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BIOREACTORES

Microbiologa industrial
I.- BIOREACTOR
Recipiente en el que se lleva a cabo una transformacin qumica, con
intervencin de un biocatalizador.
En estos recipientes se crean condiciones ambientales propicias
(temperatura, pH, aireacin etc.) para que los agentes biolgicos puedan
desarrollarse, y producir las mximas cantidades del producto deseado.

Es el componente principal de un bioproceso.

Por lo general se busca conocer el tamao y tipo de reactor, as como el


mtodo de operacin.
II.- FACTORES DE EFICIENCIA

La eficiencia de un reactor (aparte de las consideraciones bioqumicas)


esta determinada por las limitaciones de transferencia de oxgeno, de
cantidad de movimiento, y de calor.
Se pueden expresar como:
Factor de transferencia de oxigeno Kla.
Factor del efecto cortante.
Factor de transferencia de calor
2.1.- Factor de transferencia de oxigeno (Kla)
El O2 tiene baja solubilidad en agua (7 mg/l, a 35C) y los microorganismos solo utilizan O2 disuelto.
Se debe transferir O2 desde la fase gaseosa (burbuja de aire) a la fase lquida permanentemente.

1- Difusin del seno del gas a la interfase gas-lquido.


2- Movimiento a travs de la interfase G-L
3- Transporte convectivo en el seno del lquido
4- Difusin a travs de la interfase L-S.
5- Transporte a travs de la membrana
6- Difusin intracelular hacia el sitio de la reaccin qumica
7- Transporte y reaccin qumica
Transferencia G-L . Modelo de la pelcula
Macroscpicamente, la transferencia de O2 puede explicarse por:

Transferencia de Oxigeno:
RO2 = dCL / dt = KLa (C* -CL)
RO2 o Na: es la velocidad de transferencia de O2, (Kmol/m2.s)
a, es el rea superficial de las burbujas/unidad de volumen (m2/m3).
Kla, es el coeficiente volumtrico de transferencia de O2, que incorpora el valor del rea
superficial de las burbujas. [h-1]
C* es la concentracin de O2 en la fase gaseosa (Kmol/m3)
CL, concentracin de oxigeno en el seno del liquido (Kmol/m3). CL en el lquido aumenta
hasta alcanzar el valor de C*.
La transferencia de oxigeno depende de dos factores:
- Kla (que a su vez depende de la agitacin, temperatura, viscosidad, presencia de
tensioactivos).
- Diferencia de concentraciones de oxigeno C*-CL (depende de la demanda y la
alimentacin de aire).

La transferencia de O2 hacia el seno del lquido se anula cuando C*=CL.


TRANSFERENCIA (RO2) - DEMANDA (rO2)

Demanda de Oxigeno (Velocidad de consumo de oxigeno -OUR, oxygen uptake


rate):
rO2= dCL/dt = X. qO2
Donde:
qO2 depende de la concentracin de oxigeno disuelto, la edad del cultivo, fase de
crecimiento (qO2 es mxima cuando es mxima, es decir durante la fase
exponencial), tipo de cultivo, etc.

La transferencia debe ser mayor que la demanda para evitar limitacin de


oxigeno.
Cmo seleccionar el KLa apropiado?

Valores de KLa.
La medida de transferencia de O2 es el KLa (coeficiente volumtrico de
transferencia de oxgeno)
- El tipo de clula: las bacterias, hongos, clulas animales crecen a distinta , por
lo tanto tendrn distintas qO2

Tipo celular Xf (g/l) (h-1) KLa (h-1) Tipo de reactor

Animal 0.5 0.01-0.04 1-25 Tubo ensayo


inmvil
Vegetal 10-15 0.007-0.03 20-30 Tubo-erlen

Levadura 10-30 0.2-0.6 100-1000 Erlen-reactor


Hongo
bacteria 10-20 0.6-1.4 100-1000 Erlen-reactor
Determinacin del KLa.

La determinacin experimental se puede hacer en reactores continuos, en


rgimen estacionario, midiendo la concentracin de oxigeno gaseoso en la
entrada y en la salida, del reactor.
Se puede realizar utilizando los siguientes mtodos:
Oxidacin de sulfito.
Tcnica de eliminacin de gas
Balance de oxigeno en el sistema
Tcnica dinmica. (Erazo y Crdenas, 2001)
Mtodo del sulfito:
El mtodo se basa en la reaccin del sulfito de sodio con O2 en medio
ligeramente alcalino y en presencia de iones Cu+2 o Co+2, para hacer la reaccin
casi instantnea.
As la velocidad de consumo del sulfito, depende de la velocidad a la cual el
oxgeno es transferido desde la fase gaseosa.
2 Na2SO3 +O2 Na2SO4

El mtodo es simple, pero como la reaccin es muy rpida, el gradiente


alrededor de la burbuja se altera y los resultados que se obtienen son
sobredimencionados.
La velocidad de la reaccin puede representarse segn la ecuacin:

donde k es la constante de velocidad y m y n son coeficientes que deben


determinarse experimentalmente y representan al orden de la reaccin para
sulfito y oxigeno respectivamente.
Las ecuaciones que representan al balance de materia para el O2 y el
Na2SO3 son las siguientes:

donde VL es el volumen del reactor, CA y CB son las concentraciones de O2


disuelto y sulfito en el medio, CAF y CBF son las concentraciones de O2 y sulfito
en la alimentacin, Q es el caudal de alimentacin,
Cuando se alcanza el estado estacionario el termino de consumo qumico
puede eliminarse de las ecuaciones anteriores sustrayndolas y se obtiene la
ecuacin que permite calcular el KLa:

En las condiciones de operacin, la concentracin remanente de sulfito en el


medio, la concentracin de O2 en la alimentacin y en el reactor son
despreciables frente a la concentracin de sulfito en la alimentacin con lo que
la ecuacin puede reducirse a:
2.2.- Estrs hidrodinmico
El estrs hidrodinmico determina el dao celular, ocasionado por el efecto de
corte en bioreactores agitados y aireados.

