QUMICA ANALTICA

CUANTITATIVA

Ing. Jos Montecinos Lpez

 CAPTULO 7.
ESPECTROFOTOMETRA UV - VIS

Mtodo con uso de energa radiante en el

rango Ultra violeta (200- 400 nm) y Visible
(400 700 nm)
Cmo se puede medir la radiacin que
emiten o absorben los cuerpos?

Un aparato capaz de obtener el espectro de una radiacin, es

decir, de separar la radiacin en sus componentes, se llama
un espectroscopio.
Si el aparato es capaz de fotografiarla se llama un
espectrgrafo, y
Si es capaz de medirla diremos que se trata de un
espectrmetro.
Cuando es capaz de medir tambin la intensidad de la
radiacin, se llama espectrofotmetro.
Medicin de radiacin

Espectroscopio 1817

Espectgrafo
 MCI MCI
Para medir Luz Visible Para medir Luz Visible y U.V.

MCI
Para medir Luz Visible y U.V.

Diferentes tipos de espectrofotmetros

Espectro de absorcin
El espectro de absorcin muestra como absorbe la
muestra a diferentes longitudes de onda. Su forma
es caracterstica de la sustancia.
Su posicin dentro del rango de longitudes de onda
depende de la clase de sustancia
La forma y la posicin permiten la identificacin
cualitativa de la sustancia
La intensidad de la absorcin depende de la
concentracin de la muestra
Espectro de absorcin
Espectro de transmisin
El espectro de transmisin muestra como transmite
la muestra a diferentes longitudes de onda. Su
forma es caracterstica de la sustancia.
Su posicin dentro del rango de longitudes de onda
depende de la clase de sustancia
La forma y la posicin permiten la identificacin
cualitativa de la sustancia
La intensidad de la absorcin depende de la
concentracin de la muestra
Espectro de transmisin
Identificacin de sustancias
De acuerdo a la forma del espectro y por
comparacin con Handbooks
De acuerdo a la posicin dentro del espectro
electromagntico
Instrumentacin
Fotmetro o Colormetro
Espectrofotmetro
De haz de luz simple

De haz de luz doble

Instrumentacin - Colormetro
Los colormetros por comparacin consisten en
una serie de muestras de diferente intensidad de
color correspondientes a diferentes
concentraciones contra las cuales se compara la
muestra problema
El colormetro de filtro es un aparato en los que la
longitud de onda se selecciona por medio de
filtros pticos que son insertados en ste y la
intensidad de luz se mide con un galvanmetro
Colormetro por comparacin
Colormetro de filtro
Es llamado tambin fotocolormetro

M.C.I/2005

FOTOCOLORMETRO KLETT / SUMMERSON

Colormetro de filtro
Colormetro de filtro
Una solucin que absorbe el rojo pero no el
amarillo y el azul con la combinacin de
estos dar un color verde
Luz incidente Luz absorbida Luz emergente

Rojo
Amarillo
Azul
}
Determinacin del filtro
Por lo anterior podemos aplicar un sencillo mtodo
para precisar con cual filtro podramos leer una
solucin dependiendo el color de esta
Cuando la solucin sea roja no se deber utilizar
un filtro de color rojo porque justamente ese es el
color que no absorbe
En relacin a esto, la siguiente tabla se puede
utilizar para determinar que filtro se debe emplear
de acuerdo al color de la solucin a estudiar
Determinacin del filtro
Color del Filtro Rango espectral Soluciones
coloreadas
Azul 400-465 Roja, Naranja,
Amarilla, Verde,
Turbias

Verde 500-570 Roja, Amarilla,

Violeta, Naranja,
Azul

Rojo 640-700 Azul, Verde,

Amarilla
Manejo del fotocolormetro
1. Confirmar, que el filtro (A) adecuado se
encuentre dentro del portafiltros (B) y este
en su lugar (C)
2. Compruebe que la aguja indicadora (D)
est en el centro, en cero; si no es as
ajuste a cero con la perilla (E) que se
localiza en la parte superior; siempre y
cuando la lmpara se encuentre apagada
Manejo del fotocolormetro

C
D E

M.C.I/2005
Manejo del fotocolormetro
3. La lmpara (F) se enciende con el apagador
(G), deje calentar entre 5 y 10 minutos.
4. Ajuste la escala del potencimetro (H) con
la perilla correspondiente (I) a cero
5. Coloque la cubeta (limpia) (J) con el
blanco, en su sitio (K) y encienda con el
interruptor (L)
Manejo del fotocolormetro

F G

H
K

I
L

J
M.C.I/2005
Manejo del fotocolormetro
6. Mediante la perilla (M) del galvanmetro , se
acopla la lectura a cero , lo que implica que la
aguja (D) y la escala (H) deben estar en cero.
7. Para leer las soluciones problema : Hay que
retirar de la cubeta el blanco y colocar la
solucin problema, la aguja (D) se desviar de su
posicin , es necesario nuevamente ajustar (con
I) a cero, la lectura que proporcione la escala (H)
es la correspondiente al problema
Manejo del fotocolormetro

