Terapigenpadamanusia 09 Nopember 2009

TERAPI GEN PADA MANUSIA
All images in this document is removed due to copyright restriction

Ahmad Aulia Jusuf
Bagian Histologi
Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia
2009
Agenda
Pendahuluan
Definisi Terapi Gen
Jenis Terapi Gen
Metoda Terapi Gen
Prasyarat Terapi Gen
Contoh Terapi Gen
Monday, November Terapi Gen pada

09, 2009 Manusia/AAJ/Histologi 2
Human Gene Therapy?

PENDAHULUAN
5000 penyakit bawaan
Kebanyakan bersifat genetik
Defisiensi produk gen
<< Dapat digantikan dengan produk dari luar
Insulin
Defek pada produk ensim tak bisa digantikan

Tak stabil dan mudah rusak
Tak bisa dimasukkan dalam bentuk aktif
Sifat impermeabel membran sel terhadap molekul

besar
Terapi gen
_______________________________________________________________________________________________________________________________________________
1Snustad D. Peter and Simmons M.J. : Human gene therapy in Principles of genetics, 4th Ed, 2006: 499-503

Definisi
Terapi untuk mengobati penyakit
tententu1,2,3,4
menginsersikan gen yang telah diperbaiki
atau gen tertentu kedalam genom sel-sel
atau jaringan individu
menggantikan gen yang abnormal penyebab
penyakit tersebut
_______________________________________________________________________________________________________________________________________________
2Gene Therapy diunduh dari "http://en.wikipedia.org/wiki/Gene_therapy"
3Scott T., Gene Therapy Breakthrough, diunduh dari www.unitedspinal.org. February 26th, 2008
4What is gene therapy diunduh dari www.ornl.gov/sci/techresources/Human.../genetherapy.shtml

Prinsip Terapi Gen2,3,4
Insersi gen yang normal pada lokasi yang tidak
spesifik di dalam genom
untuk menggantikan gen yang tidak berfungsi.
Prinsip umum yang paling sering digunakan
Gen abnormal dihilangkan dari genom individu
dan digantikan oleh gen yang normal
Homologous recombination
Gen abnormal diperbaiki melalui cara selective
reverse mutation
Mengubah regulasi (pengaturan) gen tertentu.
_______________________________________________________________________________________________________________________________________________
3ScottT., Gene Therapy Breakthrough, diunduh dari www.unitedspinal.org. February 26th, 2008

Jenis Terapi Gen1,2,4
Terapi gen sel somatik (somatic cell gene therapy)

Terapi gen sel germinal (Germ line cell gene therapy)
_______________________________________________________________________________________________________________________________________________

Jenis Terapi Gen
Terapi gen sel somatik (somatic cell gene therapy)1,2,4
gene therapy non hereditable
gen yang normal atau telah dimodifikasi ditransfer ke dalam sel-sel
somatik pasien
mengobati/mengatasi gejala penyakit pasien
tidak dapat diturunkan kepada generasi selanjutnya
gen yang telah diperbaiki ini hanya ada pada sel-sel somatik saja
dan tidak ada pada sel-sel germinal.
mirip dengan transplantasi sel, jaringan atau organ
Lebih rumit dan lebih berbahaya
_____________________________________________________________________________________________________________________________________
________

Jenis Terapi Gen
Terapi gen sel germinal (Germ line cell gene therapy)1,2,4
Gen yang mengalami defek pada sel-sel germinal
diperbaiki dengan cara menginsersikan dan mengintegrasikan gen yang
normal atau gen yang telah dimodifikasi kedalam genom sel-sel germinal
Gen yang telah diinsersikan ini kemudian akan diturunkan ke generasi
berikutnya
Sangat bermanfaat untuk mengatasi penyakit-penyakit genetik dan
penyakit-penyakit yang bersifat herediter
masih sulit dilakukan karena alasan tehnis dan etik
telah mengubah genetik seseorang
_________________________________________________________________________________________________________________________________________
______

METODA TERAPI GEN1,2,3,4
Transfer gen yang telah dimodifikasi atau gen
normal kedalam sel-sel sasaran pada pasien
Menggunakan vektor biologi yaitu virus
Menggunakan cara non virus
naked DNA
oligonucleotides
lipoplexes dan polyplexes
hibrid methods
dendrimers
_______________________________________________________________________________________________________________________________________________

