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Espectroscopa

Caractersticas de la Luz
Colores
Qu es longitud de Onda?
Relacin entre frecuencia, velocidad y longitud de onda
Absorcin / Absorbitividad
Las leyes de Lambert y Beer

Espectrofotometra
Colorimetra y Espectrofotometra como procedimientos analticos

Fotocolormetro

ESPECROFOTMETRO
Curva Patrn

Referencias e Imgenes
La espectroscopia es el estudio del espectro de la luz que emiten los
compuesto y los elementos.

De este estudio, se puede conocer su composicin, temperatura,


densidad, velocidad de desplazamiento y propiedades de los mismos.
Caractersticas de la LUZ
La luz tiene una naturaleza dual:
Como onda
Como una corriente de partculas o paquetes de
energa (fotones)
Albert Einstein desarroll en 1905 la teora de que la luz
estaba compuesta de unas partculas denominadas
fotones, cuya energa era inversamente proporcional a la
longitud de onda de la luz.
3
1

Foton

2
La teora electromagntica de la luz propuesta por Maxwell:
La perturbacin que se propaga como ondas de luz est
formada por fuerzas elctricas y magnticas, y la perturbacin
se produce con cargas elctricas en movimiento.
Efecto de la emisin electromagntica
El efecto fotoelctrico demuestra el comportamiento de la
luz como partcula (grnulos o corpsculos)
La naturaleza corpuscular de la luz se observa en fotos
de objetos iluminados muy dbilmente.
La imagen se forma punto a punto, y muestra que la luz
llega a la pelcula fotogrfica por unidades separadas
que los producen.
Estos descubrimientos dieron origen a toda la tecnologa
moderna de telecomunicaciones como la televisin
En estas imgenes se
puede apreciar, debido a
la toma fotogrfica de los
elementos puntuales
que apoyan a esta teora
Los seres humanos (y algunos animales) apreciamos una
amplia gama de colores que, por lo general, se deben a la
mezcla de colores de diferentes longitudes de onda. Se
conoce como color puro al color de la luz con una nica
longitud de onda o una banda estrecha de ellas.
Cuanto ms larga es la longitud de onda de la luz visible
tanto ms se acerca al color rojo.
Asimismo las longitudes de onda corta estn en la zona del
color violeta.
As todos los elementos existentes poseen un espectro
Hay varios tipos de espectros, los ms comunes son los
espectros continuos, los de emisin y los de absorcin.

Si es colocado frente al espectroscopio se podr ver, un elemento:


En situaciones en las que se le somete altas temperaturas y presiones
y no se presentan lneas obscuras se trata de un espectro continuo.
En situaciones normales y se observan unas lneas de colores frente a
un fondo negro, se trata de un espectro de emisin.
Y por ltimo si sucede la primera situacin y entre el elemento
afectado y el espectroscopio se coloca un elemento a menor
temperatura que el primero, se obtiene el espectro de absorcin
La luz blanca al descomponerla, produce un espectro
continuo, que contiene el conjunto de colores que
corresponde a la gama de longitudes del espectro visible.
Todos los elementos poseen un espectro propio, a temperaturas
elevadas que producen espectros discontinuos .
Qu es
longitud de onda?
CARACTERSTICAS DE LAS ONDAS

nodo

f
La longitud y la frecuencia de onda son inversamente
proporcionales y se relacionan mediante la siguiente
ecuacin

c c
f c E f
f
U.V.
X
L GAMMA
u
350 nm
z
v La luz visible es slo una pequea parte
i del espectro electromagntico con
longitudes de onda que van
s aproximadamente de 350 nanmetros
i hasta unos 750 nanmetros

b nanmetro, nm = 10-9 m.

l 750 nm
e Infrarrojo
Microondas
Radio
La luz blanca est compuesta de ondas de diversas
frecuencias. Cuando un rayo de luz blanca pasa por un
prisma se separa en sus componentes de acuerdo a la
longitud de onda
As la luz blanca es una mezcla de todas las longitudes de
onda visibles.
En el espectro visible, las diferencias en longitud de onda
se manifiestan como diferencias de color.
La distribucin de los colores se determinan por la longitud de onda
de cada uno de ellos.
Las longitudes de onda mas largas que las del rojo se les
conoce como infrarrojas y las mas cortas que el violeta,
ultravioletas.

