UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN AGUSTIN

FACULTAD DE INGENIERIA DE PROCESOS

ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERIA METALURGICA

Metalografa y Microscopia Electrnica

FUNDAMENTOS DE MICROSCOPIA

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 Microscopia
Es el estudio detallado de los componentes
de materiales (minerales, metales y
aleaciones), por el tamao que poseen,
requiere el uso de microscopios
Metalogrficos y Electrnicos que
permitan ampliar muchas veces ms la
imagen de las estructuras que los
constituyen para su estudio.
Fundamento de la microscopa:
La microscopa es la tcnica que
permite observar objetos con un
microscopio (simple o compuesto) y
obtener una imagen aumentada del
mismo y para ello es necesario tener
en cuenta estos tres elementos:
El objeto a estudiar (preparacin
de muestra)
Una fuente de iluminacin.
Un sistema ptico
Trans-iluminacin:
La trans-iluminacin ha sido indudablemente el primer
mtodo de iluminacin en la larga historia de la microscopa.
El rayo electromagntico (luz visible por ejemplo) debe
atravesar el objeto, en ste caso un corte histolgico.
Como condiciones fundamentales para ser observados al
microscopio compuesto, los preparados biolgicos deben ser
muy delgados y transparentes. Deben ser rebanados con
instrumentos especializados (micrtomos) que permiten
obtener cortes cuyo espesor debe estar en el orden de las
micras. Rutinariamente el espesor del corte puede oscilar en
un rango que va de 1 a 5m, pero su grosor depender del
tipo de clulas y tejidos.

Corte histolgico: es una seccin o rodaja fina de un material y generalmente coloreada con
alguna tincin especfica para resaltar una parte de la estructura.
La flecha amarilla representa el haz de luz incidente sobre la muestra, que en la
transiluminacin atraviesa la misma; mientras que en la epi-iluminacin el rayo
incide de manera oblicua y en este caso son los rayos reflejados los que se capturan
para formar la imagen.
Aumento y resolucin
Los trminos aumento y resolucin
deben ser bien conocidos por todo
usuario del microscopio. El
mecanismo mediante el cual se
produce este fenmeno ha sido
estudiado por siglos y se explica
mediante leyes de la fsica.
Considerar nicamente el aumento
no es suficiente para sacar el mejor
partido del microscopio, pues otro
factor, la resolucin, determina lo
que se ver.
Aumento
El poder de aumento de una lente est determinado por el
grado de curvatura de su superficie y la distancia focal. En las
lentes convexas mientras mayor sea la curvatura, menor ser
la distancia focal y mayor ser el aumento. Se ha enunciado
anteriormente que el microscopio compuesto aumenta en dos
etapas y puesto que una sola lente no es suficiente se deben
colocar varias lentes una detrs de la otra, potenciando de
esta manera el poder de aumento. El primer juego de lentes,
cercano al objeto en estudio, se denomina objetivo y el
segundo juego, cercano al ojo del observador se denomina
ocular. Cada sistema de lentes es capaz de producir una
imagen aumentada cuyo valor se enuncia con la letra x, as
que 10x significa que la imagen est aumentada 10 veces.
AUMENTO TOTAL: Aumento del objetivo x Aumento del ocular
Resolucin
Es la capacidad que tiene un sistema ptico de aislar dos puntos que se
encuentran muy prximos entre s, de manera que se puedan ver
individualizados uno del otro. La riqueza de detalles que puede ser
observada al microscopio depende de la habilidad de este para hacer
que los puntos del objeto que estn muy cercanos aparezcan en la
imagen como puntos separados.
Mientras ms corta sea la distancia entre esos puntos del objeto, ms
finos sern los detalles.
La distancia entre esos dos puntos se conoce como Lmite de
Resolucin, el cual es tambin referido como el Poder de Resolucin y
puede ser utilizada como un indicador del rendimiento del
microscopio.
Factores que determinan el poder de resolucin
Al observar pequeos objetos al
microscopio, la luz incidente
proveniente de ellos es desviada
de su trayectoria inicial y
mientras ms pequeos sean,
mayor ser la desviacin. Las
lentes del objetivo deben
recolectar como sea posible la
mayor cantidad de rayos
desviados para formar una
imagen ntida; a ms rayos
capturados, mayor resolucin
(1) Muestra que es atravesado por un haz de rayos luminosos (2) los cuales son
captados por el objetivo (3). Al formarse el cono de luz proveniente del objeto se
determina un ngulo, tambin llamado de apertura, donde a representa la mitad del
mismo.
Apertura numrica
A partir de las observaciones precedentes, nace la definicin de
(AN), cifra a considerar para determinar el rendimiento de una
lente objetivo :

AN = n x sen
Donde = la mitad del ngulo de apertura del objetivo.
n = el ndice de refraccin del medio que se encuentra entre el
objeto y el objetivo.
(Para el aire n = 1 y para el vidrio o aceite n = 1.51)
Incrementar la resolucin

Otra manera de incrementar la

resolucin es creando, del lado
de la fuente luminosa, un cono
amplio con un ngulo mayor.
Para ello se emplea otro juego
de lentes denominado
condensador el cual posee la
misma apertura numrica que
el objetivo.