Transfer Gen menggunakan vektor biologi1,2,3,4
Vektor biologi yang digunakan adalah virus
susunan genetiknya telah diubah sehingga dapat membawa gen
manusia yang normal
gen yang telah diperbaiki dimasukkan kedalam sel-sel sasaran pada
tubuh manusia dengan cara tertentu dan kemudian berintegrasi pada
genom tertentu
gen-gen pada virus yang dapat menyebabkan penyakit harus dihilangkan
dan diganti dengan gen-gen yang telah diperbaiki
contoh virus A diketahui dapat berreplikasi atau memperbanyak diri
dengan cara menginsersikan gen-gen nya kedalam genom sel-sel host.
virus ini mempunyai 2 jenis gene yaitu gen A dan gene B
Gen A mengkode protein untuk menginsersikan gen-gen nya kedalam genom sel
host (inang)
Gen B menyebabkan timbulnya penyakit pada host
gen C adalah gen yang telah diperbaiki
menggantikan gen B
gen A tetap dipertahankan untuk menjalankan fungsinya.
_______________________________________________________________________________________________________________________________________________

Vektor biologi yang digunakan adalah virus
Adenovirus merupakan virus generasi pertama
yang digunakan dalam terapi gen dan sangat
efektif sebagai vektor pembawa transgen2,4
Virus lain
retrovirus
adeno-associated viruses
virus herpes simplex
virus penyebab HIV
_______________________________________________________________________________________________________________________________________________

Retrovirus1,2,3,4
Materi genetik pada virus ini adalah dalam bentuk RNA
Ketika retrovirus menginfeksi sel sasaran (host)
RNA retrovirus, ensim reverse transcriptase dan integrase
masuk kedalam sel sasaran
RNA retrovirus akan diubah menjadi DNA melalui proses
reverse transcription menggunakan ensim reverse
transcriptase
DNA kemudian akan ditransfer kedalam inti sel sasaran
berintegrasi pada tempat tertentu di genom sel sasaran
dengan bantuan ensim integrase
DNA yang telah diperbaiki ini juga akan terintegrasi pada
tempat tertentu di genom sel sasaran
_______________________________________________________________________________________________________________________________________________

Transfer Gen menggunakan vektor retrovirus
(diunduh dari encarta.msn.com/media_461561269/gene_therapy.html)

Retrovirus1,2,3,4
Salah satu masalah yang dapat terjadi pada terapi gen
ensim integrase dapat menginsersikan materi genetik virus pada tempat yang kurang
sesuai
pada bagian tengah gen-gen endogen pada host
gen endogen ini tidak dapat berfungsi dikenal sebagai insertional mutagenesis
pada gen pengatur fungsi gen lainnya
proses pembelahan sel dapat tidak terkendali dan berubah menjadi sel kanker
Hal ini sekarang dapat diatasi dengan menggunakan ensim Zinc finger nucleases5
Keuntungan menggunakan retrovirus
transgen yang dimasukkan bisa di transmisikan kesemua sel yang terinfeksi dan
turunannya
Kerugian
dapat menyebabkan terjadinya mutasi genetik yang berbahaya selama tahap
pengintegrasian
_______________________________________________________________________________________________________________________________________________

Adenovirus1,2,3,4
Ketika virus adenovirus menginfeksi sebuah sel inang
molekul DNA virus tersebut akan dimasukkan kedalam sel inang tersebut
materi genetik adenovirus tidak bersatu dengan materi genetik sel inang
molekul DNA virus terletak bebas dalam inti sel dan proses transkripsinya berlangsung secara sendiri
molekul DNA virus tidak ikut berreplikasi ketika sel mengalami pembelahan sehingga sel-sel inang hasil
pembelahan tidak mengandung DNA virus
membutuhkan pemasukkan kembali gen-gen yang sudah dimodifikasi ke dalam populasi sel yang baru
Sebaliknya keadaan ini akan mencegah terjadinya kanker
Gendicine
adenovirus yang telah mengandung gen p53 yang digunakan pada terapi gen untuk mengobati penyakit
kanker pada kepala dan leher
sudah diizinkan oleh FDA China untuk digunakan pada manusia pada tahun 2003
FDA Amerika Serikat telah menyetujui advexin, suatu vektor yang serupa dengan Gendicine untuk
digunakan di Amerika serikat pada tahun 2008
_______________________________________________________________________________________________________________________________________________

