PROKARIOTIK NURSYAHBANI SARAHA Tahap pertama dalam ekpresi gen adalah transkripsi yang melibatkan transfer informasi di dalam gen ke mRNA intermediet. mRNA ini membawa informasi genetik yang akan disintesis di dalam sitoplasma.
Pada organisme prokariotik, mRNA yang
dihasilkan dari proses transkripsi tidak terjadi modifikasi pasca transkripsi sehingga mRNA yang dihasilkan akan langsung masuk pada tahap translasi. Struktur ribosom pada E.coli
Situs A atau aminoasil-tRNA ditempati oleh alanyl-tRNAAla.
Situs P atau peptidil ditempati oleh fenilalanyl-tRNAPhe, Situs E atau exit ditempati oleh tRNAGly sebelum diluncurkan dari ribosom.
Situs A atau aminoasil mengikat aminoasil-tRNA yang masuk,
untuk ditambahkan ke rantai polipeptida yang tumbuh. Situs P atau peptidil mengikat tRNA dimana polipeptida yang tumbuh menempel. Situs E atau exit mengikat tRNA bermuatan kosong. TAHAP INISIASI Pada tahap ini melibatkan subunit 30S dari ribosom, inisiator tRNA khusus, molekul mRNA, faktor inisiasi yaitu, IF-1, IF-,2 dan IF-3, dan 1 molekul GTP. ribosom 70S akan terpisah menjadi subunit 30S dan 50S saat sintesis polipeptida sudah lengkap. Pada tahap ini, subunit 30S bebas akan berinteraksi dengan mRNA dan faktor inisiasi. Subunit 50S kemudian bergabung untuk melengkapi pembentukan ribosom 70S pada tahap akhir proses inisisasi. TAHAP INISIASI TAHAP ELONGASI 1. Pengikatan aminoacyl-tRNA pada sisi A dari tRNA Aminoacyl-tRNA masuk dan berikatan dengan sisi A ribosom agar kodon mRNA dapat masuk pada sisi A yang nantinya akan berikatan dengan tiga nukleotida pada antikodon aminoacyl- tRNA. pada tahap ini diperlukan faktor Tu elongasi yang membawa molekul GTP (EF-Tu_GTP). 2. Transfer pemanjangan polipeptida dari sisi P tRNAke sisi A tRNA melalui pembentkan ikatan peptide baru. Pembentukan ikatan peptide diantara gugus amino pada aminoacyl-tRNA ,Reaksi ini dikatalis oleh peptidil transferase (enzim yang membentuk subunit ribosom 50S).
3. Translokasi ribosom sepanjang mRNA ke posisi kodon
selanjutnya. ribosom mengalami perubahan dalam konformasi selama proses translokasi. Energy untuk pergerakan ribosom diperoleh dari hidrolisis GTP. Ketiga tahap ini dilakukan secara berulang-ulang selama tahap elongasi TAHAP ELONGASI TAHAP TERMINASI
ketika kodon terminasi (UAA, UAG, atau UGA)
masuk pada sisi A ribosom. Ketiga kodon stop ini dikenali oleh protein release factors (RFs). RF-1 mengenali kodon terminasi UAA dan UAG, RF-2 mengenali kodon terminasi UAA dan UGA. Reaksi ini melapaskan polipeptida dari molekul tRNA pada sisi P dan memacu terjadinya translokasi dari tRNA bebas ke sisi E. Terminasi dilengkapi oleh lepasnya molekul mRNA dari ribosom dan pemisahan ribosom menjadi masing- masing subunitnya.