M.C.I/2005
Manejo del fotocolormetro
Las lecturas se realizan en U.K. (unidades
Klett)
Las lecturas que se mayores a 500 U.K y las
menores a 25 U.K., no se usaran para
calcular concentraciones
U.K / 500 = Absorbancia

U.K. X 500 = Transmitancia

Manejo del fotocolormetro
CUIDADOS
Las muestras no deben tener burbujas, encontrarse turbias o
con precipitados.
El volumen de la muestra no debe ser excesivo para evitar
que se desborde, en caso de que sucediera, se debe limpiar
con un pao limpio o papel absorbente suave, para evitar
rayarla.
La cantidad a adicionar es, mximo, hasta partes de la
cubeta
No se deben derramar lquidos, sobre todo solventes, cidos
o lcalis; dentro del contenedor de la cubeta, se puede daar
parte del mecanismo
El fotocolormetro nunca se debe encender sin filtro.
No deje que se sobrecaliente, mantenga apagado si no lo
utiliza
Aplicaciones del Fotocolormetro
Soluciones con color
Cromato

Dicromato

Permanganato

Tiocianato de hierro

Etc.
Espectrofotmetro
Un espectrofotmetro es un instrumento que
descompone un haz de luz (haz de radiacin
electromagntico), separndolo en bandas
de longitudes de onda especficas, (radiacin
monocromtica), con el propsito de irradiar
la muestra y determinar la cantidad de
radiacin absorbida transmitida que es
proporcional a la concentracin de analito de
acuerdo a Lambert-Beer
Espectrofotmetro
Componentes de los instrumentos pticos
1. Fuente estable de energa radiante

2. Selector de longitud de onda

(Monocromador)
3. Recipiente transparente para contener

la muestra
4. Detector de radiacin

5. Tratamiento y lectura de la seal

Componentes de los instrumentos
pticos

Fuente de rad. Monocromador Celda para Detector de Tratamiento y

Lmpara la muestra radiacion Lectura de seal
Fuentes de radiacin
Haz de radiacin con potencia suficiente en
el rango de longitud de onda de inters
Estable
Tipos
Fuentes continuas: emiten radiacin cuya

intensidad varia slo de forma gradual en

funcin de la longitud de onda.
Fuentes de radiacin
Fuentes continuas
Producen un amplio intervalo de longitudes de onda.
Slido incandescente (Globar, hilo de nicromio) (1-

40m).
Lmpara de tunsgeno (300-3000nm)

Lmpara de cuarzo de tunsgeno y halgenos (QTH)

(200-3000 nm)
Alta temperatura (3500K)

Lmpara de deuterio D2 o lmpara- arco de Hg/Xe

(160-400 nm)
Selectores de longitud de onda
Monocromadores
En muchos mtodos espectroscpicos, es necesario o
deseable poder variar, de forma continua y en un
amplio intervalo, la longitud de onda de la radiacin
Varan la longitud de onda de la radiacin en un amplio
rango mediante un proceso denominado scan o barrido
Tipos
Rendija - prisma

Rejilla de difraccion
MONOCROMADOR
Instrumento ptico que sirve para separar
una fuente de radiacin continua en haces
de elevada pureza espectral de longitud de
onda determinadas
Componentes:
Rendijas

Elemento dispersor
MONOCROMADOR
Elemento dispersor:
Prisma

Vidrio (para regin visible)

Cuarzo (para UV y visible)

Sal de piedra (para IR)

DISPERSIN DE LUZ
Monocromador de prisma de
Bunsen
ESQUEMA DEL INSTRUM.
Monocromador de red de
Czerney-Tuner
Monocromador
Elemento dispersor:
Rejilla de difraccin

Disco de un metal pulido con lneas

paralelas
15000 a 30000 lneas/pulg

El patrn de interferencia produce la

dispersin de la luz
ESQUEMA DEL
INSTRUMENTO
RADIACIN
MONOCROMTICA
Celdas para la muestra

celda de 5uL
Celdas para la muestra
El tubo, celda o cubeta en la cual se vierte la
solucin a irradiar no debe desviar la trayectoria de la
luz como requisito para el cumplimiento de la ley de
Lambert-Beer
La forma es de un paraleleppedo y puede tener
varias dimensiones
Celdas para la muestra
Material de las celdas
Vidrio (para espectro visible)

Se identifica con la letra G

Cuarzo ( para espectro Ultravioleta y

visible)
Se identifica con la letra S
Detector de radiacin
Son llamados transductores
Convierten la energa radiante en una seal elctrica.
Caractersticas
alta sensibilidad

alta razn seal/ruido.