Ultravioleta Luz visible Infrarrojo

4000 A < 4000 A 7500 A > 7500 A

UV Violeta Azul Verde Amarillo Naranja Rojo IR


4000 A Espectro Visible 7500 A
Relacin entre frecuencia, velocidad y
longitud de onda*
Frecuencia natural

Cualquier objeto oscilante tiene una 'frecuencia


natural,(vibracin en ausencia de perturbacin).
frecuencia es el Nmero de vibraciones por
segundo

As Frecuencia, es nmero de veces


que la onda se repite por segundo.

La Frecuencia se mide en Hertz (Hz)


Quin es HERTZ?

HEINRICH HERTZ (1857-1894), Investigador alemn que construy un


dispositivo para generar y detectar en un laboratorio ondas electromagnticas,
demostrando su existencia as como, se reflejan estas ondas, se refractan y se
comportan como las ondas de luz

Estim que la frecuencia f de la onda era de alrededor de 3 x 107 Hz. y


determin que su longitud era de 10 m. Con estos valores estableci que la
velocidad c de la onda es

c = f = (3 X 107 Hz) X (10 m)

= 3 X 108 m/s = 300 000 km/s

o sea, la velocidad de la luz.


1 Hz (o hercio) es igual a 1 ciclo u oscilacin por
segundo. (1 Hertz = 1 ciclo/seg)

Un kilohercio (kHz) = mil de ciclos por segundo

Un megahercio (MHz) = un millon de ciclos por


segundo

Un gigahercio (GHz) = mil millones de ciclos por


segundo
Un pndulo de 1 m de longitud presenta una frecuencia de 0,5
Hz, es decir que el pndulo va y vuelve una vez cada 2
segundos.
frecuencia = velocidad/longitud de onda

Como la luz viaja a una


velocidad de
3 x 108 m/s

Freclimite luz visible = 3x108 (m/s) / 10-6 (m) = 3x1014 Hz. Es


decir: 300 000 000 000 ciclos por segundo
Relacin entre Medidas en valores Hertz y Metros
Las ondas electromagnticas de frecuencias
extremadamente elevadas, como la luz o los rayos X,
suelen describirse mediante sus longitudes de onda, que
frecuentemente se expresan en nanmetros.

Un ejemplo es: Una onda electromagntica con una


longitud de onda de 1 nm tiene, aproximadamente una
frecuencia de 300 millones de GHz.
El sonido se propaga a una velocidad de 340 m cada
segundo

La nota La tiene una frecuencia de 440 Hz


= 340 (m/s) / 440 Hz (ciclos por seg) = 0.77 m

4 x 10-5 cm = 400 nm (luz violeta)


7 x 10-5 cm = 700 nm (luz roja)
Algunas equivalencias

1m 0.001 mm 10-6 m

nm = mm 0.001m 10-9 m

1 0.0001m 0.1 nm 10-10 m


Comparacin de las mediciones de las
longitudes de onda con la luz visible.
La energa UV es mayor que, cualquier color
del espectro visible. Sin embargo los rayos X
son ms energticos que la luz UV, como se
puede apreciar por su longitud de onda.

Con base a lo anterior se puede entender


que existe una relacin inversa entre la
longitud de onda y la energa del fotn
correspondiente.
Entonces, las energas en el rango ultravioleta-visible
excitan los electrones a niveles de energa superiores
dentro de las molculas y las energas infrarrojas
provocan solo vibraciones moleculares
El color percibido de una solucin depende de la
combinacin de colores complementarios que la
atraviesan
Proceso de Absorcin
La energa de excitacin a una molcula
proveniente de un fotn durante el proceso de
absorcin y se representa as:
A + hf A* A + calor

donde:
A es el absorbente en su estado de energa bajo,
A* es el absorbente en su nuevo estado de
excitacin energtica
hf representan a la constante de Planck y la
frecuencia respectivamente
La energa del fotn incidente posee una longitud
de onda ()

A* es inestable y rpidamente revierte a su estado


energtico ms bajo, perdiendo as la energa
trmica correspondiente.

