya spesifik pada individual klon antibody
Dasar genetik dari idiotypic variability belum sepenuhnya diketahui
Classes of Antibodies
Lima kelas antibodi (IgA, IgD, IgE, IgG, and
IgM) dapat dibedakan dari komposisi Heavy
chain

Perbedaan dari Heavy chains (tail regions)


menyebabkan perbedaan functional properties
dari masing2 kelas antibodi
IgG
Structure
Monomer (7S)

IgG1, IgG2 and IgG4 IgG3


Immunoglobulin Isotypes
Biological Properties of IgG
Komponen utama Ig serum, MW : 160.000 Da
75% dr serum Ig dan 15% dari total protein dlm serum
Tersebar merata antara ruang intra & extra-vascular
4 subclasses : IgG1, IgG2, IgG3, IgG4
IgG1, IgG2 and IgG 4 half life lbh kurang 23 hari
terpanjang dari semua Ig isotypes (IgG3 sekitar 7 hr)
Paling sesuai utk immunisasi pasif
Biological Properties of IgG (continued)
Agglutinasi dan pembentukan presipitat
Opsonisasi sel2 fagosit, monosit & makrofag memp. reseptor utk Fc
dari IgG shg mempererat hubungan fagosit & sel sasaran
Ab-dependent, Cell-Mediated Cytotoxicity (ADCC)
Fab portion berikatan dgn target cell dan Fc portion berikatan dgn
Fc receptors pd NK cells utk menuju killer cells di target
Aktivasi Complement
Netralisasi Toxin (dgn cara menghambat active sites)
Immobilisasi Bacteria
Netralisasi Virus (menghambat attachment, penetrasi & viral coat
shedding)
Biological Properties of IgG (continued)
Dapat menembus placenta and diabsorbsi oleh neonates

Penembusan plasenta diperantarai oleh Fc

Penyerapan IgG ibu dlm colostrum diperoleh akibat berikatan IgG dgn
Fc receptors dlm jaringan intestinal
Kehamilan 3-4 bln, tjd peningkatan yg cepat dari IgG ibu

Setelah umur 5 bln, fetus mulai menghasilkan IgM & IgA dlm jumlah yang kecil

3-4 bln setelah kelahiran, level IgG ibu mulai menurun infant mulai
menghasilkan Ig G sendiri

Berkaitan dengan terjadinya erythroblastosis fetalis (Rh incompatibility)


IgM
Structure
Pentamer (19S)
Extra domain (CH4)
J chain (joining chain) J Chain

CH4
Properties of IgM
Ig pertama yang terbentuk setelah immunisasi
Macroglobulin (M), dengan MW = 900,000 Da
Memiliki extra CH domain
Pentamer molecule (tdd 5 rantai polipeptida)
Memiliki ikatan disulfid tambahan antara Fc portions dengan rantai
polipeptida J chain
Valence of 5 (5 Ag combining sites)
Ditemukan lebih banyak pada ruang intravascular
Half life dalam 5 hari
Ditemukan pd permukaan B cells yg matang bersama dg IgD berfungsi sbg Ag
specific B cell receptor (BCR) setelah aktivasi B cells terjadi pergantian klas utk
membentuk isotypes lainnya.
Biological Properties of IgM (continued)
Tidak menembus placenta
Ig yang hanya disintesis oleh fetus (5 months
gestation)
Peningkatan level IgM pd fetus menunjukkan
congenital atau perinatal infeksi
Isotype pertama yang disintesis setelah imunisasi
terhadap T-dependent Ags
Kadar IgM yang meninggi biasanya menunjukkan
infeksi yang baru terjadi atau paparan thd Ag
Biological Properties of IgM (continued)

IgM molecules sangat efisien pd agglutination


Natural antibodi, isohemagglutinins terhadap RBC
Ags of the ABO blood groups
Aktivasi dari complement
Bentuk pertahanan pertama yang paling penting
thd bacterial infections
Tidak sensitif thd neutralization toxins dan viruses
IgA
Structure
Serum - monomer
Secretions (sIgA)
Dimer (11S)
J chain
Secretory component

Secretory Piece J Chain


Biological Properties of IgA
Jumlah sedikit dlm serum, tp lbh tinggi dlm btk IgA sekretori (sIgA) dlm
cairan sekresi sal. Napas, sal. Cerna, sal. Kemih, air mata, keringat, ludah,
dan air susu
MW = 165.000 Da
Ig terbanyak pada permukaan mukosa
IgA dibentuk sel plasma dlm sel epitel lamina propria sel. Lendir (bukan sel
B), ke lumen sal. Cerna, jg melepas secretory piece utk membtk sIgA yg
terlindung dr pencernaan enzim
Penting pada imunitas neonatus
Kadar IgA yg tinggi dlm serum, pd infeksi kronik sal. Napas dan cerna spt
TB, sirosis alkoholik, peny. Coeliac, kolitis ulseratif dan peny. Crone
IgA dlm serum agglutinasi, memudahkan fagositosis, opsonisasi
Mengaktifkan komplemen melalui jalur alternatif
Origin of Secretory Component of
sIgA
Structure IgD
Monomer
Tail piece

Tail Piece
Biological Properties of IgD

Kadar sangat rendah dalam sirkulasi


Peka terhadap degradasi oleh proses
proteolitik
Komponen permukaan utama dari sel B dan
petanda diferensiasi sel B yang matang
Tidak mengikat komplemen
IgD ditemukan bersama IgM pd permukaan
sel B sebagai reseptor antigen
Structure IgE
Monomer
Extra domain (CH4)

CH4
IgE
Biological Properties of IgE
Ig dengan jumlah paling sedikit dalam serum
Berikatan dgn basophils and mast cells (tidak
memerlukan ikatan Ag)

Berperan pada Allergic reactions

Berperan pada Parasitic infections (Helminths)


Berikatan dengan Fc receptor pd eosinophils

Tidak berikatan dg complement


Allergic Reactions
Berikatan dan cross-linking dr antigen kpd
IgE molecules terikat kpd mast cells atau
basophils memicu sekresi amines
(khususnya histamine) melalui exocytosis.
Menyebabkan dilatasi dan peningkatan
permeabilitas pembuluh darah
Pd keadaan normal, membantu lymphocytes
dan antibodies msk ke tempat peradangan
AN ALLERGIC REACTION
EARLY
VASOACT IVE MEDIATORS
OR
MAST IL-5 ACUTE
CELL
IL-4

IgE EOS
ALLERGEN B CELL

IL-4
IL-5

Th2 MAST LATE


CELL

DENDRITIC CELL
ANTIBODY FUNCTIONS
The Specific Defense System
Very complex system of cells and
chemicals
Interacting and collaborating with the non-
specific defenses
Activity carefully controlled
malfunctioning of system: allergies,
autoimmune diseases
Immunological memory immunity
Immunity
Immune system primed to eliminate antigen after a
previous exposure (active immunity)
passive immunity: antibodies administered to
individual (medical treatment or mother-fetus across
placenta)
tetanus, snake venoms, hepatitis, botulism, rabies,
etc.
Vaccination: artificially acquired immunity
weakened pathogen, recombinant DNA produced
vaccines (artificial pathogen proteins)
irradicated small pox, polio, whooping cough, etc.
ANTIBODY FUNCTIONS

Anda mungkin juga menyukai