La fuerza por unidad de rea aplicada en forma paralela a la superficie de cada


partcula biolgica (cizallamiento), puede definirse como esfuerzo de corte o
shear stress ().
Este es proporcional a la diferencia de las velocidades (dv) entre las lneas de
flujo superior e inferior, dividido por la pequea distancia entre las lneas de flujo
(dv/dy).
La constante de proporcionalidad es la viscosidad ().
Esta ecuacin se cumple siempre y cuando la viscosidad sea constante, sin
importar la velocidad de deformacin a la que es sometido el fluido, y esto se
cumple en fluidos newtonianos. (Trujillo y Valdez, 2006)
Dao celular y su cuantificacin
Un cultivo celular puede presentar dos tipos de dao:
a) un dao letal que provoca la muerte por necrosis (lisis celular) o
apoptosis (proceso de muerte programada) en las clulas, o
b) daos subletales que se manifiestan en alteraciones metablicas en los
cultivos.
Las clulas vegetales y animales son mas susceptibles al efecto de corte.
Cuando existen slo efectos subletales, hay mecanismos de respuesta al
estrs hidrodinmico, o hacia el estrs oxidativo, que afectan las velocidades de
crecimiento, produccin y de consumo de nutrientes y los rendimientos celulares
y de productos. (Trujillo y Valdez, 2006)
Determinacion del shear stress
Para cada tipo de cultivo debe determinarse del valor de .
Hay algunos valores para clulas especificas.
As por ejemplo, en cultivos de Escherichia coli a altos valores de energa
de disipacin (1.0 KW/kg, valor tpico en un biorreactor industrial), E. coli no
refleja cambios morfolgicos ni metablicos.
Adems, en cultivos con valores de energa de disipacin de 30 KW/kg (que
se alcanza a aproximadamente 1,200 rpm en un fermentador de laboratorio,
usando turbinas tipo Rushton), los resultados fueron similares a aquellos
cultivos llevados a cabo a 1.0 KW/kg.
Estos valores de energa de disipacin corresponden a tamaos del eddie
de micro-escala de 30 y 13.5 m, respectivamente (suponiendo medios de
cultivo con viscosidades cinemticas cercanas a la del agua).
2.3.- Generacin de calor por crecimiento microbiano

4050% de la energa
suministrada por las
fuentes de C se convierten
en ATP (forma en que las
clulas acumulan energa),
el resto se libera como
calor.
YH, es el coeficiente de
eficiencia energtica.
El calor liberado se puede
calcular a partir de las
entalpas de combustin
del sustrato Hs y de la
biomasa formada Hc, que
se relacionan por: Despejando se tiene:
Algunos valores tpicos:
Hc ~ 20 25 kJ/g clulas
YH ~0,42 g/kcal (glucosa); 0,30 g/kcal (malato); 0,18 g/kcal (etanol); 0,12 g/kcal
(metanol); 0,061 g/kcal (metano)
El grado de oxidacin del sustrato afecta fuertemente la cantidad de calor
liberado por el metabolismo de las clulas.
Para clulas en crecimiento activo, el requerimiento para mantenimiento es
bajo
La velocidad total de generacin de calor (Qgenerado) en una fermentacin
batch se calcula considerando la velocidad de crecimiento.

En una fermentacin aerobia, se correlaciona con la velocidad de consumo de


oxgeno, dado que es el aceptor final de electrones.
Efecto de los factores en el reactor:

Es necesario ajustar algunos parmetros :


tensin de oxgeno
dixido de carbono
pH
Agitacin y mezclado
densidad del cultivo
III.- CRITERIOS DE CONSTRUCCION
El biorreactor ideal debe:
Mantener las clulas uniformemente distribuidas en el volumen de cultivo.
Mantener constante y homognea la temperatura (sistemas de control de la
temperatura y de distribucin del calor)
Minimizar los gradientes de concentracin de nutrientes (sistema de
mezclado)
Mantener un ambiente asptico (sistemas de esterilizacin y aislamiento)
Maximizar el rendimiento y la produccin (control del tiempo de retencin)
Minimizar el gasto y los costos de produccin (mnimos costos energticos y
de operacin)
IV.- CRITERIOS DE OPERACIN
Son muy importantes: esterilizacin y control del proceso.

a.- Esterilizacin.
La necesidad de esterilidad en un bioreactor, est en relacin con el valor del
producto.
En el campo medio ambiental, generalmente no se requiere esterilizacin, pero
en el campo alimentario es indispensable.

La esterilizacin en un bioreactor permite asegurar:


Que slo el producto deseado este presente en sistema.
Proteger el producto durante el proceso
Proteger el producto despus del proceso
El tipo de esterilizacin ms frecuente es usando calor hmedo (vapor de agua)
Una adecuada esterilizacin se logra con adecuados valores de los factores
biolgicos, como: D y F.
La probabilidad de contaminacin en un cultivo mesfilo es mayor que en un
cultivo termfilo, en un medio con pH aproximado a 7, que a pH cido, y en los
proceso aerobios, que en los anaerobios.
Durante un bioproceso para garantizar la esterilidad, debe considerarse:
- Esterilidad del medio de cultivo: el medio nutritivo inicial contiene clulas
derivadas del medio, que han de ser eliminadas antes de ser inoculado.
- Esterilizacin del aire que fluye: considerando que generalmente requieren
agitacin, el aire que entra ha de ser estril.
- Construccin apropiada del biorreactor, para prevenir la contaminacin.

