Prevalence of Staphylococcus aureus and

methicillin-resistant Staphylococcus aureus

(MRSA) on retail meat in Iowa

KELOMPOK II :
1. KHARISMA APRILIA PRATIWI (15010102006)
2. RIZKI NUR HIDAYAT (15010100011)

MATA KULIAH PRAKTIKUM ILMU PENYAKIT TROPIS

PROGRAM STUDI DIII ANALIS KESEHATAN
STIKES RUMAH SAKIT ANWAR MEDIKA
ABSTRACT
 Staphylococcus aureus yang resisten Methicillin (MRSA) baru-baru ini
muncul sebagai masalah kesehatan dan saat ini menyebabkan sekitar 94.000
infeksi invasif setiap tahun di Amerika Serikat, menyebabkan sekitar 18.650
kematian
S. aureus juga menjadi fokus sebagai patogen bawaan makanan dengan
sekitar 241.000 infeksi yang didapat di negara setiap tahunnya di Amerika
Serikat. Selanjutnya, MRSA telah ditemukan pada beberapa jenis hewan
penghasil daging, termasuk babi, ayam dan ternak.
Beberapa penelitian telah mendokumentasikan kehadiran MRSA pada
produk daging mentah eceran, dengan prevalensi berkisar antara <1 persen
di Asia sampai dengan 11,9 persen di Belanda, dengan prevalensi intermiten
ditemukan pada penelitian lain.
MRSA telah diisolasi dari daging eceran di Asia, Kanada, Eropa, dan
wilayah lain di Amerika Serikat, tujuan dari penelitian ini adalah untuk
menetapkan prevalensi dan jenis molekuler S. aureus pada sampel daging
mentah yang dikumpulkan dari negara bagian Midwestern pedesaan.
 Sampel yang digunakan :
1. 55 daging babi (daging dan
Waktu penelitian daging babi)
: Bulan Februari 2. 45 ayam (dada dan drum)
April 2009 C. 3. 29 daging sapi (daging sapi
A.
dan sirloin)
4. 36 sampel kalkun (stik drum
SAMPEL DAGING dan kalkun tanah).
Pengambilan MENTAH SEGAR
sampel dari 22
toko di seluruh
Sampel diangkut dengan
negara Lowa (9
B. D. paket es biru ke laboratorium,
toko di perdesaan
dan 13 di dan diproses dalam waktu 6
perkotaan) jam setelah pembelian.
 1
Bakteri 3
Kultur Uji
2 Kepekaan 4
Antimikroba Analisis
Molecular
Statistik
testing
2.1.MOLECULAR
Bakteri Kultur TESTING

DNA
Sampelgenom
yang diekstraksi menggunakan
telah terkumpul, digunakan kit kapas
penyiapan
bekasDNAyangGenomik Wizarddengan
telah dibasahi (Promega)
pvl
kalduPoly-merase Chainmengandung
pengayaan yang Reaction (PCR) dilakukan/ L,
10 g tryptone pada
75 gsemua
NaCl isolat
/ L, 10dan pengetikan SCCmec
g manitol
(yang
/ L danbergantung
2,5 g ekstrakpada keberadaan
ragi gen mecA)untuk
/ L yang digunakan dilakukan pada (swab)
menggosok isolat MRSA
melaluidan pengetikan
urutan
seluruhmultilokus
permukaan(MLST) dilakukan pada semua isolat MRSA
luar sampel