La absorcin de determinadas longitudes de onda


depende de la estructura de la molcula absorbente
(absortividad, a)
Cuando un rayo de luz monocromtica con una intensidad I0 pasa a travs de una
solucin, parte de la luz es absorbida resultando que la luz emergente I es menor
que I0

Luz incidente (I0) Luz absorbida Luz emergente (I)

a = absortividad
a
I0
I

c = concentracin.
(nmero de partculas por cm3)

b
Longitud del medio absorbente
o ancho de la celda
Absortividad (a)

a es una constante de proporcionalidad


que comprende las caractersticas
qumicas de cada compuesto, o
molcula y su magnitud depende de las
unidades utilizadas para b y c.
Cuando se expresa la concentracin en moles por
litro y la trayectoria a travs de la celda en
centmetros, la absortividad se denomina
absortividad molar y se representa con el smbolo e
.
En consecuencia cuando b se expresa en
centmetros y c en moles por litro.
A = e bc
Donde A representa la absorbancia del compuesto
Las leyes de Lambert y Beer *
Ley de Lambert: cuando un rayo de luz monocromtica (I0)
pasa a travs de un medio absorbente, su intensidad
disminuye exponencialmente (I) a medida que la longitud
del medio absorbente aumenta

I = I0e-ab

I0 I I0 I
I0 I

1 cm. 2 cm. 3 cm.

Ancho de la celda
Ley de Beer: Cuando un rayo de luz monocromtica pasa a travs de un
medio absorbente, su intensidad disminuye exponencialmente a medida
que la concentracin del medio absorbente aumenta

I = I0e-ac

I I
I0 I I0 I0
Lo que significa que combinando ambas leyes se crea la Ley de Beer-
Lambert donde la fraccin de luz incidente que es absorbida por una
solucin es proporcional a la concentracin de soluto y al espesor de la
sustancia atravesada por la luz. La relacin entre la luz incidente (I0) y la
reflejada (I) dar una idea de la cantidad de radiacin que ha sido
absorbida por la muestra.
Ley de Lambert Beer:

I = I0 e-abc

Si despejamos: I/I0 = e-abc


Al cociente de las intensidades se denomina Transmitancia

T = I/I0 = e-abc
Sacando logaritmos:
lne I/I0 = abc

Convirtiendo a log10:
Log10 I/I0 = 2.303 abc
log10 I/I0 = abc

Absorbancia = log10 I/I0 = abc


La Transmitancia (T) es la relacin entre la
intensidad de luz transmitida por una
muestra problema (I) con la intensidad de luz
incidente sobre la muestra (Io):

T = I / I0

Se expresa como % T
La absorbancia es directamente proporcional a la
longitud del recorrido b a travs de la solucin y la
concentracin c del color absorbente. Estas relaciones
se dan como:

A = abc

A menudo b es dada en trminos de cm. y c en gramos por litro, entonces la


absortividad tiene unidades de lg1cm1.
Qu relacin guardan la transmitancia y la
absorbancia?