Con ese fin se selecciona el agente biocida mas adecuado a cada caso.
b.- Control por Automatizacin

Se debe llevar control de:


La concentracin del sustrato, oxigeno (de ser el caso) y los niveles de
biomasa.
Las condiciones ambientales del biorreactor tales como flujo de gases
(por ejemplo, oxgeno, nitrgeno, dixido de carbono, etc.), temperatura,
pH, oxgeno disuelto y velocidad de agitacin, deben ser cuidadosamente
monitoreadas y controladas.
La mayora de los fabricantes industriales de biorreactores usan recipientes,
sensores y controladores interconectados por un sistema PLC.
Configuracin tpica de un
b.1.- Control de biomasa biorreactor de turbidostato
El control de la concentracin de
biomasa en el bioreactor determina la
productividad del mismo. Se puede usar
con ese fin el sistema de quimiostato o
de turbidostato.
Turbidostato. La concentracin de
clulas en el reactor se mantiene
constante.
La alimentacin se regula mediante el
monitoreo de la densidad ptica del
cultivo.
Se alimenta medio fresco cuando la
turbidez supera un lmite prefijado. El
volumen se mantiene constante retirando
una cantidad de fluido equivalente a la
que se agrega.
Configuracin de un
quimiostato continuo

Quimiostato: el crecimiento
de biomasa suele estar
controlado por un nutriente
esencial y el resto se agrega
en exceso.
b.2.- Control de pH.
El pH del medio varia por los productos del metabolismo microbiano.
Un sistema de control de acidez consta de:
Subsistemas
dispensadores. de cido,
i/o de lcali.
Sistema de medicin:
formado por: Sensor de pH
que mide la acidez e informa
al controlador de pH, la
situacin del medio.
Sistema de control
formado por un Controlador
de pH: ordena y regula la
accin del motor que
controla a las bombas
peristlticas que suministran
el cido y el lcali.
b.3. Control de temperatura
Puede ser por enfriamiento o calentamiento.
Sistemas de intercambio de calor: serpentn, o chaqueta
externa
La transferencia de calor por conduccin a travs de la
pared, puede ser descrito por:
Q = UA T
Donde Q es la cantidad de flujo de calor, T la
diferencia de temperatura a travs de la pared, A el rea
de la pared, y U es el coeficiente de transferencia.

Instrumentacion:
Sensor de temperatura: sonda que mide la temperatura.
Vlvula Solenoide: mecanismo que regula el flujo de
lquido por la tubera o lnea de paso.
Un sistema de control de Temperatura, que regula la
accin del motor de las vlvulas que regulan el flujo de
lquido fro o caliente.
b.4.- Agitacin
Para lograr la agitacin deseada se calcula la potencia del motor, para ello se
determina el nmero de Reynolds (NRe), el nmero de potencia para los
impulsores (Np) y la potencia del motor en Hp.
El nmero de Reynolds se calcula con la ecuacin:

NRe = Nmero de Reynolds [adimensional]


d = dimetro del impulsor
N = Velocidad nominal del motor
= Densidad de la mezcla dentro del reactor
= Viscosidad de la mezcla dentro del reactor (Flores Hernandez et al)

El clculo de la potencia consumida se hace a travs de nmeros


adimensionales, relacionando por medio de grficos el nmero de Reynolds y el
Nmero de Potencia.
NP= N Potencia
N P C ( N Re ) X
( N Fr ) Y

NFr= N de Froude
La variacin de Np con el Res, se observa en la figura. El flujo en un reactor tanque agitado
es turbulento, para un Res > 104.
En rgimen de flujo laminar, Res < 10, las fuerzas viscosas dominan y la disipacin de la
potencia depender del Res.
b.5.- Sistema de aire
Filtros de Aire: para sistemas pequeos, se
utilizan filtros en lnea con membrana
microporo que filtran el 99,99% de los
contaminantes. Para sistemas industriales
generalmente se hace calentando
fuertemente la lnea de aire y luego enfriarla.
Difusor de Aire: los cultivos aerbicos
requieren que el aire estril se difunda en
forma de miles de pequeas burbujas, desde
el difusor de aire, hacia el volumen del lquido;
esta accin se realiza mediante platos
finamente perforados.
El sistema consta de: partes mecnicas;
boquilla i/o difusor de aire, as como: sensor
de oxgeno disuelto y controlador.
IV.- TIPOS DE REACTORES
1- Por el tipo de operacin (continuos, semicontinuos, discontinuos).
2.- Por su forma y tipo de agitacin.
Agitacin mecnica: Reactor de tanque agitado.
Agitacin neumtica: Reactor de columna con burbujas, reactor Air Lift)
3- De acuerdo a las fases: homogneos o heterogneos
4- Biorreactores especiales: de estado slido y foto-biorreactores
4.1- Bioreactores por el tipo de operacin
Existen tres modos de cultivo aunados a tres modos bsicos de operacin:
Discontinuo (batch): por lotes o tandas; se coloca dentro del biorreactor la
carga total de cada proceso (tanda o lote) y se deja llevar a cabo la
fermentacin por el tiempo que sea necesario.
Semicontinuo (fed-batch): por lotes alimentados; se alimenta una lnea de
entrada para que el sistema de cultivo tenga un producto (biomasa) con mximo
de crecimiento (exponencial) y aumente la productividad.
Continuo (continuos): por quimioestato, se alimenta una lnea de entrada o
alimentacin y se drena una lnea de salida; de manera que los flujos o
caudales de ambas lneas sean iguales y la produccin sea continua.
Reactores discontinuos (Batch)
Es un reactor donde no existe flujo de entrada ni de salida, es un
tanque en el que se permite que ocurra una reaccion.
Ejemplos: reactor para produccin de chicha, cerveza, yogurt,
tratamiento de aguas residuales, etc.