Transfer Gen menggunakan vektor adenovirus
(diunduh dari www.acceleratingfuture.com/michael/blog/?p=455)

Transfer Gen menggunakan cara non virus1,2,3,4
Keuntungan
dapat diproduksi dalam jumlah besar
immunogenisitas pada sel inang yang rendah
Beberapa metoda non virus yang dapat digunakan adalah
Naked DNA
metoda transfeksi non virus yang sangat sederhana
penelitian klinik dengan cara menyuntikan naked DNA secara intramuskular
menunjukkan sebagian hasil yang sukses dan sebagian lagi mengalami
kegagalan
ekspresi gen pada metoda transfeksi ini sangat rendah dibandingkan dengan
cara transfeksi lainnya
_______________________________________________________________________________________________________________________________________________

Beberapa metoda non virus yang dapat digunakan
adalah
Oligonukleotida
Metoda menginaktifkan gen-gen yang terlibat dalam proses penyakit.
Menggunakan antisense yang spesifik untuk gen sasasaran
mengganggu proses transkripsi gen sasaran yang rusak.
Menggunakan oligonukleotida rantai ganda (double strand
oligonucleotide)
mengikat faktor-faktor transkripsi yang diperlukan untuk regulasi
promoter gen sasaran
_______________________________________________________________________________________________________________________________________________

Beberapa metoda non virus yang dapat digunakan adalah
Lipoplexes and polyplexes
Meningkatkan efisiensi transfer dengan cara melindungi DNA dari kerusakan
dan memfasilitasi pemasukkannya kedalam sel
Menggunakan molekul lipid
lipoplexes dan polyplexes
dirancang untuk melindungi DNA dari proses degradasi selama proses
transfeksi
membungkus plasmid yang mengandung DNA dalam bentuk seperti micelle
atau liposome
lipoplexes atau polyplexes yang telah mengandung DNA dikenal sebagai
lipoplex.
lipoplex akan berinteraksi dengan membran sel dan masuk kedalam secara
endositosis
endosome yang mengandung lipoplex ini kemudian akan lisis dan transgen
yang ada di dalamnya akan dikeluarkan ke dalam sitoplasma sel untu
kemudian akan masuk ke dalam inti sel
_______________________________________________________________________________________________________________________________________________

Beberapa metoda non virus yang dapat digunakan

adalah
Metoda Hibrid (Hybrid method)
Untuk meningkatkan efisiensi trnasfer transgen dikembangkan metoda
hibrid (campuran) yaitu kombinasi liposome dengan virus influenza
atau HIV yang diinaktifkan
_______________________________________________________________________________________________________________________________________________

HAMBATAN DALAM TERAPI GEN2,4
Beberapa faktor yang menghambat efektivitas penggunaan terapi gen
Masa hidup alami terapi gen yang pendek (Short-lived nature of gene therapy)
gen yang dimasukkan kedalam sel-sel target harus dapat berfungsi
sel-sel yang mengandung gen terapi ini harus dapat hidup lama dan stabil.
Respons Imunologik
adanya stimulus tertentu yang merangsang timbulnya respons imunologik dapat
menurunkan efektivitas terapi gen
adanya respon imunologik ini juga akan menyulitkan pengulangan terapi gen pada
pasien
Masalah dengan virus yang berfungsi sebagai vektor
toksisitas, reaksi imunologik dan inflamasi, kontrol gen dan jaringan sasaran.
kemungkinan pulihnya kembali kemampuan virus untuk menyebabkan penyakit pada
manusia
_______________________________________________________________________________________________________________________________________________