De acuerdo a las caractersticas de la sustancia


analizada, la luz que no se absorbe atraviesa la
solucin
LUZ
A
B
S Luz transmitida
O

I0 R
B
I
I
D T = I/I0
A
Por lo tanto la absorbancia es reciproca de
la transmitancia
Absorbancia contra concentracin (comportamiento lineal)

Absorbancia

Concentracin

% Transmitancia contra concentracin (pendiente con signo negativo y


comportamiento exponencial)

% Transmitancia

Concentracin
Absorbancia

De loA anterior se desprende que la Absorbancia (A) o luz


que es absorbida por la muestra es igual al logaritmo en
base diez del recproco de la transmitancia (T) o bien al -
log10 de la transmitancia, en el que el disolvente puro o
(blanco) es el material de referencia; esto es:

A = log10 1/T = log101- log10 T = 0 log10 T = log10 T


La representacin grfica correspondiente a absorbancia y
transmitancia en un gradiente de concentraciones es la siguiente:

Concen
tracin
Obtencin de TRANSMITANCIA utilizando valores de Absorbancia

Con base en la relacin: T = 10-abc


y considerando que T se menciona en porcentaje (%)
%T = 10-abc x 100.
Aplicando logaritmos a la expresin anterior
log10 %T = -abc log 10 10 + log10 100
Invirtiendo trminos
log %T = log10 100 -abc log 10 10 = 2 abc * 1
log10 %T = 2 abc
Como abc = Absorbancia = A
log10 %T = 2 A.
log10 %T = 2 A.
Ejemplo:
Una absorbancia de 0.6 a que equivale en % T?

Log10 % T = 2 0.6 = 1.4

Log10 % T = 1.4

%T = 1 / Log10 1.4 10

Aplicando antilog. a

1.4 = 15 % de transmitancia
Obtencin de absorbancia a partir de un valor de
% de transmitancia

RECORDANDO:
A = log10 1/T
Ejemplo de clculo
%T = 30
T = 0.30
Sustituyendo (1/T) 1/0.30 = 3.33
Log10 3.33 = 0.523 de absorbancia
Se le llama espectrofotometra a la medicin
de la cantidad de energa radiante que absorbe
una molcula o un elemento en su estado puro,
en funcin de la longitud de onda de la
radiacin electromagntica.

* Arco iris en Marte


Cmo se puede medir la radiacin que emiten o
absorben los cuerpos?.
Un aparato capaz de obtener el espectro de una
radiacin, es decir, de separar la radiacin en
sus componentes, se llama un espectroscopio.
Si el aparato es capaz de fotografiarla se llama
un espectrgrafo, y
Si es capaz de medirla diremos que se trata de
un espectrmetro.
Cuando es capaz de medir tambin la intensidad
de la radiacin, se llama espectrofotmetro.
1817
Espectroscopio

Espectgrafo
Espectmetro

De fluorescencia Imagen de Marte vista con


ayuda de espectmetro de
rayos Gamma

De Emisin
ptica
Para metales
Colorimetra y Espectrofotometra
como procedimientos analticos *
Las tcnicas colorimtricas se fundamentan
con la medicin de la absorcin de radiacin
visible por sustancias coloreadas.

Sin embargo, cuando una muestra a


determinar no posee coloracin, es
necesario llevar a cabo un tratamiento de
color empleando substancias que que
reaccionen de forma proporcional con el
compuesto de inters
Las sustancias que se analizan deben ser coloreadas. Cuanto
mayor es la concentracin de la sustancia a analizar, mayor
debe ser el color.
Tambin es posible que la muestra pueda no pueda
ser detectada, si su espectro de absorcin se
encuentre en las regiones, regiones del UV o
infrarroja

Visn de las abejas

Orbitas de TITAN
Casiopea A: ecos de luz en infrarrojo
La diferencia entre colorimetra y
espectrofotometra consiste en el tipo de instrumental empleado:

El colormetro es un aparato en donde la longitud de onda se selecciona por


medio de filtros pticos coloreados que son insertados en este.

En el espectrofotmetro la longitud de onda es seleccionada mediante


dispositivos monocromadores los cuales estn integrados a la mquina.
Algunos de los procedimientos colorimtricos o
espectrofotomtricos con los que se cuenta
para precisar la concentracin de una sustancia
en solucin son los siguientes:

Referencia de color
Colormetro Klett
Espectrofotmetro
M.C.I/2005

FOTOCOLORMETRO KLETT / SUMMERSON


Fundamento de colormetro Klett
Una solucin que absorbe el rojo pero no el amarillo y
el azul con la combinacin de estos dar un color
verde.