Reactores biolgicos secuenciales (SBR): para el tratamiento de


aguas residuales.
Los SBR son reactores discontinuos en los que el agua residual se
mezcla con un lodo biolgico en un medio aereado.
El proceso combina en un mismo tanque reaccin, aeracin y
clarificacin.
Otras ventajas de los SBR son la facilidad para el control de la
operacin, la buena flexibilidad ante fluctuaciones de caudal y
concentracin de las aguas residuales, y capacidad de degradar
compuestos refractarios.
Un reactor SBR es un sistema de crecimiento suspendido en el que
el agua residual se mezcla con un lodo biolgico existente en un
medio aereado.
En un mismo tanque se combina: reaccin, aeracin y clarificacin.
El sistema SBR consta de, al menos,
cuatro procesos cclicos: llenado, reaccin,
decantacin y vaciado, tanto de efluente
como de biomasa.
En la primera fase, (llenado esttico),
ingresa el agua residual al sistema bajo
condiciones estticas.
En la segunda fase (reaccin) se inyecta
aire al sistema. El agua residual es
continuamente mezclada y aereada,
permitiendo que se produzca el proceso de
degradacin biolgica.
El tercer paso, (decantacin), genera
condiciones de reposo en todo el tanque
para que los lodos puedan decantar.
En la ltima fase, o fase de vaciado, el
agua tratada es retirada del tanque
mediante un sistema de eliminacin de
sobrenadante superficial.
Finalmente, se puede purgar el lodo
generado para mantener constante la
concentracin de ste.
Generalmente, un sistema SBR trabaja con un tiempo de retencin hidrulico
de 1 a 10 d y un tiempo de retencin celular de 10 a 15 d.
La concentracin de slidos en suspensin del licor mezcla (SSLM) se suele
mantener entre 1.500 y 5.000 mg/L.
Ventajas:
- Bajo requerimiento de espacio, debido a que se requiere un solo tanque para
realizar todo el proceso.
- Menor costo que sistemas convencionales de tratamiento biolgico, debido a
menor necesidad de terreno y la simplicidad de los equipos.
- Mejor control del crecimiento de organismos filamentosos y de problemas de
decantacin.
- Permite eliminacin N y P, por un proceso completo de nitrificacin
desnitrificacin, as como para la eliminacin de fsforo.
- Versatilidad para trabajar con fluctuaciones de caudal y de concentracin de
materia orgnica.
- Capacidad para la adaptacin de los microorganismos a efluentes con
elevado contenido en sales.
4.1- Por su forma y tipo de agitacin
a.- Biorreactor de tanque agitado
Reactor continuo de tanque agitado RCTA, o
CSTR.
El aire ingresa al biorreactor por debajo del
agitador y las paletas rompen las burbujas en
pequeas burbujas.
La presencia de deflectores impide la formacin
de vrtice. De este modo las burbujas no
ascienden directamente hacia la superficie y
aumenta el tiempo de retencin de las burbujas,
aumentando la transferencia de O2.
Requieren alto consumo de energa.
En los bioreactores altos se instalan varios
rodetes para mejorar la mezcla.
Tienen alto efecto cortante, y pueden daar las
clulas, principalmente en el cultivo de clulas
animales o vegetales.
Aplicaciones
En la produccin industrial de etanol combustible, por reactores continuos (Paz,
2010)
En fermentaciones continuas alimentadas con altas concentraciones de sustrato
(entre 134 y 295 Kg/m3) se presentan grandes variaciones en las
concentraciones de biomasa.
Esto puede generar mas de un estado estacionario y oscilacin de diferentes
variables de proceso.
En algunos casos, estos comportamientos causan que la concentracin de
biomasa y la viabilidad de las clulas se reduzcan en ms de un 50%, o reducen
la productividad del proceso.
La velocidad de dilucin y la concentracin de sustrato en la alimentacin,
influyen sobre el comportamiento esttico y dinmico de los fermentadores
continuos de tanque agitado.
Para bajas concentraciones de sustrato en la alimentacin, prevalece solo un
estado estacionario; sin embargo, para altas concentraciones de glucosa
alimentada, pueden aparecer mltiples estados estacionarios sobre un rango
relativamente amplio de velocidades de dilucin. (Paz, 2010)
Desventaja: alto valor del Shear stress
b.- Reactores de columna con aireacin
Para grandes volmenes (mayor a 1000 L) el reactor agitado
no es eficiente.
El mayor volumen de cultivo, genera mas calor y los
intercambiadores de calor de camisa son insuficiente, es
necesario aumentar el rea y eficiencia de transferencia de
calor.
En estos reactores, la aireacin y la mezcla se logran con la
inyeccin de gas, con menos gasto de energa que la
agitacin mecnica.
Su estructura es muy sencilla. Consiste de un recipiente
cilndrico con alturas superiores al doble del dimetro, hasta
arelaciones 6:1, con solo difusores para la inyeccin del aire
comprimido.
Se utilizan industrialmente para la produccin de levadura
panera, cerveza y vinagre, y tratamiento de aguas residuales.
En los reactores de columna muy altos se pueden instalar
placas horizontales perforadas para evitar la coalescencia de
las burbujas y lograr una mejor redistribucin del aire.
c.- Bioreactor Air Lift. (de corriente de aire BAL)
Tienen niveles de cizalla menores, por
eso se utilizan a menudo para cultivos
de clulas animales y vegetales, y
catalizadores inmovilizados.
El gas es inyectado nicamente en
una parte de la seccin del reactor
denominado riser, donde produce un
movimiento ascendente del lquido. El
gas se retira del lquido en la parte
superior del reactor dejando el lquido
ms pesado libre de burbujas que se
recircula a travs del downcomer.
El lquido circula en los reactores BAL
como resultado de la diferencia de
densidad entre elriser y el
downcomer.
Aplicaciones.