HAMBATAN DALAM TERAPI GEN2,4
Beberapa faktor yang menghambat efektivitas penggunaan terapi gen
Kelainan gen multipel
terapi gen sulit digunakan untuk mengobati penyakit-penyakit yang disebabkan oleh
adanya kombinasi gen-gen yang mengalami kerusakan
penyakit jantung, tekanan darah tinggi, Alzheimer, artritis dan diabetes.
Potensi untuk timbulnya tumor
Bila DNA diintegrasikan pada tempat yang salah di dalam genom, misalnya pada
daerah tumor suppressor gene, hal ini dapat menyebabkan timbulnya tumor.
pasien dengan X-linked severe combined immunodeficiency (X-SCID) yang diterapi dengan
sel punca darah (Hematopoietic stem cells yang diinfeksi oleh retrovirus yang mengandung
transgen
Tiga dari 20 pasien yang diterapi menderita leukemia6
_______________________________________________________________________________________________________________________________________________
6Woods NB, Bottero V, Schmidt M, von Kalle C, Verma IM (Apr 2006). "Gene therapy: therapeutic gene causing lymphoma". Nature 440
(7088): 1123

Prasyarat1
National Institute of Health (NIH)

Gen harus di klon dan diketahui karakteristiknya
harus tersedia dalam bentuk murni
Metoda efektif
Resiko terapi gen
harus dievaluasi secara berhati-hati
seminimal mungkin
Penyakit tidak dapat diobati dengan cara lainnya
Harus ada data penelitian pendahuluan
_______________________________________________________________________________________________________________________________________________

Contoh Terapi Gen1
Terapi gen pada manusia pertama kali dilakukan tahun 1990
penyakit Adenosine deaminase-deficient severe combined immunodeficiency
disease (ADA-SCID)
SCID
penyakit autosomal yang jarang terjadi
penderita tidak mempunyai sistem imun
beberapa penderita mengalami defisiensi ensim adenosine deaminase (ADA)
kadar deoxyadenosine yang terfosforilasi meningkat mencapai tingkat toksik dan
terakumulasi dalam limfosit T
membunuh sel limfosit.
_______________________________________________________________________________________________________________________________________________

Terapi Gen padaAdenosine deaminase-deficient severe
combined immunodeficiency disease (ADA-SCID)

Contoh Terapi Gen 1
Contoh penggunaan adenovirus dalam terapi gen

terapi gen yang dipakai untuk mengobati cystic fibrosis (CF)
virus adenovirus yang membawa gen CF diinhalasi oleh pasien
sel-sel paru akan terinfeksi dan mensintesa produk gen CF untuk mengatasi
simptom dan gejala penyakit
kuatnya reaksi imunologik tubuh menyebabkan terapi gen menjadi tidak
efektif
Sel-sel yang terinfeksi virus dan mengandung transgen akan mati dan
tidak bisa memperbanyak diri
_______________________________________________________________________________________________________________________________________________


Terapigenpadamanusia 09 Nopember 2009

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Judul Asli

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

Terapigenpadamanusia 09 Nopember 2009

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

TERAPI GEN PADA MANUSIA

All images in this document is removed due to copyright restriction

Monday, November Terapi Gen pada

Monday, November Terapi Gen pada

Defek pada produk ensim tak bisa digantikan

Tak bisa dimasukkan dalam bentuk aktif

Sifat impermeabel membran sel terhadap molekul

Monday, November Terapi Gen pada

Monday, November Terapi Gen pada

Monday, November Terapi Gen pada

Terapi gen sel somatik (somatic cell gene therapy)

Monday, November Terapi Gen pada

Monday, November Terapi Gen pada

Monday, November Terapi Gen pada

Monday, November Terapi Gen pada

Monday, November Terapi Gen pada

Monday, November Terapi Gen pada

Monday, November Terapi Gen pada

(diunduh dari encarta.msn.com/media_461561269/gene_therapy.html)

Monday, November Terapi Gen pada

Monday, November Terapi Gen pada

Monday, November Terapi Gen pada

(diunduh dari www.acceleratingfuture.com/michael/blog/?p=455)

Monday, November Terapi Gen pada

Monday, November Terapi Gen pada

Monday, November Terapi Gen pada

Monday, November Terapi Gen pada

Beberapa metoda non virus yang dapat digunakan

Monday, November Terapi Gen pada

Monday, November Terapi Gen pada

Monday, November Terapi Gen pada

National Institute of Health (NIH)

Monday, November Terapi Gen pada

Monday, November Terapi Gen pada

Monday, November Terapi Gen pada

Contoh penggunaan adenovirus dalam terapi gen

tidak bisa memperbanyak diri

Monday, November Terapi Gen pada

Anda mungkin juga menyukai