Luz incidente Luz absorbida Luz emergente

Rojo
Amarillo Verde
Azul
Amarillo
Azul }
Por lo anterior podemos aplicar un sencillo
mtodo para precisar con cual filtro podramos
leer una solucin dependiendo el color de esta

Cuando la solucin sea roja no se deber utilizar


un filtro de color rojo porque justamente ese es el
color que no absorbe.

En relacin a esto, en el manual del fotocolorimetro


Klett aparece la siguiente tabla que se puede
utilizar para determinar que filtro se debe emplear
de acuerdo al color de la solucin a estudiar:
Rango Soluciones
Color del filtro
espectral coloreadas

Roja, Naranja,
Azul 400-465 Amarilla, Verde,
Turbias
Roja, Amarilla,
Verde 500-570 Violeta, Naranja,
Azul

Azul, Verde,
Rojo 640-700
Amarilla
A menudo se hace referencia a la estrella de colores
para facilitar el recordar la eleccin del color de filtro para
lectura colorimtrica. Para soluciones de color azul verde
y amarilla correspondera un filtro rojo. Para soluciones de
color rojo, naranja o amarrillo seleccionaramos un filtro
color azul. Finalmente para soluciones con color verde,
azul o amarilla elegiramos un filtro rojo.
Manejo del
Fotocolormetro
1. Confirmar, que el filtro (A) adecuado se encuentre
dentro del portafiltros (B) y este en su lugar (C)
2. Compruebe que la aguja indicadora (D) este en el
centro, en cero; si no es as ajuste a cero con la
perilla (E) que se localiza en la parte superior;
siempre y cuando la lmpara se encuentre apagada

C
D E

M.C.I/2005
3. La lmpara (F) se enciende con el apagador (G),
deje calentar entre 5 y 10 minutos.
4. Ajuste la escala del potencimetro (H) con la perilla
correspondiente (I) a cero
5. Coloque la cubeta (limpia) (J) con el blanco, en su
sitio (K) y encienda con el interruptor (L)

F G

H
K

I
L

J
M.C.I/2005
6. Mediante la perilla (M) del galvanmetro , se acopla la lectura
a cero , lo que implica que la aguja (D) y la escala (H) deben
estar en cero.
7. Para leer las soluciones problema : Hay que retirar de la
cubeta el blanco y colocar la solucin problema, la aguja (D)
se desviar de su posicin , es necesario nuevamente ajustar
(con I) a cero, la lectura que proporcione la escala (H) es la
correspondiente al problema

M
D

M.C.I/2005
Limitaciones instrumentales y qumicas:
1. Limitaciones de la ley de Beer: las soluciones deben ser diluidas,
por la interaccin de las concentraciones y la absorcin de los
solutos. ( generalmente deben ser menor de 0.01 M)
2. La absortividad, depende del ndice de refraccin de la solucin y
sta depende de la concentracin , por tanto debe incluirse una
correccin, en la ecuacin: log P e bc
o

P 2
2 2


3. Las desviaciones qumicas ocurren debido a las asociacin,
disociacin o reaccin de las sustancias absorbentes, con el
disolvente.
4. La desviacin instrumental, se debe a la exigencia de la ley de
Beer de usar una radiacin monocromtica, lo contrario ocasiona
una desviacin.
CUIDADOS
Las muestras no deben tener burbujas, encontrarse
turbias o con precipitados.
El volumen de la muestra no debe ser excesivo para
evitar que se desborde, en caso de que sucediera, se
debe limpiar con un pao limpio o papel absorbente
suave, para evitar rayarla.
La cantidad a adicionar es, mximo, hasta partes
de la cubeta
No se deben derramar lquidos, sobre todo solventes,
cidos o lcalis; dentro del contenedor de la cubeta,
se puede daar parte del mecanismo
El fotocolormetro nunca se debe encender sin filtro.
No deje que se sobrecaliente, mantenga apagado si
no lo utiliza.
Un espectrofotmetro es un instrumento que
descompone un haz de luz (haz de radiacin
electromagntico), separndolo en bandas
de longitudes de onda especficas, formando
un espectro atravesado por numerosas lneas
oscuras y claras, semejante a un cdigo de
barras del objeto, con el propsito de
identificar, calificar y cuantificar su energa
Distribucin de la luz en el
espectrofotmetro
Espectrofotmetro Mecanismo Interno
Met.Cient. I
COLOR LONGITUD DE ONDA ()
Rojo (R) 700 nm
Verde (G) 546.1 nm
435.8 nm
Azul (B)
Es usual que al seguir una receta para la
determinacin de la concentracin de un compuesto
en particular se indica una longitud de onda (
especfica a la que hay que leer con el colormetro o
espectrofotmetro.