Existen dos configuraciones


bsicas de los BAL:
circulacin externa y
circulacin interna.
El BAL con circulacin externa
presenta al menos un loop o
brazo de descenso con un
dimetro generalmente menor
que el del cuerpo principal del
biorreactor, por otro lado el de
circulacin interna posee un
tubo concntrico que separa
el cuerpo principal del
biorreactor. (Lizardi, 2011)

Reactores Air-flit para algas


Aplicaciones
En la biodegradacin de hidrocarburos, por
Xanthomonas sp, Acinetobacter bouvetii, Shewanella
sp y Defluvibacter lusatiensis, donde, algunas cepas
poseen capacidad para degradar hidrocarburos y otras
la capacidad de producir biosurfactantes.
El hexadecano (HXD) es un sustrato de baja
solubilidad en agua (~10-7 mg L-1), pero una vez
biodisponible, el HXD es una fuente de carbono y
energa para diversos microorganismos. (Lizardi, 2011)
La ruta comienza con la oxidacin del grupo terminal
metilo del alcano hasta formar un alcohol, mediado por
las enzimas: monooxigenasas y dioxigenasas
posteriormente los alcoholes son oxidados a sus
cidos grasos correspondientes que a su vez son
utilizados en la ruta catablica de la -oxidacin.
En los biorreactores se crean sistemas trifsicos gas-
lquido-lquido, con una fase gaseosa que
generalmente es aire y dos fases lquidas, donde
sucede la degradacin aerobia de hidrocarburos.
(Lizardi, 2011)
4.2- Biorreactores de acuerdo a las fases:

Biorreactores homogeneos: las clulas (o enzimas) permanecen en


suspensin en el medio de cultivo durante todo el proceso: De lecho
fluidizado con clulas inmovilizadas en suspensin

Biorreactores heterogeneos: las clulas (o enzimas) estn unidas a


una fase solida (inmovilizadas) en contacto con el medio de cultivo.
De lecho fijo (de lecho empaquetado, de membrana, de fibra hueca,
de goteo, etc)
a.- Lechos fluidizados
Cuando se hace fluir hacia arriba un
lquido sobre un lecho de partculas de
catalizador de tamao y densidad
apropiados, el lecho se expande
debido al movimiento ascendente de
las partculas.
Pueden utilizarse con organismos
floculantes en los procesos de
fabricacin de la cerveza, en la
produccin de vinagre, en tratamiento
de aguas residuales por UASB.
Aplicacin 1: Reactor UASB para aguas residuales
UASB (Upflow Anaerobic Sludge Blanket- de Flujo
ascendente y manto de lodos), tambin conocido como
RAFA (Reactor anaerobio de flujo ascendente) es un
biorreactor tubular continuo y con flujo ascendente.
El agua residual pasa a una baja velocidad
ascensional, a travs de un manto de lodos
suspendidos, compuesto de grnulos de
microorganismos agrupados.
En la parte superior hay un sistema de separacin gas-
slido-lquido, que permite la salida del gas.
Los slidos caen debido a su peso hasta el manto de
lodos, los grnulos mas pesados caen al fondo (1-3%)
Operan con Carga orgnica de 5-30 Kg DQO/m3d
Se consigue una alta concentracin de biomasa dentro
del reactor con una elevada velocidad de degradacin
de materia orgnica.
Lodo granular anaerbico
Segn la teora del spaguetti, de W.
Wiegant, los filamentos de Methanosaeta
se agregan enmarandose, formando los
primeros pellets bolas de spaguetti.
Estos agregados sirven de superficie de
anclaje o soporte para otros
microorganismos involucrados en el
proceso de degradacin anaerobia.
Debido al gran tamao de partcula (de
0.5 a 2 mm), los grnulos resisten el
lavado del sistema.
La eficiencia en remocin de DBO y DQO:
de 60 a 80%, en reactores mesoflicos,
llega 90%.

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Dimensionamiento:
Carga hidrulica volumtrica: CHV = Q/V = 1/TRH, CHV < 5 m3/m3.d (TRH>4.8 hs)
Con: CHV = carga hidrulica volumtrica (m3 /m3.d)
Q = caudal afluente (m3/d)
V = volumen del reactor (m3)
TRH = tiempo de retencin hidrulico (d)
Carga orgnica volumtrica: COV = Q.S/V, COV < 15 kgDQO/m3.d
Donde:COV = carga orgnica volumtrica (kgDQO/m3.d)
Q = caudal afluente (m3/d)
S = concentracin de sustrato afluente (kgDQO/m3)
V = volumen del reactor (m3)
Carga biolgica (carga de lodo): CB = Q.S/M
Con: CB = carga biolgica (kgDQO/kgSSV.d)
Q = caudal afluente (m3/d)
S = concentracin de sustrato afluente (kgDQO/m3)
M = masa de microorg. en el reactor (kgSSV/m3)
En la partida el UASB la CB es baja, del orden de 0.05-0.15 kgDQO/kgSSV.d, e ir
aumentando hasta alcanzar valores de CB = 2 kgDQO/kgSSV.d
Velocidad superficial del flujo: v = Q/A = H/TRH
Con: v = velocidad ascencional (m/h); A = rea superficial (m2); H = altura del reactor (m)
Para lquidos domsticos, la velocidad varia con el caudal:

Q v (m/h)
medio 0.5-0.7
mximo 0.9-1.1
pico < 1.5

Distribucin del afluente:


Se debe distribuir el sustrato afluente en forma uniforme en la parte inferior del reactor,
evitando cortocircuitos a travs de la capa inferior de lodo.
Esto es fundamental cuando se tratan lquidos domsticos o la temperatura de
operacin es baja ya que la produccin de gas no es suficiente como para lograr la
mezcla adecuada.
El sistema se disea a partir de un canal de distribucin ubicado en la parte superior,
que distribuye el afluente a travs de tubos que descargan el lquido en la zona inferior
del reactor.
Sistema de distribucin del influente

Diseo mejorado

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Aplicacin 2: Reactor de carga secuencial RCS: ICEAS
Los reactores por carga secuencial, es una variante del proceso de lodos activados, y su
funcionamiento es secuencial, utilizando un nico reactor.

