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QU ES?

Es una enfermedad infecciosa


causada por bacterias patgenas
llamadas leptospiras que son
transmitidas, directa o
indirectamente, desde los animales
a los seres humanos siendo, por
tanto, una zoonosis. La transmisin
entre humanos ocurre muy
raramente.
DONDE OCURRE?
Ocurre en todo el mundo,
pero es ms comn en las
reas tropicales y
subtropicales con altos
ndices de precipitacin. La
enfermedad se encuentra en
cualquier lugar en donde los
humanos entran en contacto
con la orina de animales
infectados o un ambiente
contaminado con orina.
QU SON LAS LEPTOSPIRAS?
Son bacterias que pueden ser patgenas (es decir que
tienen el potencial de causar enfermedad en animales y
humanos) o saprofitas (de vida libre y que generalmente
no causan enfermedad).
En la naturaleza, las leptospiras patgenas son
mantenidas en los tbulos renales de ciertos animales.
Las leptospiras saprofitas se encuentran en diversos tipos
de ambientes lquidos o hmedos, que comprenden
desde aguas superficiales y suelos hmedos hasta agua
del grifo. Leptospiras saprofitas haloflicas (resistentes a
la sal) son encontradas en agua de mar.
RESPUESTA INMUNOLGICA

El periodo de incubacin es usualmente de 7 10 das, en un lapso de 2 30


das.
Los humanos reaccionan a una infeccin con leptospira produciendo
anticuerpos especficos anti-leptospira.
La seroconversin puede ocurrir tan pronto como 3 7 das despus del inicio
de la infeccin pero algunas veces puede ocurrir despus de 10 das o ms.
Los anticuerpos IgM usualmente aparecen poco antes que los anticuerpos IgG,
y generalmente permanecen detectables por meses o an aos, pero a un
nivel bajo de ttulo.
Los anticuerpos IgG pueden ser completamente indetectables, o ser
detectables por periodos cortos de tiempo. (4) IMP.
POR QU ES NECESARIO EL APOYO DE UN
LABORATORIO PARA LEPTOSPIROSIS?

El apoyo del laboratorio es necesario para:

Confirmar el diagnstico; la leptospirosis es difcil de diferenciar desde el


punto de vista clnico de un gran nmero de enfermedades. Los mtodos de
laboratorio ayudan a confirmar la leptospirosis en donde se sospecha la
enfermedad en base a los aspectos clnicos.
Razones epidemiolgicas y de salud pblica; tales como determinar el serovar
que est causando la infeccin, a probable fuente de infeccin, el reservorio
potencial y su ubicacin, todo lo que contribuye a definir las estrategias de
control.
QU MTODOS ESTN DISPONIBLES PARA EL
DIAGNSTICO DE LA LEPTOSPIROSIS EN EL
LABORATORIO?
La enfermedad es usualmente diagnosticada
en el laboratorio mediante la deteccin de
anticuerpos, el cultivo de la bacteria a partir
muestras de sangre, orina o tejidos, o por la
demostracin de la presencia de leptospiras
en los tejidos usando anticuerpos
conjugados con marcadores de
fluorescencia. Algunos centros disponen de
otros mtodos como la reaccin en cadena
de la polimerasa (PCR) y la inmunotincin.
Esto depende de la fase de infeccin; las
leptospiras usualmente circulan en la sangre del
paciente por aproximadamente 10 das despus
QU de la aparicin de la enfermedad. Tambin
MUESTRAS aparecen en otro fluidos corporales, tales como
CLNICAS orina y lquido cefalorraqudeo, unos pocos das
DEBEN SER despus de la aparicin de la enfermedad y
COLECTADAS penetran a rganos internos durante este tiempo.
PARA
EXAMEN?
Las muestras apropiadas y que ms comnmente se colectan en
consecuencia, son:
Las muestras apropiadas y que ms comnmente se 2. Sangre coagulada o suero para serologa.
colectan en consecuencia, son: Deben obtenerse preferiblemente dos
muestras con un intervalo de varios das en
1. Sangre con heparina (para prevenir coagulacin)
para cultivo en los primeros 10 das, pero no es
base a la fecha de aparicin o inicio de la
recomendado, ya que las leptospiras han desaparecido enfermedad y el tiempo probable de
en su mayora de la sangre y los anticuerpos habrn seroconversin. El anlisis de muestras
comenzado a ser detectables en el suero permitiendo el pareadas es necesario para detectar un
serodiagnstico. incremento en los ttulos entre ambas
muestras o la seroconversin, y por tanto para
Muestras para cultivo deben ser guardadas y confirmar el diagnstico de la leptospirosis.
transportadas a temperatura ambiente, debido a que las
bajas temperaturas son perjudiciales para las leptospiras 4. Las muestras postmortem deben ser
patgenas. obtenidos aspticamente y tan pronto como sea
posible despus de la muerte; deben ser
3. Orina para cultivo. Las leptospiras mueren inoculadas en el medio de cultivo lo ms rpido
rpidamente en la orina por lo que el uso de orina para que se pueda. Las muestras deben ser
cultivo puede ser valioso solamente cuando es posible guardadas y transportadas a + 4C, previniendo
obtener una muestra limpia que pueda ser inoculada la autolisis de las clulas a 4C y una
en un medio de cultivo apropiado en no ms de 2 horas consecuente disminucin del pH, lo que
despus de haber sido recogida. compensar la reduccin en la viabilidad de las
5. Lquido cefalorraqudeo y dializado para cultivo. leptospiras patgenas a bajas temperaturas.
CUL ES EL MTODO DE LABORATORIO MS
FRECUENTEMENTE USADO PARA EL DIAGNSTICO
DE LA LEPTOSPIROSIS?
Los mtodos actuales para la deteccin
directa de leptospiras son lentos o de
limitada confiabilidad por lo que la
serologa es, la mayora de las veces,
el mtodo de diagnstico ms
apropiado. Adems, en la prctica, los
pacientes muy frecuentemente buscan
la ayuda mdica o son admitidos en los
hospitales cuando ya han estado
enfermos por un perodo de tiempo lo
suficientemente largo para producir
anticuerpos detectables.
LA SEROLOGA POSITIVA ES UNA EVIDENCIA DE UNA
INFECCIN ACTUAL?
No siempre; la deteccin de anticuerpos no es, en
s misma, prueba de una infeccin actual debido a
que algunos anticuerpos pueden persistir por
largos perodos de tiempo despus de una
infeccin.

Los datos de la serologa son importantes en el


proceso diagnstico pero deben ser siempre
considerados en conjunto con la presentacin
clnica y los datos epidemiolgicos (una historia
de posible exposicin, presencia de factores de
riesgo). El aislamiento de leptospiras patgenas
es la nica prueba directa y definitiva de
infeccin.
QU MTODOS SON USADOS PARA EL
SERODIAGNSTICO?

La prueba de aglutinacin microscpica


(MAT) es considerada la prueba de oro
o la piedra angular del serodiagnstico
por su insuperable especificidad
diagnstica (serovar/serogrupo) en
comparacin con las otras pruebas
disponibles actualmente.

Una variedad de otros mtodos


serolgicos, incluyendo la ELISA han sido
desarrollados, muchos de los cuales
constituyen pruebas de tamizaje de
leptospirosis relativamente simples.
QU ES LA PRUEBA DE AGLUTINACIN MICROSCPICA
(MAT POR SUS SIGLAS
EN INGLS)?
La MAT es una prueba que determina los
anticuerpos aglutinantes en el suero de
un paciente mediante la mezcla de varias SANGRE
diluciones de ste con leptospiras vivas o
muertas (formolizadas). Los anticuerpos
antileptospiras presentes en el suero
hacen que las leptospiras se peguen
unas a otras formado grumos. Este
proceso de agrupamiento es llamado
aglutinacin y es observado usando
microscopa de campo oscuro. Los ORINA
anticuerpos aglutinantes pueden ser de
las clases IgM e IgG.
CULES SON LAS VENTAJAS Y DESVENTAJAS DE
LA MAT?