El objeto (1) es iluminado con un rayo de luz (2) que formar un cono luminoso
frente al objetivo. Se coloc otra lente (4) que recoge y condensa la luz antes que
ilumine al objeto.
Lquido entre la lmina
Para aumentar an ms la
resolucin, adems de agregar un
condensador, otra posibilidad es
colocar algn lquido entre la lmina
cubre objeto y el objetivo. Se ha
obtenido buenos resultados con
ciertos aceites (aceite de cedro) cuyo
ndice de refraccin es igual al del
vidrio cubre objeto, eliminando toda
reflexin de los rayos luminosos
A la izquierda el espacio entre el cubre objeto (5) y el objetivo (3) es ocupado por el
aire; a la derecha el espacio es ocupado por un lquido de inmersin (6). Aprciese
que el cono de luz y el ngulo a son mayores con inmersin.
El poder de resolucin

El poder de resolucin de un microscopio compuesto de

campo claro puede ser calculado de manera razonable
mediante la frmula :

Donde delta= resolucin expresada en micrmetros.

lambda = longitud de onda de la luz empleada.
AN= Apertura numrica.
Factores que limitan la resolucin en un sistema de
formacin de imgenes.
Los sistemas pticos y
habitualmente los microscopios
pueden presentar errores que
producen distorsin de las imgenes.
Son producidos mediante varios
mecanismos, ya sea por el
comportamiento de la luz al incidir
sobre el objeto en estudio o ya sea
por defectos propios de las lentes.

. Estos defectos son comnmente conocidos como

aberraciones.
Algunos resultan de la esfericidad de la superficie de la lente
y son derivados de la interaccin de la luz con dicha
superficie. Estos defectos producen alteraciones de los
detalles de las imgenes y se pueden presentar combinados.
En la actualidad, con el uso de tcnicas de manufactura
moderna que han permitido la elaboracin de lentes ms
efectivas, se ha logrado corregirlos en gran medida
Difraccin
El trmino difraccin viene del latn diffractus que significa
quebrado. La difraccin es el fenmeno que se observa cuando
la luz, al pasar por el extremo de una superficie se "dobla"
desviandose del trayecto y no sigue su propagacin en lnea
recta.

Cuando la luz pasa por una rendija, no sigue su trayecto en

lnea recta, se dobla, en otras palabras, se difracta
 Expansin de la luz
En la trans-iluminacin del objeto,
las ondas luminosas encuentran
obstculos en su trayecto, lo que
produce una expansin de la luz
por la difraccin y se obtiene una
imagen borrosa que limita la
capacidad de aumento til de un
microscopio. Por ejemplo, los
detalles menores de media
milsima de milmetro (0,5 m) no
pueden verse en la mayora de los
microscopios pticos.
Discos de Airy y resolucin. (a,b,c) tamao de los discos y su perfil de intensidad, que
decrece de (a) hasta (c) relacionados con la apertura numrica a medida que
aumenta. (d) dos discos de Airy superpuestos y (e) discos de Airy en el lmite de
resolucin.
 Aberraciones
De esfericidad, relacionadas con la forma esfrica de la
lente: Se producen por falta de convergencia de las ondas
luminosas que pasan por la periferia de la lente cuando no
son enfocadas en el mismo punto que aquellas ondas que
pasan por el centro, las cuales son refractadas ligeramente;
mientras que las que inciden en la periferia son refractadas en
mayor grado y convergen en diferentes puntos focales.

Aberracin de esfericidad. Los rayos que inciden paralelamente al eje principal no

convergen todos en un mismo punto. Los rayos de la periferia convergen ms cerca de
la lente
 Cromticas, relacionadas con las variaciones en los ndices
de refraccin de las diversas frecuencias (colores) que
conforman la luz blanca visible: Cuando la luz blanca
atraviesa una lente, las diferentes frecuencias son
refractadas de acuerdo a su frecuencia.
La incapacidad de la lente de reunir nuevamente los rayos
refractados en un punto focal comn resulta en una discreta
diferencia en el tamao del objeto y en franjas de colores
rodeando la imagen.

Aberracin cromtica. La luz blanca se descompone al atravezar la lente y las

diversas longitudes de onda convergen en varios puntos focales diferentes
MICROSCOPIO METALOGRAFICO
REFRACCIN Y REFLEXIN
Refraccin es el fenmeno por el cual un rayo de luz cambia su
direccin de propagacin al pasar oblicuamente de un medio a
otro. Reflexin es el fenmeno por el cual un rayo de luz
cambia su direccin de propagacin al incidir sobre una
superficie de separacin de dos medios sin poder atravesarla.