Las fases son: llenado, reaccin, clarificacin, descarga (o decantacin) y reposo (opcional)
(Ferrara, 2008)
La ventaja de los RCS es que pueden asimilar variaciones de cantidad y calidad del afluente con
poca probabilidad de fallar (Rittmann y MacCarty, 2001).
Fase de llenado. Ingresa el agua residual (sustrato), al reactor donde existe lodo
activo sedimentado del ciclo previo; la entrada de energa al sistema puede ser por:
a) llenado esttico, sin ninguna entrada de energa al sistema permitiendo solo la
acumulacin de sustrato en el tanque;
b) llenado con mezcla, pero sin aireacin forzada, lo cual permite una mnima actividad
aerbica y se llevan a cabo reacciones anxicas o anaerbicas;
c) llenado con aireacin, lo cual permite mezcla con aireacin forzada.

El tiempo de llenado determina las caractersticas hidrulicas del biorreactor.


Si el tiempo es corto, el proceso es equivalente a un sistema continuo con una
configuracin de tanques en serie, lo cual a su vez es anlogo a un flujo pistn PFR. En
tal caso la biomasa se expone inicialmente a altas concentraciones de sustrato, que
disminuye con el tiempo.
Si el tiempo de llenado es largo, el comportamiento del sistema es similar a uno de
flujo continuo completamente mezclado CSTR donde la biomasa es sometida a
concentraciones bajas y relativamente constantes de los constituyentes del lquido
residual.
La fase de reaccin sigue secuencialmente a la fase de llenado y en ella los
microorganismos degradan la carga orgnica.
Se pueden seguir varias estrategias: reaccin con mezcla pero sin aireacin
forzada; y reaccin con aireacion forzada.
Los perodos de llenado y de reaccin se escogen segn los objetivos del
tratamiento.
Si ambos perodos (llenado y reaccin) son aerbicos ocurrir oxidacin de
carbono y adicionalmente nitrificacin por la extensin de la aireacin.
Sin aireacin, y con mezcla permite la desnitrificacin (si estuviera presente
nitrato).
Si el nitrato es generado por nitrificacin durante el perodo de reaccin y
permanece retenido en el biorreactor al finalizar la descarga y en una etapa
temprana de llenado en el siguiente ciclo, se planifica mezcla sin aireacin.
La fase de clarificacin se provoca la sedimentacin bajo condiciones de
quietud, sin aireacion (Metcalf & Eddy, 1991).
La fase de descarga o decantacin, permite extraer el agua clarificada del reactor
hasta un cierto nivel del mismo, permitiendo que en el tanque quede biomasa
sedimentada que constituye los lodos activados disponibles para tratar la siguiente
carga que llegar al tanque.
Cuando se requiere desnitrificar, el volumen de lodo retenido debe ser grande, para
proveer el nitrato que ser desnitrificado.
Formando parte de la operacin debe considerarse la purga o descarga del exceso de
los lodos. Para efectos de controlar el Tiempo de Retencin de Slidos (TRS) debe
desecharse una cierta cantidad de lodos.
Aplicacin 3. Fermentador de cerveza
En el fermentador en forma de
torre los flculos de levadura se
mantienen en suspensin por el
movimiento ascendente del medio y
las partculas arrastradas son
devueltas por medio de un dispositivo
de sedimentacin situado en la parte
superior de la torre.
La levadura es capaz de alcanzar
tamaos de flculos relativamente
grandes, que no pueden ser
arrastrados por el flujo.
Fermentadores en Cervesur- Arequipa
b.- Biorreactores de membrana
El Reactor Biolgico de Membrana (MBR), incluye
dos procesos: uno de degradacin biolgica
aerobia o anaerobia y otro proceso de separacin
de los slidos suspendidos y mo, mediante
filtracin por membrana (Corado, 2010)
Un MBR es una modificacin del proceso
convencional de fangos activos (FAC) donde la
separacin del fango del agua tratada se realiza
mediante una filtracin con membranas en vez de
un decantador.
Ventajas: poca rea ocupada, calidad de efluente,
es posible eliminar el proceso de desinfeccin.
La Membrana puede ser:
Microfiltracin (MF): Con poros de 0.5 a 0.1 m.
Ultrafiltracin (UF): con poros de 0.1m a 5 nm
Nanofiltracin (NF): presenta poros de 0.01 m a
0.001 m
smosis Inversa (RO): remueve solutos
Tipos De Materiales De La Membrana
Los polmeros mas usados son:
Polifluoruro de Vinilideno (PVDF)
Polietilsulfonas (PES)
Polietileno (PE) 2
Polipropileno (PP)
Configuracin De La Membrana
Placa Plana (1)
Enrollada En Espiral (2)
Tubular (3)
Fibra Hueca (4)
3

4
1
c.- Lecho con goteo
En el reactor de lecho con goteo
(en ingls, trickle bed), el lquido
es rociado en forma de spray
sobre la parte superior del
empaquetamiento y las gotas
descienden a travs del lecho en
forma de pequeas corrientes.
El aire puede introducirse por la
base, y puesto que la fase lquida
no es continua a travs de la
columna, el aire se mueve con
relativa facilidad.
Se utilizan en el tratamiento
aerobio de aguas residuales.
Biofiltros para aguas residuales
El lecho empacado tiene un perfil
de organismos :
- En superficie, micro y macro
fauna (macroinvertebrados)
- En la zona intermedia, diversos
tipos de algas
- En la zona profunda bacterias,
protozoos y otros organismos
adheridos.
Medios de soporte.
El lecho puede ser:
De piedras: 25-100 mm (1-4pulg): Porosidad 40- 60%, Superficie especifica 40- 70
m2/m3 o m-1.
De plstico: Superficie especifica de 80 a 160 m2/m3.
Porosidad 90-95%
La pelcula adherida aumenta hasta un lmite al cual se desprende formando lodo
Torres percoladoras
Pueden tener hasta 12 m de altura.
El relleno suele ser de materiales plasticos
4.4.- Biorreactores de medio solido