DESVENTAJAS
La necesidad de facilidades para el cultivo y
VENTAJA mantenimiento de paneles de leptospiras vivas.
Adems, la prueba es tcnicamente exigente y
consume mucho tiempo, especialmente cuando
el panel es grande.
La mayor ventaja de la MAT es su
alta especificidad.
Los anticuerpos no pueden ser detectados
cuando la cepa causante no est representada
en el panel o solamente un ttulo bajo es
encontrado con un serovar que antignicamente
se parece al serovar ausente, causante de la
enfermedad.
LA SEROLOGA REVELA EL SEROVAR CAUSANTE DE LA
ENFERMEDAD EN UN
PACIENTE INDIVIDUAL?

Los pacientes generalmente producen anticuerpos aglutinantes contra el


serovar infectante. En pacientes con infeccin en curso o reciente, la reaccin
cruzada en la MAT puede hacer imposible la identificacin del serovar infectante
o de su serogrupo con algn grado de certeza. Puede ser til obtener una
muestra de suero (p.ej. 1 mes) algn tiempo despus de la aparicin de la
enfermedad con la esperanza de que, para ese tiempo, los anticuerpos
residuales sean lo suficientemente especficos como para dar una indicacin del
serogrupo o, ms raramente, del serovar.
La ELISA usualmente solo detecta anticuerpos reactivos con un antgeno
gnero especfico ampliamente reactivo y por tanto, no da indicacin del serovar
serogrupo ausante de la enfermedad
QU OTROS MTODOS SERODIAGNSTICOS, ADEMS
DE LA MAT, SON USADOS CON MAYOR FRECUENCIA?

Las pruebas de ELISA son populares y varios ensayos estn disponibles; estas
pruebas pueden realizarse con kits comerciales o con antgenos producidos en
la casa. Un antgeno ampliamente reactivo llamado gnero especfico es
generalmente usado para detectar IgM y algunas veces tambin anticuerpos IgG.
La presencia de anticuerpos IgM pueden indicar una leptospirosis actual o
reciente, pero debe recordarse que los anticuerpos IgM pueden permanecer
detectables por varios aos. El punto de corte (ttulo positivo) se determina
mejor sobre la base de las mismas consideraciones presentadas para la MAT.
Pruebas gnero especficas tienden a ser positivas ms temprano en la
enfermedad que la MAT.
CULES SON LAS VENTAJAS Y DESVENTAJAS DEL ELISA EN
COMPARACIN CON LA MAT?
VENTAJAS DESVENTAJAS
- La prueba de ELISA puede detectar anticuerpos clase Algunas pruebas de ELISA son menos
IgM en la fase temprana de la enfermedad por lo que especficas que la MAT y reacciones cruzadas
puede indicar si se trata de una infeccin actual o dbiles, debido a la presencia de otras
reciente. Cuando no se detectan anticuerpos o se enfermedades, pueden ser observadas. Los
encuentra un ttulo bajo, una segunda muestra de resultados de la ELISA deben ser, por lo tanto,
suero debe ser examinada para observar confirmados por MAT. Esto puede requerir
seroconversin o un aumento en el ttulo. probar una muestra adicional si la inicial fue
- Solo utiliza un antgeno, llamado antgeno gnero obtenida en una fase temprana en la infeccin
especfico, el cul es compartido por leptospiras cuando la prueba de ELISA puede ser positiva,
patgenas y saprofitas. pero la MAT es negativa.
- Al contrario de la MAT, la ELISA puede ser
estandarizada. Como se basa en un antgeno gnero
- No requiere del cultivo de leptospiras en el laboratorio especfico, la prueba de ELISA no da
local, para proveer de antgeno desde que un kit indicacin del serovar infectante.
comercial est disponible.
CULES SON LOS MTODOS DIRECTOS
PARA DETECTAR LAS LEPTOSPIRAS?

Los mtodos directos incluyen cultivo, microscopa de campo


oscuro, inoculacin de animales de experimentacin,
coloracin (inmunolgica) y la reaccin en cadena de la
polimerasa.