ANTIBIOGRAMA

Lic. TM Manuel Quintanilla C.

manuelqc8@gmail.com
Nacimiento de la era de los antibiticos

Penicilina
1929
Estreptomicina 1943
Gramicidina y tirocidina 1943
Clortetraciclina 1944
Antimicrobianos
Son substancias qumicas que evitan el
crecimiento o destruyen a los
microorganismos invasores del cuerpo
humano o animal, produciendo ninguna
o muy baja toxicidad sobre stos.

Pueden ser naturales, sintticas o

semi-sintticas.
 Sustancia producida
de manera
sinttica que
Quimioteraputi posee propiedad de
co inhibir el
crecimiento o
destruir
microorganismos
Clasificaci Sustancia producida por
n el metabolismo de
organismos vivos,
principalmente hongos y
bacterias, que posee la
propiedad de inhibir el
Antibitico crecimiento o destruir
microorganismos.

Pueden modificarse
para generar los semi-
sinteticos.
 Efecto
Efecto
Bacteriostt
bactericida
ico

Inhibiendo su
Matar a las
Afectan

crecimiento y
clulas
multiplicacin.

Desencadenan
Las clulas en una mecanismos dentro
poblacin susceptible de la clula que
cesan su divisin. conducen a la
muerte celular.

Si se retira las
clulas vuelven a Sus acciones son
multiplicarse irreversibles
 DEFINICIN
Prueba in vitro que determina la sensibilidad de
un microorganismo frente a diferentes
antibiticos.

SENSIBLE RESISTENTE
 OBJETIVOS

ANTIBIOGRAMA

Elaborar
Establecer planes programas
teraputicos orientados
individuales al uso racional de
ABS
 MTODOS - ANTIBIOGRAMA

MTODOS

CUANTITATIVO CUALITATIVO

(Mtodo de (Mtodo de
dilucin) difusin en agar)
Pruebas de sensibilidad a los
antimicrobianos
En Con tiras de papel
surco

Realizada por
Fleming
En caldo
 La sensibilidad de
un ATB
est dada por:

CBM
CIM
(Concentracin
(Concentracin
Bactericida
Inhibitoria Mnima)
Mnima)
 CONCENTRACIN INHIBITORIA
MNIMA
Es la mnima
concentracin de un
antimicrobiano que
inhibe la
multiplicacin y
crecimiento visible de
una cepa bacteriana
en un medio de cultivo.
Clculo de la CMI

CMI = 2 mg/L
CONCENTRACIN BACTERICIDA
MNIMA
Para determinar la CBM se seleccionan tubos donde no
haya turbidez y se siembra el contenido en un medio
de cultivo slido y se observa si hay o no crecimiento.

LA CBM corresponde a aquella dilucin donde no

hay crecimiento bacteriano.
CIM Y CBM

AB AB AB AB AB CONTROL
SIN AB

S/C S/C S/C S/C C/C C/C C/C

S/C C/C C/C

S/C C/C
Clculo de la CMB

CMB = 1 mg/L
 MTODO DE DILUCION
Consiste en determinar el crecimiento de una bacteria
en presencia de concentraciones decrecientes de un
mismo antibitico.
Se observa el crecimiento de los microorganismos
mediante la aparicin de turbidez
 MTODO DE DIFUSIN
Es el mtodo ms empleado en el
laboratorio.

Se trabaja a partir de un microorganismo

debidamente aislado e identificado
(CULTIVO PURO)
MTODO DE DIFUSIN

PRINCIPIO DEL MTODO

SELECCIN DE LAS COLONIAS

Es el paso ms
importante.
Se selecciona de 3 a 5
colonias del
microorganismo.
 PREPARACIN DEL INCULO Y
ESTANDARIZACIN DE LA SUSPENSIN
PREPARACIN
DEL INCULO

Suspensin
Fase logartmica
directa
de crecimiento
de las colonias

En ambos mtodos, la turbidez de la suspensin debe

ser estandarizada al estndar 0,5 de McFarland (que
corresponde a aproximadamente 1,5 X 10 -8 UFC/ml).
SUSPENSIN DIRECTA DE LAS COLONIAS
Se trabaja con cultivos jvenes.

En esta tcnica se estandariza el inculo al mismo

tiempo que se prepara la suspensin.

3 A 5 COLONIAS SS CALDO COMN

AJUSTAR TURBIDEZ
0,5 ESCALA DE McFARLAND

ESTABILIZAR 15 MIN.
 FASE LOGARTMICA DE
CRECIMIENTO
Se usa para la mayora de microorganismos
de rpido crecimiento.

3 A 5 COLONIAS SS CALDO COMN

NCUBACIN A 35 0 C 2-6 HORAS

AJUSTAR TURBIDEZ
0,5 ESCALA DE McFARLAND
Estandarizacin del
medio de cultivo
Agar de Meller-
Hinton
Infusin de carne de vaca 300 g/L
Casaminocidos 17,5
Almidn g/L
Agar 1,5
g/L
Caractersticas: 17 g/L
Permite crecer a la mayora de los
patgenos
Transparente
No tiene PAB
pH
Espesor
 PREPARACIN PARA LA
INOCULACIN
Los discos deben permanecer a temperatura
ambiente durante 1-2 horas.
El agar de eleccin para esta prueba es el agar
Mueller-Hinton (MHA).
INOCULACIN DE LA
PLACA

1
2
Sembrar tres
veces rotando
la placa 120

3
Estandarizacin de los
Colocacin
discos manual desde
Discos de alto poder (10- el tubo
300 g de los antibiticos)
Control calidad
(FDA) Posicin
Colocacin manual o con un
dispensador No mover

Colocacin manual
con pinzas
estriles
Prueba de Bauer-Kirby
Con discos de
papel

Zona de inhibicin
Concentracin de algunos antimicrobianos
 APLICACIN DE LOS DISCOS DE
ANTIBITICOS
MTODO MANUAL
MTODO AUTOMTICO
APLICACIN DE LOS DISCOS DE
ANTIBITICOS

1
8

2 7

9
3 6

5
4
MEDICIN DE LAS ZONAS DE INHIBICIN

Expectativa Realidad
Resultados atpicos
Microorganismos invasores

Colonias aisladas dentro del halo

Limitaciones de la prueba
de Bauer-Kirby
Microorganismos de desarrollo lento

Microorganismos anaerobios

Antibiticos de difusin lenta

Los resultados se refieren a los niveles de

antibiticos que se pueden conseguir en suero

Los resultados no se extrapolan necesariamente a

todos los antibiticos de un mismo grupo
Pruebas de sensibilidad a antimicrobianos con
determinacin de la CMI

Tcnica de dilucin en caldo

Tcnica de dilucin en agar

Tcnica de microdilucin en caldo

Test de psilon (E-test)

 Test psilon
E-test (tiras patentadas, AB Biodisk)
Gradiente logartmico de concentracin
Zona de inhibicin elipsoidal (no
circular)
Valor de la CMI en la escala
Mtodo cmodo, pero caro, no para uso
rutinario

CMI
Test psilon

CMI = 2
mg/L

CMI = 0,64 mg/L