Los bioprocesos en medio slido ofrecen una serie de ventajas econmicas


sobre los procesos sumergidos para la obtencin de productos de alto valor
agregado, como: enzimas, antibiticos, hongos comestibles, cidos
orgnicos, aminocidos, pigmentos, metabolitos secundarios, etc., debido a
los bajos niveles de humedad y a la disminucin del volumen del medio por
unidad de peso de sustrato, adems se obtiene una alta productividad, y el
tratamiento del efluente es reducido.
TIPOS.
Pueden ser: de bandejas, de tambor, y de cama empacada o columna de
lecho fijo.
a.- de Tambor.
Consisten de un cilindro que gira lentamente
volteando al medio de cultivo ayudado de pestaas
adheridas a la pared.
Los biorreactores de tipo tambor con paletas, hace
ms eficiente la trasferencia de oxigeno y mejora la
mezcla.
Este biorreactor presenta dificultades en el control
de temperatura y humedad debido a problemas de
aglomeramientos de clulas. (Ruiz Leza et al)
(a) Rotatorio: (1) Entrada de aire, (2) embalaje
rotatorio, (3) conector, (4) boquillas de entrada de
aire, (5) lnea de aire, (6) rodillos, (7) tambor
rotatorio, (8) medio slido, (9) aro.
(b) Con paletas: (1) entrada de aire, (2) medidor de
temperatura, (3) chaqueta de agua, (4) paletas, (5)
salida de aire, (6) motor para agitacin, (7) reactor,
(8) medio slido, (9) rbol de agitacin
b.- Biorreactor de bandejas
Construidas con paneles de
chapa plastificada en el
exterior y acero inoxidable el
interior, inyectados con
poliuretano de 70 m/m. de
espesor.
Contiene controlador de
temperaturas, humedad,
horarios, periodos e
indicaciones pticas de los
procesos.
El calor y la humedad se
producen de manera
independiente.
Se usan en fermentacin de
pan.
c.- Biorreactor de cama empacada.
Constan de un cilindro, lleno con una carga de
esponjas, polmeros sintticos (espumas de poliuterano,
poliestireno), canastas o cajas delgadas de acero
inoxidable perforadas, para inmovilizar las clulas en el
soporte con el medio de cultivo.
Se provee aireacin por flujo forzado en la parte
inferior del cilindro.
Presenta gran esfuerzo de corte sobre las celulas, y se
forman gradientes de temperatura a travs de la
columna que pueden afectar al producto deseado (Ruiz
Leza et al)

Birreactor de cama empacada. (1)


Camas de esponja, (2) medio de
cultivo, (3) difusor de aire, (4)
entrada de aire, (5) Entrada de
agua, (6) salida de agua
Aplicacin en produccin de biodiesel.
La produccin del biodiesel incluye una etapa de
reaccin de transesterificacin de cidos grasos del
aceite, con un alcohol en presencia de un catalizador,
para producir una mezcla de alquil-steres (biodiesel) y
glicerina.
La reaccin se lleva a cabo tpicamente en un tanque
agitado.
Para alcanzar conversiones aceptables (+90%), es
necesario operar a temperaturas del orden de 60C y
tiempos de reaccin del orden de una hora.
Los tiempos de reaccin largos se atribuyen
principalmente a limitaciones de transferencia de masa
y no tanto a la velocidad de reaccin.
Se utiliza dispositivos con microcanales en zig-zag
para favorecer el micromezclado debido a los cambios
de direccin en los canales y mejorar la conversin en
el reactor.
Un lecho empacado como medio para emular
microcanales se puede lograr con vidrio molido o
perlas de vidrio.
V.- DISEO DEL BIOREACTOR
Principales acciones de diseo:
A.- Seleccin del tipo de reactor.
En general los bioreactores Batch se utilizan para pequeos volmenes
de produccin, y los de cultivo continuo para volmenes mayores, donde
es importante disminuir los costos de operacin.

B.- Determinacin del tamao.


Se hace a partir de los balances de materiales, y el factor clave esta dado
por el tiempo de residencia (Tr)
5.1.- Dimensionamiento del Cuerpo del Biorreactor:

Dimensionar el tamao del tanque o cuerpo del biorreactor, a travs de


variables adimensionales, para escalar el biorreactor y adaptarlo a otra escala
de proceso.
Punto de partida son los balances de materia y energa.

Balance general
En l se considera el sistema como una caja negra, el ambiente externo y los
flujos que entran (F1) y salen (F2).
VELOCIDAD VELOCIDAD VELOCIDAD VELOCIDAD
DE DE DE DE
ACUMULACIN = ENTRADA - SALIDA + GENERACION

Balance general biomasa


Velocidad de Acumulacin = Velocidad de Entrada Velocidad de Salida +
Velocidad de Formacin Velocidad de Consumo
Balance del consumo de sustrato

El sustrato es utilizado por las clulas como fuente de energa, como


materia prima para la sntesis de macromolculas constitutivas, y en la
formacin de producto.
En un tiempo cualquiera, el consumo de sustrato (S) es:

s = sx + sp + sE
Donde:
S = Sustrato total consumido
Sx = Fraccin de sustrato utilizado en formacin de biomasa
Sp = Fraccin de sustrato utilizado en formacin de producto
SE = Fraccin de sustrato utilizado para obtener energa
Balance en Cultivos continuos: Quimiostato ideal
Se alimenta medio estril (X0= 0) a un
bioreactor, y sale una suspensin de clulas
para mantener las concentraciones y el
volumen de lquido constante.
Las concentraciones a la salida del reactor son
iguales a las del interior por la hiptesis de
mezclado perfecto
Volumen de lquido = volumen de reactor = Vc