Porque leer a diferentes (longitudes de onda)


compuestos parecidos pero diferentes?

La explicacin radica en el hecho de que cada


producto qumico se caracteriza por zonas del
espectro visible o no visible en el cual absorbe con
mayor o menor intensidad conformando en su
conjunto el espectro de absorcin de tal sustancia.
Cada compuesto (de complejo a simple) presenta un espectro de
absorcin caracterstico

Absorbancia


Las longitudes de onda con mayor absorcin (picos) correspondern
de forma general a aquellas con las que se leer la muestra para
determinar su concentracin
Absorbancia


La relacin entre la absorbancia por una sustancia a una
determinada y su concentracin es directamente proporcional es decir:
a mayor concentracin mayor proporcin de luz absorbida.

Absorbancia
Conc.
As, el espectro de absorcin de la clorofila es:
Colorante comn, la Rodamina 6G en Metanol..

Espectro de Absorcin (lnea contnua) y Espectro de Transmisin


(lnea discontnua).
celda de 5uL

La muestra se coloca en una cubeta* de forma


prismtica
Se asume que el tubo, celda o cubeta en la cual
se vierte la solucin a leer no debe desviar la
trayectoria de la luz como requisito para el
cumplimiento de la ley de Beer
Como el cuarzo aparte de ser muy transparente presenta un comportamiento
constante ante la variacin de la longitud de onda es comn que las celdas del
espectrofotmetro o colormetro sean de este material .
Curva Patrn

El razonamiento para el proceso de


determinacin de una concentracin
desconocida es:
A partir de concentraciones conocidas de las
cuales tambin se sabe su absorbancia (curva
patrn), es posible interpolar (intercalar) la
concentracin del problema sabiendo su
absorbancia (lnea roja en figura siguiente)
CURVA PATRN

0.6

0.5

A
Absorbancia del problema
B 0.4
S
0
R 0.3

B
A
0.2
N
C
Interpolacin
I
0.1
A

0
0 2 4 6 8 10 12

Concentracin mg/lt
Con base en que la Absorbancia guarda una relacin lineal con
la concentracin, se comprende la existencia de una relacin de
proporcionalidad entre la Absorbancia y la concentracin:

A1 / A2 = C1 / C2
Donde:
A1 = Absorbancia del problema.
A2 = Absorbancia de un estndar de concentracin conocida.
C1 = Concentracin del problema.
C2 = Concentracin del estndar.

Si despejamos C1 = Concentracin del problema

A1 (problema) * Conc estndar


Conc. (problema) =
A2 (estndar)
Ejemplo de curva patrn para la determinacin de safranina;
donde se solubiliza este colorante nicamente en agua siendo
por tanto el agua misma el tubo blanco o de referencia para la
calibracin del equipo (colormetro o espectrofotmetro)

TUBO Stock de Safranina Agua Destilada ml


(3 x10 -4 g/ml) ml

1 0 10
2 0.05 9.95
3 0.10 9.9
4 0.20 9.8
5 0.40 9.6
6 0.80 9.2
En este ejemplo de determinacin de Glucosa, en la preparacin de
los tubos para la lectura de la curva patrn, se incluyen ms
elementos y por lo cual el tubo blanco (0) contiene todos los
componentes excepto la glucosa con el fin de poder calibrar la
absorbancia del equipo a cero