Organisme
Diinkubasi 24ditumbuhkan semalam
jam pada suhu 37 Ckaldu
35 Cdidalam padapengayaan
piring agar5 darah.
mL Dua atau tiga koloni diambil
dari piring dan
Diinokulasi 5 Ldisuspensikan ke dalam
kaldu ke piring 200 LMRSA
agar-agar air suling
selektif (BBL CHROM agar
Amplifikasi
MRSA, Becton, dilakukan dengan
Dickinson menggunakan
dan Company, MD),10Columbia
buffer Biolase, M deoxynucleoside
200 nalidixic
colistin dan
triphosphat, 1,5 (Remel,
acid (CNA) plate mM MgCl, Konsentrasi
Lenexa, KS) 200 nM primer KDP F1 / R1, RIF4 F3 / R9,
Konsentrasi 400 nM24-48
Pelat ini diinkubasi primerjamCIF2
padaF2 / R2,
suhu 35 MECI
C danP2 / P3, RIF5
diperiksa untukF10S. /aureus.
R13, 800 nM konsentrasi
primer DCS
Iso- lates F2 / R1, MECA
dikonfirmasikan P4 / P7,S.1.25U
menjadi aureusBiolaseTaq Polymerase;
dengan memeriksa dan 3 L sel untuk volume
penampilannya
akhir 50 L.
pada pewarnaan Gram, dan dengan melakukan uji katalase, uji koagulase slide dan
Kondisi
tabung danPCRUjiadalah 94 C
aglutinasi selama
lateks 10 menit;
S. aureus 30 siklus
(Pastorex berikut
Staph- plus,ini: 94 C selama 30 detik, 53 C
Bio-Rad).
selama 30 detik, 72 C selama 1 menit, dan ulangi; 72 C selama 4 menit.
*Perlawanan
HASIL
HASIL
*Amplifikasi
binding protein
menggunakan
Methicillin dinilai
gen Staphylococcus
primer 2[21]
(PBP2j)
protein Adengan
(uji untuk
divalidasi aglutinasi
pengujian
(spa) dilakukan
lateksdengan
digunakan MRSA,
adanya
melalui penicillin
PCR seperti
Oxoid Ltd.,
perangkat
yang dijelaskan sebelumnya [20],
lunak Hants,
Ridom-StaphType. *Semua prosedur
UK) dan
molekuler adanya gen
menggunakan mecA
kontrol positif dan negatif yang diketahui.
3. UJI KEPEKAAN ANTIMIKROBA
Semua isolat diuji untuk kerentanan antimikroba dengan metode pengenceran kaldu
yang dijelaskan oleh Lembaga Standar Laboratorium
Isolat diuji untuk kerentanan terhadap penisilin, oxacillin, tetrasiklin, eritromisin,
klindamisin, trimetoprim-sulfametoksazol, quinupristin / dalfopristin, gentamisin, lov- fl
oxacin, moxi fl oxacin, linezolid, daptomycin, vankomisin, dan rifampisin.

HASIL
4. Analisis Statistik
Uji pasti Fisher digunakan untuk menilai signifikansi pada tingkat prevalensi yang
diamati dari Staphylococcus aureus methicillin yang rentan antara tipe daging.
Faktor risiko yang dinilai adalah jenis daging, dan letak geografis toko (perkotaan vs
pedesaan)
Perangkat lunak SAS versi 9.2 (SAS Institute Inc., Cary, NC) digunakan untuk
melakukan analisis.
HASIL
 Hasil sampel daging mentah terhadap hasil resisten antibiotik
Karakteristik Statistik S. aureus daging
mentah di Lowa
3.
1. Uji Kepekaan
Pravalensi Antimikroba
S. aureus pada sampel daging mentah dan resiko kolonisasi
Lima darikeseluruhan
Prevalensi 27 isolat (18,5%)
S. aureus rentan terhadap
pada sampel semua
daging yangantibiotik yangkomersial
tersedia secara diuji. 21didari
Iowa27ditemukan
isolat (77,7%) resisten
16,4% (27/165).
terhadap penisilin;
Dari 27 isolat 18/27dua
S. aureus, (66,7%)
(7,4%) resisten
ditemukanterhadap
resistentetrasiklin.
methicillin, Enam (22,2%)
sehingga resisten
prevalensi terhadap
MRSA klindamisin,
keseluruhannya 4
adalah
(14,8%) resisten
2/165(1,2%). terhadap
S. aureus paling eritromisin,
sering terjadi dan
pada 2kalkun
(7,4%) resisten
(7/36, 19,4%),terhadap oksasin.
daging babi (10/55Semua
sampel,isolat
18,2%)rentan terhadap
dan ayam (8/45
trimetoprim-sulfametoksazol,
sampel, 17,8%). Prevalensi yanggentamisin,
jauh lebih lovofloxacin,
rendah ditemukan moxifloxacin,
pada daginglinezolid,
sapi (2/29daptomycin, vankomisin,
sampel, 6,9%). MRSA hanyadan
ditemukan
rifampisinpada daging babi (2/55, 3,6% sampel daging babi)