Balances de masa.
Planteando balances de masa:

Un quimiostato opera en estado


estacionario, por tanto, se cancela el
trmino de acumulacin de masa:
Balance de biomasa:

Donde: Fv: caudal volumtrico de medio de cultivo agregado (L/h)


Factor de dilucin: es el caudal/volumen D=Fv/V

Si se alimenta medio esteril, Xo= 0, por tanto:

Donde:

Si la velocidad de crecimiento sigue la expresin de Monod

S: concentracin de sustrato limitante


Si el factor de dilucin D > m , las clulas no se podrn reproducir lo suficientemente
rpido para mantenerse y se produce lavado(washout) con X = 0
Este factor se conoce como dilucin crtica (Dc);
Dc = mSo / Ks + So
En condiciones normales de operacin continua: So >> KS Dc = m
Balance de masa para sustrato en EE y sin metabolismo endgeno.

FV: caudal volumtrico de medio de cultivo agregado (L/h)


S: concentracin de sustrato limitante del crecimiento (g/L)
V: volumen del reactor (L)
g: velocidad especifica de crecimiento de biomasa (1/h)
X: concentracin de biomasa (g/L)
qP (gP/gclulas/h): velocidad especfica de productos extracelulares
YMX/S (g clulas/gS) : mximo rendimiento de biomasa a partir de S
YP/S (gP/gS) : rendimiento de producto extracelular a partir de S
Concentracin msica de clulas (EE y sin metabolismo endgeno):

Como adems g = D, si la formacin de productos extracelulares es


despreciable:

La productividad en un fermentador continuo se obtiene como el producto


del factor de dilucin por la concentracin de clulas, DX (g/Lh).
se obtiene del producto del factor de dilucin por la concentracin de clulas,
DX (g/Lh):
REFERENCIAS
Durand, A. (2003). Biorreactor design for solid fermentation. Biochemical Engineering Journal
13,113-125.
Echeverry N., Quintero O., Ramrez M. y lvarez H. Control de un biorreactor para fermentacin
alcohlica en continuo. Universidad Nacional de Colombia, Sede Medelln Facultad de Minas
carrera 80 barrio Robledo. - Medelln COLOMBIA. Grupo de Automtica de la Universidad
Nacional (GAUNAL), Instituto de Automtica y Procesos Industriales (IAPI)
Flores Hernndez A. A., Flores Montiel M. , Reyes Reyes J., Astorga Zaragoza C. M. Diseo y
modelado de un bioreactor tipo batch y continuo para aplicaciones de control automtico.Centro
Nacional de Investigacin y Desarrollo Tecnolgico-CENIDET Interior Internado Palmira s/n Col.
Palmira C.P 62490 Cuernavaca, Morelos, Mxico artur_beto@cenidet.edu.mx Telfono: 777-256-
1490.
Paz Astudillo Isabel. Diseo integral de biorreactores continuos de tanque agitado aplicados a
procesos de fermentacin. Universidad nacional de colombia sede manizales, Facultad de
ingeniera. Doctorado en ingeniera automtica. Manizales, 2010.
Ruz-Leza H. A., R. M. Rodrguez-Jasso, R. Rodrguez-Herrera, J. C. Contreras-Esquivel, C. N.
Aguilar Diseo de biorreactores para fermentacin en medio slido. Revista Mexicana de
Ingeniera Qumica, vol. 6, nm. 1, 2007, pp. 33-40, Universidad Autnoma Metropolitana
Unidad Iztapalapa Mxico.
Trujillo-Roldn Mauricio A., Valdez-Cruz Norma A.. El estrs hidrodinmico: Muerte y dao
celular en cultivos agitados. Revista latinoamericana de microbiologa. Vol. 48, Nos. 3-4 Julio -
Septiembre. 2006, Octubre - Diciembre. 2006 pp. 269 280.
Trujillo Roldan Mauricio y Galindo Enrique. El estrs hidrodinmico en cultivos celulares.
Biotecnologia 2003. vol 3 N 01, pp 07-22.
Lizardi Jimnez Manuel. Contribucin al estudio de la hidrodinmica y transferencia simultnea
de masa en biorreactores airlift de tres fases: produccin de un consorcio microbiano degradador
de petrleo. Tesis para obtener el grado de Doctor en Biotecnologa. Universidad Autonoma
Metropolitana.Iztapalapa, Mexico, Junio de 2011.
Corado Revolorio Hosni Irraim. Diseo de un biorreactor de membrana para la regeneracin de
las aguas residuales en un establecimiento hotelero. Tesis de grado. Universidad de San Carlos
de Guatemala, Facultad de Ingeniera, Escuela de Ingeniera Civil. Guatemala, mayo de 2010.
Iglesias Esteban Raquel , Ortega de miguel Enrique, Martnez Tarifa Mara, Simn Andreu Pedro,
Moragas Bouyat Lucas, Garca Fernndez Emilia, Robust Cartr Jordi e Rodrguez-Roda Layret
Ignasi. Avances en el diseo y la operacin de los biorreactores de membrana: La experiencia
espaola. Ingeniera Civil 168/2012.
Ferrara de Giner Griselda. Biorreactores de crecimiento adherido y suspendido operados por
carga y secuencialmente para la remocin de nitrgeno. Tesis para optar al ttulo de Doctor en
Ciencias de la Ingeniera, Universidad Central de Venezuela, Caracas, 2008.
Erazo Raymundo y Cardenas Jorge. Determinacion experimental del coeficiente de transferencia
de oxigeno en un reactor Batch. UNMSM. Revista peruana de Quimica e Ing. Quimica. UNMSM.
Vol.4, N 2, Pags 22-27 (2001)
Rittmann y MacCarty, 2001