Respuesta constante en un rango amplio de

longitudes de onda
seal directamente proporcional a la potencia de

radiacin
en ausencia de radiacin la seal debe ser cero (dark

current)
Detector de radiacin
Los transductores ms utilizados para las
regiones UV/Vis son:
Celda fotovoltaica

Fototubo

Fotomultiplicador

Fotodiodo ( serie de fotodiodos)

Detector de radiacin
Celda fotovoltaica
Detector de radiacin
Fototubo
Detector de radiacin
Foto Diodo
Detector de radiacin
Dispositivo de acoplamiento de carga (CCD)
AMPLIFICADOR Y LECTOR
Amplificador: dispositivo electrnico
de amplificacin de la corriente
elctrica
Lector: dispositivo que transforma la
corriente elctrica amplificada en
lecturas de absorbancia y/o
transmitancia
Tipos de espectrofotmetro
De haz simple
El monocromador produce un solo haz de radiacin que

pasa a travs de la muestra

Se debe calibrar el cero con el blanco

Solo tiene un recipiente para la muestra

De doble haz
El monocromador produce dos haces de radiacin, uno

que pasa a travs de la muestra y el otro que pasa a

travs del blanco
Tiene dos recipientes para el blanco y la muestra
El Instrumento
Aplicaciones
Medidas de:
Absorbancia/transmitancia de una muestra
Determinacin del espectro de

absorcin/transmisin
Determinaciones cinticas (o de estabilidad de

muestras)
Determinacin cuantitativa mono componente

o multi componente
Errores en espectrofotometra
CUIDADOS
Las muestras no deben tener burbujas, encontrarse turbias o con
precipitados.
El volumen de la muestra en la cubeta, no debe ser excesivo para
evitar que se desborde, en caso de que sucediera, se debe limpiar
con un pao limpio o papel absorbente suave, para evitar rayarla.
La cubeta se sujeta por los lados opacos.
La cantidad a adicionar es, mximo, hasta partes de la cubeta
No se deben derramar lquidos, sobre todo solventes, cidos o
lcalis; dentro del contenedor de la cubeta, se puede daar parte
del mecanismo
Se debe mantener, el espectrofotmetro, limpio y libre de
humedad
ERRORES EN
ESPECTROFOTOMETRA
Celdas limpias
Posicin de la celda reproducible
Muestra sin burbujas de gas
Estabilidad del sistema qumico
Error en funcin de la absorbancia
ERRORES EN
ESPECTROFOTOMETRA
Error en funcin de la absorbancia:
P0 1 P0
A log ln bc
P 2 .3 P
P0
dP
1 P0 2
dA d ln P
2.3 P P0
2 .3
P
1
dP
P dP
dA
2.3 2 .3 P
ERRORES EN
ESPECTROFOTOMETRA
dA dP A
P P0 *10
A 2.3PA
dA dP dc
A
P 0 1
A 2.3 AP0 *10 c
dc dP
A
c 2.3 A *10
ERRORES EN
ESPECTROFOTOMETRA
A
d ( A *10 ) A A
10 2.3 A *10 0
dA
A
10 (1 2.3 A) 0
1 2.3 A 0
2.3 A 1
1
A 0.43
2.3
ERRORES EN
ESPECTROFOTOMETRA
A=0.43 corresponde a 36.8% T
Error fotomtrico es la inexactitud al leer el
instrumento
El error relativo de la concentracin en
funcin de la concentracin ocurre cuando
reemplazamos 0.43 por A en la ecuacin de
dc/c
ERRORES EN
ESPECTROFOTOMETRA
dc dP
0.43
2.72dP
c 2.3 * 0.43 *10
entonces :
1% en la lectura significa
2.72% de error
en la concentracin(min)
ERRORES EN
ESPECTROFOTOMETRA
ANALISIS
MONOCOMPONENTE
Se determina la longitud de onda con un
pico de maxima absorcin
A la longitud de onda determinada se
realiza la determinacion de la curva de
calibracin con soluciones patrn de
concentracin conocida
Se determina la absorcin de la muestra
ANALISIS
MONOCOMPONENTE
Con ayuda de la curva de
calibracion se determina la
concentracin de la muestra.
ANALISIS
MULTICOMPONENTE
Caso 1: Los espectros no se sobreponen o al
menos es posible encontrar una longitud de onda
en donde X absorbe y Y no y viceversa
Caso 2: Los espectros se sobreponen parcialmente
Caso 3: Los espectros se sobreponen por completo
CASO 1
Los componentes X e Y se miden
sencillamente en las longitudes de
onda y respectivamente
CASO 2
CASO 2
Y no interfiere la medicin de X a , pero
X absorbe en forma apreciable junto con Y
a
La concentracin de X se mide
directamente por la absorbancia en
CASO 2
Se calcula la absorbancia de X a en base
a la absortividad en
Se resta de la absorbancia de la solucin en
y se obtiene la absorbancia de Y
La concentracin de Y se calcula en la
forma acostumbrada
CASO 3

Y1 Absortividad molar deY en 1

Y 2 Absortividad molar deY en 2
C X concentracin molar de X
CY concentracin molar deY
b longitud de la trayectoria
CASO 3

A1 X1 bC X Y1 bCY
A2 X2 bC X Y2 bCY

C X , CY son las incognitas