Materi Kuliah 1

Oleh :
Rita Ningsih, S.Si, M.Si
 PENDAHULUAN

A. Definisi & Istilah2 Umum

Mikroteknik (teknik histologi) :
Ilmu atau seni mempesiapkan organ, jaringan atau
bagian jrngn, sel tumbhn bahkan gen/produk gen
untuk dapat diamati & ditelaah.

Istilah-istilahUmum :
Organisme, organ, jaringan, sel, organel,
makromolekul (protein, sakarida, lipid, as. Nukleat)
B. Tujuan MITEKTUM
Utk mperoleh pngetahuan & pngalaman dlm pmbuatan
preparat/sediaan mikroskopis tmbhn.

C. Manfaat MITEKTUM
Mendptx pengetahuan
Penunjang penelitian/tgs akhir
Kemudahan utk pahami struktur tmbhn
Pengalaman bekal di dunia kerja kelak

D. Persyaratan Ilmu Dasar

Biologi Dsr, Morfologi & anatomi Tmbhn, kimia Dsr &
Organik.
E. Sumber & Jenis Bahan Sediaan

Organisme hidup or hasil pertumbuhan dr tanaman baik

in vivo or in vitro, uniselular or multiselular.
Jenis Bahan : lunak, keras, normal, patologis.

Lunak embrio, ujung akar, kecambah

Keras tumbhn bkayu, cabang pohon, biji keras.
Patologis alami infeksi (jamur, bakteri), tumor.
Bahan dr kultur jaringan sel, bagian jaringan/organ
yg ditumbuhx scr aseptik (steril) dlm botol.
F. Macam-macam Metode MITEKTUM

Embedded :
- Paraffin Un Embedded :
- Celloidin - Whole mount
- maserasi
- smear/geser
Mnrt keawetanx : - acetolisis
- preparat segar/temporer - squash
- preparat semi permanen - penampang
- preparat permanen kayu
Penentuan metode yg tepat trgantung : bahan, tujuan,
Fasilitas dan perlengkapannya (alat & bahan).
1. Metoda Paraffin
Metoda utk mbuat preparat awetan, paling sering
dipakai & dianjurkan utk keperluan studi anatomi
jaringan/organ. Pd metoda ini bhn ditanam dlm
parafin lalu disayat dg mikrotom putar dan
diwarnai sblm akhirnya diamati.

2. Metoda Maserasi
Utk mngamati bentuk2 sel penyusun jaringan,
melalui proses pemisahan sel-sel baik scr kimiawi
maupun mekanik. Hasil metoda bs berupa preparat
semi permanen or awetan.
3. Metoda Whole Mount
Disebut jg metoda keseluruhan utk mbuat preparat
awetan dari tmbhn tingkat rendah (bryophyta,
alga), tmbhn uniselular lainnya maupun bgn tmbhn
tingkat tinggi (spermatophyta) yg berukuran kecil.

4. Metoda Acetolisis
Utk mbuat preparat polen. Prinsipx : pemisahan
kumpulan polen mjadi polen yg terpisah2 (sel
tunggal polen) melalui proses sentrifuga scr
brulang slnjtx dibuat mnjadi preparat semi
permanen.
5. Metoda Squash
Utk mbuat preparat yg menunjukkan pmbelahan
mitosis & meiosis. Bahan yg digunakan utk
mnunjukkan mitosis ujung akar sdgkn u meiosis
dipakai antera sblm mikrosporogenesis.

6. Metoda Smears
Dsbt jg preparat geser krn prinsip kerjax dg cara
mnggeser antera pd kaca objek dgn mgunax
skalpel. Dibuat utk amati meiosis, sayatan brsifat
permanen.
7. Metoda Penampang Kayu
Utk mbuat preparat awetan dr balok kayu
(xilem) yg keras dr pohon menahun. Pd metoda
ini dpt ditunjukkan penampakan xilem
melintang, radial, tangensial. Penyayatan
mgunax mikrotom sorong/sliding.

8. Metoda Mikrokimia/histokimia
Utk mngetahui zat-zat penyusun bagian2 sel dg
pembubuhan khemikalia/zat kimia. Misalnya
menunjukkan amilum, lignin, selulosa, protein,
suberin.
 Preparat
Jaringan

Preparat sel
(mitosis)
Pollen grain

Maserasi
Kayu/xilem

stomata Leaf cross section

Xilem Tangential Section
Tilia Wood

Xilem Radial Section

Xilem Cross Section