Compuesto 1 2 3 4 5 6 7
(blanco)

Glucosa 0,1 mg/ml


0.0 0.1 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0
(mL)
Agua destilada
1.0 0.4 0.9 0.8 0.2 0.6 0.0
(mL)
Fenol al 5% (mL) 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0
Acido sulfrico
5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0
(mL)
RESULTADO de la curva patrn anterior
Absorbancia en el Espectrofotmetro a 490 nm

Tubos Absorbancia Curva de calibracin de glucosa


1 0
1
2 0.135 0.8

Absorbancia
3 0.253 0.6

4 0.417 0.4

0.2
5 0.658
0
6 0.574 1 2 3 4 5 6 7

7 0.768 Tubos
Un aspecto importante de la evaluacin
espectrofotomtrica, es que muchas molculas orgnicas
no absorben en el intervalo del espectro visible sino en el
rango de longitudes de onda acordes al ultravioleta o al
infrarrojo

Por lo que es comn, actualmente, que la mayora de los


espectrofotmetros, actuales, se encuentren provistos
con lo necesario para leer en de tales intervalos

As, los grupos carbonilo presentes en los aldehdos


(RCHO), cetonas (RCOR), cidos carboxlicos (RCOOH), l
steres (RCOOR) y amidas (RCONHR) dan lugar a
absorciones intensas en la regin del espectro de infrarrojo
situada entre 1780-1640 cm-1.
Absorciones mximas (picos de absorcin) de algunos compuestos que
absorben en la regin ultravioleta:
Grupos funcionales cuyos picos de absorcin se localizan en la regin
del infrarojo
Tipos de Espectrofotmetro
Existen en la actualidad diversos tipos de aparatos con los mismos
principios los hay mecnicos y digitales; unos miden solo la luz
visible, otros son ms precisos y miden tambin luz U.V. , Infrarroja,
de absorcin atmica (AA), flurescencia de rayos-X de emisin de
plasma (ICP),, multipropsitos (para medir directamente la solucin
con suspensin, muestras slidas y biolgicas), acoplado a masas,
etc.
MCI MCI
Para medir Luz Visible
Para medir Luz Visible y U.V.

MCI

Para medir Luz Visible y U.V.


Diferentes tipos de espectrofotmetros
Spectronic 20 D Spectrnic 20
Partes del Spectronic 20 D
Manejo de espectrofotmetro

En la siguiente diapositiva se les proporciona el instructivo para el manejo el


espectrofotmetro Modelo Spectronic 20.
Manejo de espectrofotmetro
Prender el aparato (a)10 minutos antes de utilizarse,
se activar la luz roja de encendido (b).
Seleccionar la longitud de onda con el botn (c).
Ajuste (con a) a 0% de transmitancia, con la tapa
cerrada y sin muestra.
Insertar la cubeta con el blanco en su seccin (d).

d
c

a
Ajustar (con e) a 100% transmitancia (0 absorbancia)
Retirar el blanco de la cubeta, agregarle la muestra
problema, e insertar en su espacio, bajar la tapa.
La aguja (d) del lector se deslizar sobre la escala (f) , se
lee en % de transmitancia en unidades de absorbancia

e
CUIDADOS
Las muestras no deben tener burbujas, encontrarse
turbias o con precipitados.
El volumen de la muestra en la cubeta, no debe ser
excesivo para evitar que se desborde, en caso de
que sucediera, se debe limpiar con un pao limpio o
papel absorbente suave, para evitar rayarla.
La cubeta se sujeta por los lados opacos.
La cantidad a adicionar es, mximo, hasta partes
de la cubeta
No se deben derramar lquidos, sobre todo solventes,
cidos o lcalis; dentro del contenedor de la cubeta,
se puede daar parte del mecanismo
Se debe mantener, el espectrofotmetro, limpio y
libre de humedad