4. Analisis
2. Tipe
Statistik
Molekuler S. aureus Protein A (spa)
Hasil yang
Analisis diperoleh
statistik denganpada molekular uji
menggunakan ditemukan tiga belas
pasti Fischer tidakjenis spa berbeda.
menghasilkan Dari 27yang
perbedaan isotopsignifikan.
yang berbeda,
Jenis
tujuhtidak
daging (25,9%) adalah dengan
signifikan jenis spamenggunakan
t034, yang telah
dagingdikaitkan denganstrain
sapi sebagai ST398. Empat isolat
referensi, dengan(14,8%)
kalkun,adalah
ayam,t337,
dan
sebelumnya
babi menghasilkan dikaitkan
nilai dengan ST9, tipe
p dari 0,8383, '' terkait
0,186, dan babi
0,111'lainnya. 3 isolat tambahan
masing-masing. (11,1%)
Perbandingan adalah
lokasi t002, dan
geografis 2
yang
isolat (7,4%)pedesaan
menggunakan adalah t008, yang
sebagai merupakan
rujukan jenissignifikan
juga tidak manusia dengan
biasa; Dua isolat
nilai-p lainnya (7,4%) diidentifikasikan
0,670.
sebagai t526. spa tunggal yang tersisa adalah: t012; t444; t548; t714; t742; t1491; t1684; dan t3446.
Kedua isolat tahan oksasill diuji untuk tipe SCCmec. Strain MRSA adalah t008 / ST8 dan t034 / ST398,
dengan isolat t008 bertekad menjadi tipe SCCmec IV dan isolat t034 yang ditentukan menjadi tipe SCCmec V.
Isolat MRSA t008 juga ditemukan membawa gen pvl. Semua isolat S. aureus lainnya negatif untuk pvl.
 kami menemukan prevalensi S. aureus yang tinggi pada ayam dan kalkun, dengan prevalensi daging sapi yang
lebih rendah. Namun, dalam penelitian kami hampir semua isolat sensitif terhadap methicillin, dan persentase
yang lebih rendah adalah jenis spa yang berhubungan dengan ST398 daripada yang ditemukan di Belanda,
namun lebih tinggi dari yang diamati di Kanada
ST398 yang telah dikaitkan secara primer dengan babi, penelitian ini menemukan strain ST398 yang terkait
dengan sampel kalkun yang tinggi. Sebagai tambahan pada t034 - ST398, ditemukan strain '' swine-associated
'' kedua, t337-ST9 pada sampel kalkun.
Prevalensi ST398 pada babi telah terbukti 49%, 24,9% dan 12,8% di AS, Kanada dan Belanda.
ST398 juga telah dilaporkan dalam isolat klinis dari kalkun selain sampel daging kalkun. Ini menunjukkan
bahwa kalkun, selain babi, adalah reservoir yang mungkin untuk strain ST398 dan ST9 di Amerika Serikat.
ST398 juga umumnya dikaitkan dengan resistensi tetrasiklin, yang didukung oleh pengamatan 100% isolat
t034 yang menunjukkan fenotipe tahan-tetrasiklin. Selanjutnya, lebih dari 100% isolat t337 juga diamati tahan
tetrasiklin.
Penentuan t002 dan t008 pada beberapa isolat makanan dicatat. Kedua jenis spa ini biasanya terkait dengan
manusia, dan secara poten dapat diperkenalkan ke daging selama pemrosesan atau pengemasan daging, setelah
pemotongan. t008 / USA300 isolat juga telah ditemukan sebelumnya dalam sampel daging di AS dan Belanda
[12,14]; Namun, sampel kami positif pvl, yang hanya pernah diamati satu kali sebelum penelitian ini,
 Pada pravalensi daging yang tersedia secara eceran sebagai
perantara untuk infeksi S. aureus dan MRSA masih belum
ditentukan, adanya strain MRSA yang berpotensi jahat seperti
pvl positive t008 menunjukkan bahwa mode transmisi ini
memerlukan evaluasi lebih lanjut dan tidak dapat dibuang